• 제목/요약/키워드: $N_2$ purification

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Purification and Characterization of Recombinant Human Interferon Alpha 2a Produced from Saccharomyces cerevisiae

  • Rae, Tae-Ok;Chang, Ho-Jin;Kim, Jung-Ho;Park, Soon-Jae
    • BMB Reports
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    • 제28권6호
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    • pp.477-483
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    • 1995
  • The recombinant human interferon alpha 2a ($rhIFN-{\alpha}2a$), expressed in Saccharomyces cerevtsiae, was purified from insoluble aggregates. The inclusion body of $rhIFN-{\alpha}$ was solubilized by guanidine salt in the presence of disulfide reducing agent. The refolding of denatured $rhIFN-{\alpha}2a$ was achieved by simple dilution. The authentic interferon alpha, which has two correctly matched disulfide bonds, was seperated from incompletely oxidized $IFN-{\alpha}$ and dimeric $IFN-{\alpha}$ by use of a CM-Sepharose column, followed by size exclusion columns at two different pH conditions. The purified protein has been subjected to detailed physicochemical characterization including sequence determination. Unlike other $rhIFN-{\alpha}2a$ from E. coli reported, the $rhIFN-{\alpha}2a$ from S. cerevisiae has no methionine residue at its N-terminus originating from the start codon, ATG. The pI of the protein was determined to be 6.05 with a single band in the pI gel, which demonstrated that the purified $rhIFN-{\alpha}$ was homogeneous. The structural study using circular dichroism showed that the protein retains its three dimensional structure in the wide range of pH conditions between pH 3 and 9, and only minor strucural deformation was observed at pH 1.0.

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Box model을 이용한 서해 곰소만 하전 갯벌의 질소 수지 (Nitrogen Budget Analysis Using a Box Model for Hajeon Tidal Flat in the West Coast of Korea)

  • 유재원;홍재상;양성렬;박경
    • 한국해양학회지:바다
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    • 제7권4호
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    • pp.257-266
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    • 2002
  • 1999년 4월 17-18일 양일 간 전라북도 부안, 변산반도 남단에 위치한 곰소만의 하전 갯벌에서 3.0$\times$4.5 ㎦의 연구 지역을 설정 , box model을 이용한 물질(Chl-a, DIN, DON, TN) 수지 계산과 자정 기능의 추정을 위한 현장 조사를 실시하였다. 조사 지역의 Chl-a 소실률(-0.05mg Chl/$m^2$/hr)은 일본 아이치현 미카와만 이시키 갯벌의 7% 수준으로 나타났다. 이렇게 낮은 소실률은 낮은 식물플랑크톤 현존량, 조사 시기의 낮은 온도에 따른 대사율 감소 그리고 조사 지역의 낮은 대형저서동물량 때문인 것으로 추정되었다. 질소의 측면에서 물질 수지의 계산 결과, 13.5 $\textrm{km}^2$ 면적의 하전 갯벌에서는 하루 동안 TN및 PON의 소실률이 각각 8.36$\times$$10^{2}$, 5.36$\times$$10^{3}$kgN/day로 그리고 식물플랑크톤 소실에 따른 PON 소실률이 1.62$\times$$10^{2}$kg N/day로 추정되어 갯벌이 연안해역에서 질소 제거에 중요한 역할을 수행하고 있음을 시사하였다. 곰소만 하전 갯벌에서의 PON 소실률을 기존의 1개 하수처리장 평균 처리비용과 비교 할 때 13.5$\textrm{km}^2$ 면적의 하전 갯벌의 수질 정화기능은 대규모 하수처리장 2개 이상에 상당하는 경제적 가치를 지니는 것으로 나타났다

호소의 수질개선을 위하여 설치한 부댐의 장기간 성능평가 (Long-term Performance of Secondary dam Installed for Water Purification of Reservoir)

