Hwang Myung Sil;Yum Young Na;Kang Ho Il;Kim Ok Hee
한국환경성돌연변이발암원학회지
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제25권1호
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pp.1-5
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2005
The present work was undertaken to evaluate the antimetastatic potential of capsaicin (8methyl-N-vanillyl-6-nonenamide) by measuring its effects on matrix metalloproteinase activity, cell invasion and lung metastasis. Significant inhibition of matrix metalloproteinase-2 activity by capsaicin (100 $\mu$M) was detected by gelatin zymography. In vitro invasion assay showed capsaicin (50, 100 $\mu$M) reduced tumor cell invasion ($28-40\%$). Capsaicin (i.p., 2.5 mg/kg) inhibited development of lung colonization ($58\%$). These results suggest that capsaicin prevents metastasis in part through suppression of invasion of B16F10 melanoma cells by inhibiting matrix metalloproteinase-2 responsible for degradation of extracellular matrix.
The dephosphorylation specificity of protein phosphatase 2A (PP2A), calcineurin (PP2B) and protein phosphatase 2C (PP2C) were studied in vitro using myelin basic protein (MBP) as a model substrate which was fully phosphorylated at multiple sites by protein kinase C (PKC) or cyclic AMP-dependent protein kinase (PKA). In order to determine the site specificity of phosphates in myelin basic protein, the protein was digested with trypsin and the radioactive phosphopeptide fragments were isolated by high performance liquid chromatography (HPLC) on reversed-phase column. Subsequent analysis and/or sequential manual Edman degradation of the purified phosphopeptides revealed that Thr-65 and Ser-115 were most extensively phophorylated by PKA and Ser-55 by PKC. For the dephosphorylation kinetics, the phosphorylated MBP was treated with calcineurin or PP2C with various time intervals and the reaction was terminated by direct tryptic digest. Both Thr-65 and Ser-115 residues were dephosphorylated more rapidly than any other ones by phosphatases. However it can be differentiated further by first-order kinetics that the PP2B dephosphorylated both Thr-65 and Ser-115 with almost same manner, whereas PP2C dephosphorylated somewhat preferentially the Ser-115.
본 실험은 지방의 공급형태에 따른 반추위발효성상, 영양소 이용효율 및 증체율을 관찰하기 위하여 in vitro 실험과 in vivo 사양 실험을 수행하였다. In vitro에서는 지방원료로서 tallow(T), 그리고 tallow에 2가 양이온은 MgO(T-MgCa), $CaCl_2$(T-Ca), MgO와 $CaCl_2$의 혼합(T-MgCa) 및 Ca-salt 처리 tallow(T-CaS)의 총 5개의 처리구를 두었다. In vitro 배양 시간은 0, 6, 12, 및 24 hr별로 두었다. In vivo 사양 실험은 in vitro 실험을 통하여 얻은 결과를 토대로 성적이 좋은 T-MgCa 구와 T-CaS구를 선택하여 지방 무첨가구를 대조구로 하여 비육후기 한우의 성장률 및 육질에 미치는 영향을 관찰하고자 처리구당 10두씩 3 처리구로 완전임의 배치하여 80일간 실시하였다. 실험 결과를 살펴보면 배양시간 6 hr 이후부터 처리구들간 변화를 보였는데 6 hr에서는 T-MgCa 구와 T-CaS 구에서의 pH 값이 다른 처리구들의 값보다 높게 조사되었고(P<0.05), 12 hr에서는 T와 T-Mg 구에서의 pH 값이 MgO와 $CaCl_2$ 첨가구 보다 높게 조사되었다(P<0.05). Ammonia_N의 농도는 6hr를 제외하고는 처리구들간 통계적 유의차이는 없었다. 6 hrdptjsm ammonia-N 농도는 tallow 단독 처리구에서의 농도가 다른 처리구들보다 낮았다(P<0.05). 총 VFA 생성량은 6 hr에서는 처리구들간 통계적 유의차이가 없었지만 12 hr와 24 hr에서는 T 처리구에 비하여 tallow에 2가 양이온 첨가 또는 Ca-salt를 혼합 첨가한 처리구들에서 높게 조사되었다(P<0.05). 영양소(DM, OM, CP 및 NDF)분해율은 12 hr 이후부터 tallow 단독 처리구보다 양이온이나 Ca-salt 처리 tallow 구에서 보다 높은 경향으 보였다. 용해성 지방산은 전 배양 시간대에 걸쳐 T-CaS 구에서 가장 낮았으나, 불용성 지방산 염 형성은 가장 높았다(P<0.05). 사료급여 30일까지(feeding period I)는 사료섭취량, 일당증체량 및 사료 이용효율이 처리구들간 통계적 유의차이가 없었다. 반면, feeding period II(31${\sim}$50일)와 III(51${\sim}$80일) 그리고, 전 급여기간 동안 일당 증체량과 사료이용효율은 T-MgCa>T-CaS>Control순으로 높았다(P<0.05). 결론적으로 사료 섭취량의 증가가 제한되는 비거세 한우의 비육 마무리기에 있어서 고 에너지 사료제조를 위한 우지의 첨가시 Ca 및 Mg 보충은 반추위 발효성상 및 성장성적의 개선효과가 있음이 확인되었다.
