• 제목/요약/키워드: $CHCl_3$ extract

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미역 추출물로부터 충치 원인균, Streptococcus mutans에 대한 항균물질의 분리 및 동정 (Isolation and Identification of an Antibacterial Substance from Sea Mustard, Undaria pinnatifida, for Streptococcus mutans)

  • 윤소미;장준호;이종수
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제36권2호
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    • pp.149-154
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    • 2007
  • 건조 미역 10.4 kg을 acetone으로 추출, 여과한 다음 액-액 분배, 각종 크로마토그라피를 통하여 충치원인균, Streptococcus mutans에 대한 항균물질의 한 성분을 분리, 정제하고(160 mg, 수율 $1.5\times10^{-3}$%) 물질을 동정한 결과는 다음과 같다. 건조 미역 30 g 상당량의 추출액을 기준으로 용매 획분별 항균활성을 조사하였을 때, $CHCl_3$층이 73.2%로 가장 강하였고, hexane층이 62.0%이었으며, BuOH층이나 물층은 거의 없었다. 알루미나 칼럼에서는 산성 획분인 1% $NH_4OH:MeOH(1:1)$용매 획분이 81.0%의 항균활성을 나타내었으며, 실리카 칼럼에서는 $CHCl_3:MeOH(95:5)$용매에서 가장 높은 95.5%의 항균성을 나타내었고, ODS칼럼에서는 85% MeOH에서 96.4%의 항균성을 나타내었다. 최종적으로 ODS칼럼에서 95% MeOH를 이동상으로 하여 3개의 물질 S1(10 mg), S2(90 mg), S3(60 mg)을 분리 정제하였다. TLC에서 각 성분은 동일한 Rf값 0.42를 나타내어 동일한 물질로 추정되었으며, 이들을 메칠 유도체화한 성분들은 Rf값이 0.95로 바뀌어 이들 물질이 carboxyl기를 가지는 지방산으로 추정되었다. GC분석에서 표품 지방산과 비교한 결과, 이들은 $C_{18:4,n-3}$ 지방산과 retention time이 일치하였다. 또한, 메칠 유도체의 mass spectrum 분석 결과, m/z 290에 분자 이온 peak가 관측되어 $C_{18:4,n-3}$ 지방산의 methyl 유도체의 분자량과 일치하여, 이 물질을 3,6,9,12-octadecatetraenoic acid(stearidonic acid, $C_{18:4,n-3}$) 지방산으로 동정하였다.

매실의 항미생물 활성 연구 (Studies on the Antimicrobial Activities of Prunus Mume)

  • 임재웅;이규봉
    • 한국조리학회:학술대회논문집
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    • 한국조리학회 2001년도 하계정기학술세미나
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    • pp.29-41
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    • 2001
  • 본 연구는 매실을 천연 항균물질로서의 이용 가능성을 검색하였다. 먼저 매실을 물과 methanol로 추출 한 extracts를 paper disc법으로 항균활성을 확인한 후 MeOH extract를 용매별로 분획한 각각의 fractions으로 paper disc법과 그 결과를 토대로 활성이 높은 fractions을 비탁법을 이용하여 농도별로 액체 배지 상에서 저해활성을 확인하였다. 변패균인 M. leteus는 매실의 EtOAc 획분과 BuOH 획분에 의해서 저해 되었고 또한 $H_2O$ 획분과 CHCl$_3$ 획분도 저해활성을 보였다. 한편 저해농도 시험에서는 BuOH 획분 100ppm 첨가 시 전혀 생육을 하지 못했다. 매실의 EtOAc 획분과 BuOH 획분은 B. cereus, B. subtilis와 S. epidrimidis에 대해서 강한 저해 활성을 보였다. 저해농도 시험에서는 B. cereus는 BuOH 획분 100ppm, B. subtilis는 EtOAc 획분 100ppm, S. epidrimidis는 EtOAc 획분 100ppm에서생육을 하지 못했다. G(-)세균은 매실성분에 의해서 저해를 받지만 G(+)세균에 비하여 저항성이 컸다. E. coli는 EtOAc 획분 500ppm에서 미약한 생육을 하엿으며 S. typhimurium는EtOAC 획분, BuOH 획분 모두 1,000ppm에서 생육을 전혀 하지 못했으며 P. vulgaris는 BuOH 획분 100ppm, V. parahaemolyticus는 BuOH 획분, EtOAc 획분 100ppm에서 전혀 생육을 하지 못하는 결과를 얻었다 한편, 효모중 S. cerevisiae IF1950은 EtOAc 획분 500ppm에서 50%의 저해를 받았으며 S. cerevisiae ATCC4105는 1,000pm의 EtOAc fr. 에서 50%의 저해를 하였다. 항곰팡이 실험에서는 A. niger에서만이 아주 미약한 저해를 보였다.