  • 김봉균;박준석;원희재;김윤용
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제19권10호
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    • pp.668-676
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    • 2018
  • 우리나라의 저수지는 유효수심이 낮고 소규모의 인공호소가 대부분이어서 주변의 농경지로부터 유입되는 유기물질과 축산폐수 및 생활하수에 의한 수질오염에 취약한 실정이다. 이에 여러 가지 공법을 통하여 이를 개선하고자 노력하고 있으나 여전히 저수지의 오염정도가 심각한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 저수지의 유입부에 설치되는 침강지를 조성하기 위한 사석 위주의 부댐을 대체하면서 수질정화 효과를 부여하기 위하여 수질정화용 부댐을 경기도내 저수지에 설치하여 36개월간 수질개선효과를 측정하였다. 연구결과에 따르면 COD 14.6%, SS 38.6%, T-N 9.5%, T-P 11.2%로 나타났으며 계절 등 시기별로 유입수의 농도 변화가 뚜렷하였고 유입수의 농도가 높을수록 수질정화효과가 높게 나타났으며 36개월의 장기간 운영에 따른 여재의 공극 막힘 현상은 발생하지 않았다. 따라서 침강지의 정화효율이 아닌 부댐의 정화효율임을 고려하여 볼 때 수질정화용 부댐을 농업용 저수지에 설치할 경우 장기간 동안 침강지로부터 호소내로 유입되는 오염물질을 효과적으로 차단하여 호내의 수질오염을 방지할 수 있을 것으로 판단된다.

인공습지시스템에서 수리학적 조건과 수질정화특성 (Purification Characteristics and Hydraulic Conditions in an Artificial Wetland System)

  • 박병흔;김재옥;이광식;주기재;이상준;남귀숙
    • 생태와환경
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    • 제35권4호통권100호
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    • pp.285-294
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    • 2002
  • 본 연구는 농업용저수지의 수질개선을 위한 인공습지 시스템에서 수리학적 부하조건과 수질정화 특성간의 상관관계를 평가하고, 습지의 조성과 관리에 관한 기본적이며 주요 인자들을 규명하고자하였다. 인공습지시스템은 저수지 중층수를 유입시키기 위한 양수장과 미나리, 창포, 줄, 부들, 갈대등의 정수식물을 식재한 6개의 개별습지로 구성되어 있다. 시스템은 자유수면흐름방식으로 유입처리유량 $0.012-0.122\;m^3/s$,수리학적 체류시간 0.5-2.0 hr의 수리학적 고부하조건으로 운영하였으며, 수심은 0.1-0.2m, 유입수질은 저수지를 대상으로 하여 비교적 낮은 영양염류 농도(TN 2.224-2.462 mg/L, TP 0.145-0.164 mg/L)를 가지고 있다. 본 연구기간 중 각 개별습지의 평균 수질정화효율은 TN 12.1-14.3%로 갈대조에서 높게 나타났으며, TP는 6.3-9.5%로 식물 종에 따른 른 차이가없었다. SS는 17.4-38.5%, Cht-a는 12.6-20.2%로 미나리조에서 높게 나타났는데, 이는 유입수 농도가 다소 높은 때문으로 판단된다. 시간당 정화량은 TN $1.299-2.343\;g{\cdot}m^{-2}{\cdot}d^{-1}$ TP $0.85-1821\;g{\cdot}m^{-2}{\cdot}d^{-1}$, SS는 $17.9-111.6\;g{\cdot}m^{-2}{\cdot}d^{-1}$. Chl-3는 $0.011-0.094\;g{\cdot}m^{-2}{\cdot}d^{-1}$로 정화효율에서와 달리 TN은 줄에서 가장 높았고, TP는 창포에서 높았다. 침강성 물질인 SS와 Chl-a는 미나리에서 높게 나타났으며, 미나리는 BOD, COD, TN, TP등 다른 수질항목에서도 높은 값을 보여주고 있어 정화효율에서와 같이 유입수농도가 습지내 물질제거에 영향이 있음을 보여준다. 정화효율 및 시간당 정화량과 수리학적 조건간의 상관관계는 수심, 체류시간, 일유입량, 수리학적 부하량, 유입수 농도, 온도 등 다양한 변수에 의한 영향으로 비교적 낮게 나타났다. 정화효율과 수리학적조건간의 상관계수($R^2$)는 수리학적 체류시간과 0.016-0.731,일처리유량과는 0.015-0.868을 나타내었으며, 시간당 정화량과 수리학적 조건간의 상관계수($R^2$)는 수리학적 체류시간과는 0.173-0.763,일처리유량과는 0.209-0.770의 범위를 나타내었다. 정화효율과 수리학적 부하조건간의 상관계수($R^2$)Tt 0.5 이상을 나타내는 각 수생식물 습지별 수질항목은 체류시간과 일처리유량에 대해각각 20%,정화속도와 수리학적 조건간의 상관계수는 체류시간에 대해 53%, 일처리유량에 대해73%가 0.5이상을 보이고 있어 시간당 정화량과 수리학적 조건간의 상관관계가 정화효율과의 상관관계보다 좀더 유의성 있게 나타났다. 이것은 높은 수리학적 부하조건이 영양염류 등의 정화효율에는 크게 영향을 미치지 않음을 보여주고 있으며, 따라서 비교적 낮은 농도의 영양염류를 가지고 있고, 많은 처리수량을 요구하는 부영양화된 저수지의 수질개선을 위해서는 높은 수리학적 부하조건에서 시간당 정화량을 늘리는 관리방법이 경제적이며, 이에 초점을 맞추어 나가야 할 것으로 사료된다.