본 연구는 국내 농산부산물을 이용하여 in vitro 반추위 발효 특성을 조사하고 에너지 사료인 농후사료와 유사한 반추위 발효특성을 나타내는 농산부산물을 선정하여 최적배합수준을 통한 농후사료 대체 효과를 규명하기 위하여 수행하였다. 본 연구를 수행하기 위하여 국내에서 다량 생산되는 9점의 부산물(소맥피, 단백피, 제빵 부산물, 비지, 미강, 청치, 대두피, 주정박, 버섯배지)을 선발하였다. 1차 실험에서는 in vitro 배양을 통해 각각 원료사료의 시간대별(0, 3, 6, 12, 24, 48 h) 반추위 발효특성을 평가하였으며, 옥수수 및 대두박과 유사한 발효특성을 나타내는 원료사료 2종류를 선발 하였다. 최종적으로 선발된 2종류의 원료사료는 다른 원료사료와 혼합한 조합구를 만들어 in vitro 배양을 통한 옥수수와 대두박의 대체효과를 평가하였다. 실험설계는 옥수수와 대두박을 기본배합으로 하여, 알팔파, 티머시 건초 및 옥수수사일리지를 조사료로 사용하였다(T1). T2구는 대두박을 비지로 2.5% 대체, T3구는 옥수수를 청치로 15% 대체하였으며, T4구는 옥수수와 대두박을 청치와 비지로 각각 10 및 5% 대체하여 in vitro 반추위 발효특성을 평가하였다. 각 원료사료와 농산부산물의 in vitro 반추위 발효 특성을 조사한 결과, 옥수수 및 대두박과 유사한 발효특성을 나타내는 농산부산물로 청치와 비지를 선정하였다. 2차 실험에서는 pH의 경우, T4구에서 T1구와 비교하여 유의하게 낮았으며, 가스발생량은 T3 구에서 T1구와 비교하여 유의하게 높았다(p<0.05). 또한 건물 분해율은 3 및 24시간에 T4구에서 T1구와 비교하여 높았다(p<0.05). 결과적으로 농산부산물인 청치와 비지의 사용은 옥수수와 대두박을 일부 대체하기 위해 사용가능할 것으로 판단된다.
본 연구는 고온 스트레스 하에 타우린 첨가가 육계의 간에서 heat shock protein 70(hsp 70) 및 cell free system 상태에서 단백질 합성에 미치는 영향을 조사하였다. 공시동물은 1일령 육계 120수를 2주간 사육 후, 대조(CO, $24^{\circ}C$)와 고온스트레스 처리($34^{\circ}C$)에서 타우린을 공급하지 않은 처리구(HO)와 타우린 0.1%를 공급한 처리구(HT)로 나누어 3처리 4반복, 반복 당 10수씩 배치하였다. 고온 스트레스는 3, 6, 9, 12일간 진행하였다. 최종 체중과 간 무게는 HO와 HT가 CO보다 유의적으로 낮았다(P<0.05). 그러나 타우린을 첨가한 HT은 HO보다 유의적으로 높았다(P<0.05). 육계 간에서 hsp70 발현은 HO가 CO와 HT보다 유의적으로 높았으나(P<0.05), CO와 HT는 유의적인 차이가 없었다. In vitro 실험에서 고온 및 타우린은 21일령 육계 간의 총 단백질 합성률에 영향을 미치지 않았다. 따라서 타우린 섭취가 in vivo 육계의 성장에서 고온 스트레스를 완화시키지만, 생체 내의 단백질 합성에 직접적인 영향을 미치지 않는 것을 보이며, 이러한 결과는 타우린이 다양한 생리학적 기전을 통해 단백질 turnover 대사에 간접적으로 영향을 미칠 수 있다는 것으로 사료된다.