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백작약 열수추출물의 산화적 스트레스 억제효과 및 유효성분 동정 (Inhibitory Effect of Hot-Water Extract of Paeonia japonica on Oxidative Stress and Identification of Its Active Components)

  • 정일윤;이주상;오헌;정우희;박혜란;조성기
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제32권5호
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    • pp.739-744
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    • 2003
  • 백작약(Paeonia japonim)의 열수추출물로부터 산화적 스트레스에 대한 억제 효과를 나타내는 유효 성분을 규명하고자 하였다. 열수추출물은 총매의 극성도에 따라 4종의 분획물(CHCl$_3$, EtOAc, n-BuOH, water)로 구분하였다. 항산화활성 시험 중 hydroxyl 라디칼 소거 시험에서는 열수추출물 및 각 용매 분획물은 모두 아주 낮은 활성을 보였다. 지질 과산화 시험에서는 열수추출물과 EtOAc 및 물 층 분획물이 50%(50 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ 농도에서 ) 이상의 억제활성을 보였다. DPPH 라디칼 소거 시험에서는 열수추출물과 EtOAc 및 n-BuOH 분획물이 80% 이상의 높은 활성을 보였으며, 특히 EtOAc 분획물은 50과 100 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서 BHA와 거의 동등한 전자 공여능(EDA값)을 나타내었다. 따라서, EtOAc 분획물에서 2종의 단일 물질을 분리하였다. 분리된 단일 물질인 PJE021-1과 PJE024-l은 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 농도에서 BHA보다 높은 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타냈다. PJE021-1은 $H_2O$$_2$에 의한 DNA의 산화적 손상에 대해 최고농도50 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$에서 $H_2O$$_2$처리구에 비해 93%의 경감 효과를 나타냈고, PJE024-1은 0.5 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 낮은 농도에서 71%의 경감 효과를 나타냈다. 이상의 결과로부터 이 2종의 단일 물질이 산화적 스트레스 억제 유효 성분임을 확인하였다. 이 단일 물질은 분광학적기기 분석과 물리적 특성을 분석한 결과 gallic acid(PJE021-1)와 (+)-catechin(PJE024-1)으로 동정되었다. 상기의 결과로부터 백작약은 산화적 스트레스에 대한 경감제로서의 가능성이 시사되었다.

칠황버섯으로부터 분리한 Lanostane-type Triterpenoid의 암세포성장 억제효과 (Cancer Cell Growth Inhibition of Lanostane-type Triterpenoids Isolated from Ganoderma gibbosum)

  • 김동화;이상국;박희준
    • 생약학회지
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    • 제51권1호
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    • pp.36-40
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    • 2020
  • The CHCl3 fraction of the MeOH extract of Ganoderma gibbosum (Ganodermataceae) exhibited cytotoxic activity on five cancer cell lines (MDA-MB-231, SK-hep1, A549, HCT116, and SNU638). Six highly oxygenated lanostane-type triterpenoids (lanostanoids) were isolated by column chromatography to test cytotoxicity on cancer cells. The five known lanostanoids were identified as gibbosic acids A, B, D, G, and H by comparison of molecular ion peaks with the literature data. The structure of a new lanostanoid, gibbosic acids I, was identified to be 3β,8β,15β,20S-tetrahydroxy-7,12,23-trioxolanost-9(11)-en-26-oic acid on the basis of NMR and MS spectroscopy. The three lanostanoids of gibbosic acids A, H, and I of the six isolates significantly suppressed the growth of cancer cells. In particular, the IC50 of gibbosic acid H was prominently low ranging from 2.64-6.56 μM.

쑥 추출물(抽出物)의 밭토양중(土壤中) 요소분해(尿素分解), 질산화(窒酸化) 작용(作用) 억제효과(抑制效果) (Inhibition of Urea Hydrolysis and Nitrification in Upland Soils by Artemisia asiatica Extracts)