가다랭이 안와조직으로부터 DHA의 추출 및 정제 (Isolation and Purification of DHA from Skipjack Orbital Tissue Oil)

  • 정보영
    • 한국수산과학회지
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    • 제26권6호
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    • pp.529-537
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    • 1993
  • 가다랭이 안와유로부터 docosahexaenoic acid(DHA)를 정제하기 위해 기존의 방법들을 적용하여 비교 검토하고, DHA의 효과적인 정제를 위해 조작방법을 개량하였다. 가다랭이 안와조직의 총지질은 $55.4\%$였으며, 이 중 DHA는 $23.7\%$였다. 저온분별결정법과 요소결정법을 적용한 결과 순도에서 각각 약 $46\%$$61\%$의 DHA가 얻어졌다. 이들 방법들은 순도면에서는 다소 떨어지나, 정제조작이 단순하여 다량의 DHA 분리에 적합하였다. 질산은 수용액법은 상기 2가지 방법에 비하여 순도면에서는 약간 개선되었으나, 회수율이 대단히 낮았다($10\%$ 이하). 질산은 함침 실리카 칼럼 크로마토그래피법은 고순도 DHA의 정제방법으로써 적합하였다(순도 $98\%$ 이상, 회수율 $90\%$ 이상). 결과적으로 저온분별결정법과 질산은 함침 실리카 칼럼 크로마토그래피법을 조합한 개량법(2단계 정제법)이 가다랭이 안와유로부터 고순도 DHA($99.9\%$)의 정제를 위한 가장 효과적인 방법으로 평가되었다.

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용매정제법과 원심분리법으로 추출한 Si의 순도에 미치는 장입 원재료 순도의 영향 (The Effect of the Purity of Raw Materials on the Purity of Silicon Extracted by Solvent Refining and Centrifugation)

  • 조주영;서금희;강복현;김기영
    • 대한금속재료학회지
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    • 제50권12호
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    • pp.907-911
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    • 2012
  • High purity silicon can be obtained from Al-Si alloys by a combination of solvent refining and centrifugation. Silicon purification by crystallization of silicon from an Al-Si alloy melt was carried out using 2N and 4N purity aluminum and 2N purity silicon as raw materials. The effect of the purity of raw materials on the final silicon ingot purity by centrifugation was investigated for an Al-50 wt% Si alloy. Alloys were melted using an electrical resistance furnace, and then poured into a centrifuging apparatus. A silicon lump like foam was obtained after centrifugation and was leached by an acid in order to get pure silicon flakes. Then silicon flakes were melted to make a silicon ingot using an induction furnace. The purities of the silicon flakes and silicon ingot were enhanced significantly compared to those of the raw materials of silicon and aluminum. The silicon ingot made of 4N aluminum and 2N silicon showed the lowest impurities.

게껍질로부터 섬유가공용 Chitin.Chitosan 정제에 관한 연구 (A Study on Purification of Chitin and Chitosan for Textile Finishing Agent from Crab Shell)

  • 이석영;박성우;조환;구강
    • 한국염색가공학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.55-63
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    • 1999
  • The purpose of this study was to investigate the purification of chitin and chitosan for textile finishing agent from crab shell. Weight loss rate(removing Ca and protein), degree of deacetylation, solubility and MIC(Minimum growth inhibitory concentration) value of chitosan and molecular weight of the treated crab shell were measured. The results of this study were as follows : 1) Weight loss rate(removing Ca) of crab shell treated with HCI increased with the concentration of HCI and treatment time, but it became constant over 60 min. of treatment time. 2) Weight loss rate(removing protein) of crab shell treated with NaOH(0.5N∼2N) increased with the concentration of NaOH and treatment temperature and time, but it became constant above loot of temperature and over 200 min. of treatment time. 3) Degree of deacetylation of chitin treated with NaOH increased with the concentration of NaOH(40∼60%), but molecular weight decreased and thus MIC value increased. 4) Concentration of acetic acid should be above 0.3% to dissolve chitosan easily. Solubility for chitosan was the highest with formic acid, and the next was acetic acid, hydrochloric acid, lactic acid and sulfuric acid in order.