The objective of the experiment was to determine the optimum cultural [moisture levels (55, 60 and 70%), days of fermentation (7, 14 and 21), temperature (25 and $35^{\circ}C$) of incubation)] and nutritional parameters (urea addition (0 and 2%) and variable levels of single super phosphate (0.25 and 0.50% SSP)) for bio-processing of the mustard (Brassica campestris) straw (MS) under solid-state fermentation (SSF) system. The performance of SSF was assessed in terms of favorable changes in cell wall constituents, protein content and in vitro DM digestibility of the MS. Sorghum based inoculum (seed culture) of Ganoderma lucidum to treat the MS was prepared. The 50 g DM of MS taken in autoclavable polypropylene bags was mixed with a pre-calculated amount of water and the particular nutrient in the straw to attained the desired levels of water and nutrient concentration in the substrate. A significant progressive increase in biodegradation of DM (p<0.001), NDF (p<0.01) and ADF (p<0.05) was observed with increasing levels of moisture. Among the cell wall constituents the loss of ADF fraction was greatest compared to that of NDF. The loss of DM increased progressively as the fermentation proceeded and maximum DM losses occurred at 28 days after incubation. The protein content of the treated MS samples increased linearly up to the day $21^{th}$ of the incubation and thereafter declined at day $28^{th}$, whereas the improvement in in vitro DM digestibility were apparent only up to the day $14^{th}$ of the incubation under SSF and there after it declined. The acid detergent lignin (ADL) degradation was slower during the first 7 days of SSF and thereafter increased progressively and maximum ADL losses were observed at the day $28^{th}$ of the SSF. The biodegradation of DM and ADL was not affected by the variation in incubation temperature. Addition of urea was found to have inhibitory effect on fungal growth. The effect of both the levels (0.25 and 0.50) of SSP addition in the substrate, on DM, NDF, ADF, cellulose and ADL biodegradation was similar. Similarly, the protein content and the in vitro DM digestibility remain unaffected affected due to variable levels of the SSP inclusion in the substrate. From the results it may be concluded that the incubation of MS with 60 percent moisture for 21 days at $35^{\circ}C$ with 0.25 percent SSP was most suitable for MS treatment with Ganoderma lucidum. Maximum delignification, enrichment in the protein content and improvement in in vitro DM digestibility were achieved by adopting this protocol of bioprocessing of MS.
The effects of seedtime and maturity stage on nutritive value of five maize stover varieties, including conventional maize (Kexiangyu 11, CM), fodder maize (Huqing 1, FM), high oil maize (Gaoyou 115, HOM), sweet maize (Kexiangtianyu 1, SM) and waxy maize (Kexiangluoyu 1, WM), were examined based on chemical composition, in vitro gas production and in situ incubation techniques. Maize stover was sampled at d 17 and d 30 after tasseling, and designated as maturity stage 1 and stage 2, respectively. The average dry matter (DM) organic matter (OM), crude protein (CP) and fiber contents were the greatest for HOM, SM and FM, respectively. CM had the highest in vitro organic matter disappearance (IVOMD) and volatile fatty acid (VFA) concentration. The highest ammonia nitrogen ($NH_3$-N) concentration in the incubation solution, and effective degradability of DM ($ED_{DM}$) and neutral detergent fiber ($ED_{NDF}$) were observed in SM. Advanced maturity stage increased (p<0.05) DM content, $ED_{DM}$ and $ED_{NDF}$, but decreased (p<0.05) OM and CP contents, and decreased (p<0.05) b and a+b values, IVOMD and molar proportion of valerate in the incubation solution for maize stover. Maize sown in summer had greater (p<0.05) OM content, but lower DM, CP, neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF) content compared with maize sown in spring. Maize sown in summer had greater (p<0.001) IVOMD, $NH_3$-N concentration in the incubation solution and $ED_{NDF}$, but lower (p<0.01) ratio of acetate to propionate compared to maize sown in spring. The interaction effect of variety${\times}$seedtime was observed running through almost all chemical composition, in vitro gas production parameters and in situ DM and NDF degradability. The overall results suggested that SM had the highest nutrient quality, and also indicated the possibility of selecting maize variety and seedtime for the utilization of maize stover in ruminants.