  • 임선욱;신명호;박현준;김민균
    • 한국토양비료학회지
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    • 제31권4호
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    • pp.392-399
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    • 1998
  • 본 연구에서는 합성 요소억제제나 질산화억제제와는 달리 쑥(Artemisia asiatica)과 같은 천연물에 의한 토양중 요소분해와 질산화작용에 대한 저해효과를 검토하고저 하였다. 이를 위 위하여 쑥의 열수추출액과 유기용매 분획추출물을 준비하여 밭토양에 처리하였고 2일, 5일 동안 배양후에 요소태질소와 암모늄태질소, 질산태 질소를 측정하고 요소분해균과 urease 효소활성에 대한 각 추출액과 분획추출물의 영향도 검토하였다. 이번 실험을 통하여 얻은 결과를 요약하면 다음과 같다. 쑥잎의 열수추출액은 요소분해를 미약한 수준으로 촉진하였으나 반면 질산화작용은 억제하였고, 쑥잎 열수추출액을 0.5ml, 3.0 ml를 가하였을 때 질산태 질소함량은 무처리구에 비하여 각각 65.2%, 68.8% 줄어들었다. 쑥잎의 유기용매 분획추출물 중, chloroform분획을 제외한 모든 분획물이 요소분해에 대해 저해효과를 나타내었고 chloroform/methanol 분획을 2.0 ml 가했을 때, 잔존한 요소태질소 함량은 무처리구의 5.8배로 요소분해억제효과가 가장 좋았다. 한편 유기용매 분획추출물들의 질산화작용 억제효과 유무는 불명확 하였다. urease activity의 경우, 요소분해율이 무처리구와 비교시 97.5%에서 99.50%로 높게 나타났기 때문에 분획물이 urease의 활성을 저해하지 않는 것으로 생각되었다. 요소분해 bacteria 수는, 쑥의 chloroform 분획을 처리한 경우를 제외하고 모든 처리에 의해 감소하였다 (적요 2의 결과와 일치). 이로서 요소분해 저해효과는 urease의 활성을 저해하기 보다는 요소분해균을 저해하기 때문에 나타나는 것으로 생각되었다. 각 추출물 성분에 대한 예비시험과 박층 chromatogram을 통해, 그 조성이 복잡하고 다양한 화합물들이 요소분해와 질산화작용 억제과정에 관여할 것으로 추측되며 이를 분획 또는 단일활성 물질을 추적하여 그 효과를 확인할 일이다.

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Inhibitory Effect of Hexane Fraction from Myagropsis myagroides on Pancreatic α-Amylase In Vitro

  • Pak, Won-Min;Kim, Koth-Bong-Woo Ri;Kim, Min-ji;Cho, Ji-Young;Ahn, Dong-Hyun
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제25권3호
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    • pp.328-333
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    • 2015
  • A Myagropsis myagroides (Mm) methanol extract showed α-amylase inhibitory activity of 13% at a concentration of 5 mg/ml. Results showed that the hexane fraction from the Mm methanol extract exhibited α-amylase inhibitory activity with an IC50 value of 4.24 mg/ml. The hexane fraction was separated using silica-gel column chromatography, and six subfractions were obtained. The fraction eluted with CHCl3:MeOH = 50:1 showed the highest α-amylase inhibitory activity with an IC50 value of 0.72 mg/ml. This fraction was purified using Sephadex LH-20 column chromatography and an octadecyl silica (ODS) Sepak cartridge, obtaining seven subfractions. Fraction (Fr.) 4 also showed a strong α-amylase inhibitory activity with an IC50 value of 0.75 mg/ml. Fr. 4 was purified by Sephadex LH-20 column chromatography and ODS Sepak cartridge, obtaining six subfractions. Fr. 4-2 was identified as sargachromanol I with an IC50 value of 0.40 mg/ml, and the inhibition pattern analyzed from Lineweaver-Burk plots revealed it to be an uncompetitive inhibitor. These results suggest that Mm has potential as a natural antidiabetes agent.

The Use of qNMR for Quality Control of Coumarin-based Pharmaceuticals and Plant Medicines

  • Crocoli, Luana C.;Molon, Vinicius B.;Moura, Sidnei
    • Natural Product Sciences
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    • 제27권2호
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    • pp.128-133
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    • 2021
  • The Coumarin (1,2-benzopyrone) is the main secondary metabolite of Mikania laevigata Sch. Beep ex Baker and Mikania glomerata Spreng., which are popularly known as guaco. These plants have been used mainly in traditional medicine in the treatment of respiratory diseases because their bronchodilator effect. However, there are around 200 species of Mikania, which are quite similar in appearance. From these, only M. leavigata and M. glomerata have high concentrations of coumarins. In this line, the falsification of products Mikania based has been frequent. In this sense, this work demonstrated the application of the easy, fast, e not destructive method based in Nuclear Magnetic Resonance in quantitative mode (qNMR) for the determination of coumarin in both commercial and homemade guaco products. Thus, in the first step the compounds were extract from guaco leaves and syrups using chloroform (CHCl3), with or without ultrasound. About the method, was linear with a R2 = 0.9947 for 1,2-benzopyrone, with detection and quantification limits with were 0.11 and 0.36 mg mL-1 respectively. In the same line, the method was safe with RSD <0.3% and with recovery ranging from 93-101%. To confirm the applicability of the method, in the last step was applied to 10 real samples (6 from leaves and 4 from syrups). The content of the coumarin in the leaf extract ranged from 0.62 to 1.30 mg mL-1. For syrups I, II and IV, the content of coumarin was in accordance with the manufacturers. However, for de Syrup III, the concentration was 155% higher. In summary, the qNMR is a rapid method with minimal sample preparation that can be used to quantify coumarin in home-made plant extracts as well as in commercial samples as syrup for instance. This method is applicable for quality control of different plants-based products.