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Purification and Characterization of an Extradiol Dioxygenase Which Preferentially Acts on 4-Methylcatechol

  • Ha, You-Mee;Jung, Young-Hee;Kwon, Dae-Young;Kim, Young-Chang;Kim, Young-Soo;Kim, Chy-Kyung;Min, Kyung-Hee
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제9권3호
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    • pp.249-254
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    • 1999
  • A catechol 2,3-dioxygenase (C23O) was purified to apparent homogeneity from Pseudomonas putida SU10 through several purification steps consisting of ammonium sulfate precipitation and chromatographies on DEAE 5PW, Superdex S-200, and Resource-Q. Gel filtration indicated a molecular mass under nondenaturing conditions of about 130 kDa. The enzyme has a subunit of 34 kDa as was determined by SDS-PAGE. These results suggest that the native enzyme is composed of four identical subunits. The N-terminal amino acid sequence (30 residues) of the enzyme has been determined and exhibits high identity with other extradiol dioxygenases. The reactivity of this enzyme towards catechol and methyl-substituted catechols is somewhat different from that seen for other catechol 2,3-dioxygenases, with 4-methylcatechol cleaved at a higher rate than catechol or 3-methylcatechol. $K_m$ values of the enzyme for these substrates are between 3.5 and 5.7 M.

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곰팡이가 생산하는 세포외 $\beta$-Xylosidase의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of Extracellular $\beta$-Xylosidase from Fungi)

  • 고명선;이상준;이종근
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제22권6호
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    • pp.627-635
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    • 1994
  • The $\beta$-xylosidase from Penicillium sp. FX-102 was purified by 40~80% ammonium sulfate saturation, CM-Cellulose column chromatography, Sephadex G-200 gel filtration, and isoelec- tric focusing. The optimum pH and temperature for the activity of the $\beta$-xylosidase was pH 4.5 and 50$\circ$C, respectively. The enzyme was stable at the pH range of 4.5~5.5, and at 55$\circ$C for 10 min. The molecular weight of the enzyme was estimated to be about 300,000 daltons by Sephadex G-200 gel filtration and 310,000 daltons of monomer by SDS polyacrylamide gel electrophoresis. Isoelectric point of the enzyme was determined to be pH 4.4. The enzyme activity was strongly inhibited by Hg$^{2+}$, Ag$^{2+}$, n-bromosuccinimide and p-chloromercuribenzoate. Xylobiose (10 mM) was completely decomposed to xylose after 8 hrs enzyme reaction with 2 units of the $\beta$-xylosidase.

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새우젓 유래 Bacillus sp. S19가 생산하는 혈전용해 요소의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of a Fibrinolytic Enzyme Produced by Bacillus sp. S19 from Shrimp)

  • 장순애;김명희;이명선;오태광;손천배
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제28권5호
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    • pp.258-263
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    • 2000
  • A fibrinolytic enzyme was purified to homogeneity from Bacillus sp. S19 using DEAE and CM column chromatograhies, and gel filtration with a recovery yield of 13%. Its molecular mass was estimated to be 42 kDa by SDS-PAGE. The pH and temperature optima were 8.0 and $40^{\circ}C$, respectively. The enzyme was stable up to $45^{\circ}C$ and over a pH range of 6-9. The N-terminal amino acid sequence of the enzyme was determined as Alsa-Gln-Asp-Ala-Thr-Val-Asn-Ile-Ser-Ala-Glu-Arg-Gln-Val-Ile. The fibrinolytic activity was increased by $Cu^{2+}$ while it was strongly inhibited by metal ions such as $Cd^{2+}$ and $Ba^{2+}$ . In addition, the enzyme was inhibited by EDTA, but not by PMSF, suggesting that it is a metallorprotease.

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