The effects of dry roasting whole faba beans (WFB) and whole lupin seeds (WLS) at 110, 130 or $150{^{\circ}C}$ for 15, 30 or 45 min on rumen (RDCP%), estimated intestinal (IDCP%) and total tract disappearance of CP (TDCP%) and intestinal availability (IARUCP%) of rumen undegraded CP (RUCP%) were determined. The RDCP values were estimated by in sacco technique by incubating nylon bags for 8, 12 and 24 h in the rumen of dairy cows. The IDCP and IARUCP values were estimated using a sequence of ruminal incubation, in vitro incubation in acid-pepsin for 1 h and then in pancreatin for 24 h of three-step in vitro procedure technique. Dry roasting at 130 and $150^{\circ}C$ decreased RDCP with correspondingly increasing IDCP. The IDCP value generally increased from 12.3(raw) to 8.6, 14.8 and 39.6% (WFB) and from 28.3 (raw) to 33.7, 36.2 and 56.2% (WLS) at 8 h rumen incubation; from 2.9 (raw) to 2.9, 4.6 and 23.3% (WFB) and from 19.6 (raw) to 19.0, 24.0 and 46.6% (WLS) at 12 h rumen incubation; from 1.3 (raw) to 1.9, 1.7 and 11.0% (WFB) and from 4.4 (raw) to 4.2, 10.7 and 36.7% (WLS) at 12 h rumen incubation as the temperatures rose to 110, 130 and $150{^{\circ}C}$ respectively. The TDCP values were always high and increased by time in the rumen, the average values of which were 97.9, 96.6; 99.2, 96.9 and 99.6, 98.7% for WFB and WLS, respectively, at 8, 12 and 24 h rumen incubation. But within the same retention time, TDCP was generally unchanged. The average IARUCP increased from 87.3 (raw) to 87.4, 88.7 and 92.0% (WFB); from 87.6 (raw) to 88.9, 91.5 and 93.0% (WLS) at roasting temperatures of 110, 130 and $150{^{\circ}C}$, respectively. It was concluded that dry roasting can shift the digestion of CP from rumen to the lower gastrointestinal tract without depressing the digestion of RUCP. The best processing condition in this study was dry roasting at $150{^{\circ}C}$ for 45 min in terms of effects on the disappearances and availability of CP. Research data on intestinal availability of individual amino acids need to be further investigated.
본 연구에서는 조직확장 응용을 위한 생체적합성 생분해성 하이드로젤을 제조하고, 그 기본특성을 분석하였다. 친수성 고분자인 poly(ethylene glycol)의 양 말단에 다양한 몰비의 D,L-lactide와 glycolide를 개환 중합시켜 PLGA-PEG-PLGA 삼중공중합체를 합성한 뒤 비닐기를 도입하여 하이드로젤 제조 시 swelling/degradation controllers(SDC)로 사용하였다. 합성한 SDC와 PEG diacrylate를 사용하여 라디칼 중합으로 제조한 하이드로젤은 건조된 상태에서도 유연하고 탄성을 보였으며 분해테스트에서는 SDC의 조성과 SDC/PEG의 몰비에 따라 다양한 팽윤지연시간과 분해기간을 갖는 것으로 나타났다. 그 밖에 기계적 물성과 팽윤압력을 측정하였고, 이식시험을 통해 이식용 하이드로젤을 사용목적에 맞게 이식하거나 삽입하였을 때의 생체 조직의 국소적인 병리적 양상을 육안관찰과 현미경적 관찰을 통하여 평가하였다.
위장관 종양 조직이 스텐트 내로 성장하는 것을 방지하는 피막형 스텐트가 개발되어 널리 사용되고 있으나 위산에 의한 막의 분해로 인해 스텐트 폐쇄나 파손이 있다. 이에 본 연구에서는 위산 환경하에서 막의 성분과 재질 농도에 따른 피막형 스텐트의 물성 변화와 안정성을 살펴보고자 하였다. 스텐트 막의 재질은 실리콘과 폴리우레탄을 사용하였고, 각각의 농도를 15%, 18%, 20%로 하여 제작된 스텐트를 pH 1.2 산성 용액에서 18주 동안 3주 간격으로 변화를 관찰하였다. 피막을 분석한 결과 동일 농도에서 비교하였을 때 실리콘이 폴리우레탄보다 두껍고 균일하게 코팅되었다. 인공 위액에 의한 폴리우레탄 피막의 분해가 실리콘 피막에 비해 심하였다. 반경 방향 팽창력의 크기는 실리콘 피막이 폴리우레탄 피막에 비해 상대적으로 컸다. 반경 방향 팽창력과 변형 회복력 모두 인공 위액에서의 침잠 기간이 경과함에 따라 점차 감소하였고, 폴리우레탄 피막 스텐트에서 감소율이 더 컸다. 결론적으로 실리콘 피막이 폴리우레탄에 비해 위산에 대해 안정성이 높음을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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