자생식물 추출물의 Lipoprotein-Associated Phospholipase $A_2$, Platelet-Activating Factor Acetylhydrolase 저해활성 (Inhibitory Effects of Natural Plant Extracts on Lipoprotein-Associated Phospholipase $A_2$, Platelet-Activating Factor Acetylhydrolase)

  • 유하나;조경현;석대은;정태숙
    • 생약학회지
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    • 제34권1호통권132호
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    • pp.100-108
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    • 2003
  • The regulation of plasma lipid level, particularly LDL cholesterol, represents the focus of current therapy for atherosclerosis. And $Lp-PLA_2$ is able to hydrolyse oxidized phosphatidylcholine within LDL into lyso-PC and oxidized fatty acids. $Lp-PLA_2$ is a potential biomarker of coronary heart disease and plays an important proinflammatory role in the progression of atherosclerosis. We investigated the inhibitory effects of methanol extracts of 224 natural plants on $Lp-PLA_2$ activity. Seven kinds of methanol extracts of tested plants showed above 50% inhibitory effect with the concentration of $100\;{\mu}g/ml$. The concentrated aqueous suspensions of each methanol extract were partitioned with n-hexane, $CHCl_3$, and EtOAc. Among them, EtOAc extracts of Astilbe chinensis var. davidii (root) and Pourthiaea villosa var. brunnea (leaf) significantly inhibited $Lp-PLA_2$ activity at the same concentration.

천연물로부터 염증성 포스포리파제 $A_2$ 저해제 검색 (Screening of Inflammatory Phospholipase $A_2$ Inhibitors from Natural Products)

  • 문태철;정광원;정규찬;손건호;김현표;강삼식;장현욱
    • 약학회지
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    • 제41권5호
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    • pp.565-570
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    • 1997
  • High levels of extracellular phospholipase $A_2$ (Plase $A_2$) associated with inflammatory process in man and animal models have been extensively reported elsew here. Thus, a logical approach to the treatment of inflammatory diseases should involve the inhibitors of Plase $A_2$. To develop new Plase $A_2$ inhibitors from natural products, two hundred crude drugs were screened using group II PLA$A_2$ inhibitory activity. Among them, methanol extract of 5 medicinal plants such as, Raphani Semen, Moutan cortex radicis, Arecae semen, Caryophylli Cortex and Betulae Cortex inhibited more than 90% of PLase $A_2$ activity at a concentration 2.5${\mu}g/ml$. Then, 10 methanol extracts sample were transferred into organic solvents, PLase $A_2$ inhibitory effects were found mainly in CHCl3 and EtoAc fractions.

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둥굴레(Polygonatum Odoratum var. Pluriflorum Ohwi)추출물의 당뇨 유발 흰쥐에 대한 혈당강화 효과 (Hypoglycemic Effect of Polygonatum Odoratum var. Pluriflorum Ohwi Extract in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats)

  • 임숙자
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제28권8호
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    • pp.727-736
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    • 1995
  • The hypoglycemic effect of Polygonatum odoratum var. Pluriflorum Ohwi was investigated after extracted with methanol. The methanol extract was fractionated into 4 layers ; hexane, chloroform, butanol and aqueous. Fifty male Sprague-Dawley rats(200-300g) were induced diabetes mellitus by the streptozotocin injection(45mg/kg B.W) into the tail vein and were divided into 5 groups ; diabetic control and 4 experimental groups. All groups of the rats were fed on a AIN-76 diet, and the 4 experimental groups were orally administered with each fraction(500mg/kg B.W) for 12 days and the diabetic control group was orally administered CMC. The body weight gain was monitered and the blood levels of glucose and cholesterol were measured. Levels of protein, triglyceride, and free fatty acid in plasma were analysed. The contents of protein, triglyceride and glycogen in liver and of protein and glycogen in muscle were also determined. The body weight gain was shown significantly higher in the H2O fraction group than that in the diabetic control group and the heart weight was greater in the CHCl3 group. The extents of blood glucose decrement were greater in the BuOH and H2O groups than that in the control group. The urinary glucose excretion was shown relatively small amount in the BuOH and H2O groups. The plasma cholesterol and protein levels were not influenced by these four fractions in diabetic rats. The liver glycogen level was significantly higher in the BuOH group. The results suggest that the orally administered BuOH and H2O fraction of Polygonatum odoratum var. Pluriflorum Ohwi exhibited hypoglycemic effect in streptozotocin induced diabetic rats.

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