Objectives: The purpose of this study wasto examine the effects of Kamijihwang-tang (KJHT) extracts on immune cells and cytokines in ovalbumin (OVA)-induced asthmatic mice. Methods: C57BL/6 mice were injected, inhaled and sprayed with OVA for 12 weeks (four times a week) for asthma induction. Two experimental groups were treated with different concentrations of KJHT (400 mg/kg and 200 mg/kg) extracts and cyclosporine A (10 mg/kg) for the later 8 weeks. At the end of the experiment, the mice lung, PLN and spleen were removed and immune cells were analyzed by flow cytometer, IL-5, IL-13, eotaxin-2, $TNF-{\alpha}$ were analyzed by real-time PCR, serum histamine was analyzed by ELISA kit. Results: $CD3^+$, $CD3e^-/CCR3^+$, $CD3e^+/CD69^+$, $CD4^+/CD25^+$, $B220^+/IgE^+$, and $CD3e^+/DX5^+$ cells in lung, PLN, and spleen of the KJHT group (400 mg/kg) decreased compared with that of the control group. $CD3e^+/CD69^+$, $CD4^+/CD25^+$, and $CD3e^+/DX5^+$ cells in lung, PLN, and spleen of the KJHT group (200 mg/kg), CD3+, $CD3e^-/CCR3^+$ cells in lung and PLN of the KJHT group (200 mg/kg) and $B220^+/IgE^+$ cells in lung and spleen of the KJHT group (200 mg/kg) decreased compared with that of the control group. mRNA expression of IL-5, IL-13, eotaxin-2, and $TNF-{\alpha}$ in lung tissue of the KJHT groups (400 mg/kg and 200 mg/kg) decreased compared with that of the control group. Histamine in serum of the KJHT group (400 mg/kg) decreased compared with that of the control group. Conclusions: These results suggest that KJHT can be utilized effectively in treating asthma because it significantly reduces inflammatory cells and cytokines.
Objectives : The aim of this study was to investigate the asthma-suppressive and immuno-regulatory effect of AHCR-HA (Root of Asarum sieboldii Miq. water extract) on OVA (ovalbumin)-induced asthma in mice. Methods : All C57BL/6 mice experimental groups, except the Normal and N-AHCR groups, were sensitized with OVA. The mice in the N-AHCR group and the OVA-AHCR group were treated with water extract of AHCR (1 %) by an oral administration, and the OVA-Saline group were treated with saline solution. Oral dosesof AHCR water extract and saline were administered for 8 weeks, three times a week. Results & Conclusion : The lung weight and total cells in the lungs of the OVA-AHCR group decreased significantly compared with those of the OVA-Saline group. Total leukocytes and eosinophils in BALF and photomicrographs of the OVA-AHCR group decreased significantly compared with those of the OVA-Saline group. The collagen accumulation in the lung sections of the OVA-AHCR group decreased significantly compared with those of the OVA-Saline group. The concentrations of IL-4, IL-5, IL-13 and IgE in BALF and the serum of the OVA-AHCR group decreased significantly compared with those of the OVA-Saline group. The mRNA expressions of $TNF-{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-4, IL-5 and IL-13 in the lungs of the OVA-AHCR group decreased significantly compared with those of the OVA-Saline group.
Aim: The present investigation was to evaluate the effects of essential oils of Wedelia chinensis (Osbeck) on free radicals and in vivo antioxidant properties. Methods: Essential oils were extracted using hydro-distillation and compound analysis was performed by GC-MS analysis. Screening for inhibitory activity was conducted by DPPH and OH-scavenging assays. In addition an in vivo study was carried out in cell line implanted cancer bearing mice with assessment of levels of catalase, superoxide dismutase, glutathione peroxidase, lipid peroxidation, nitric oxide and reduced glutathione. Finally, lungs were dissected out for histopathology study of metastasis. Results: GC-MS analysis revealed the presence of carvocrol and trans-caryophyllene as the major compounds with 96% comparison with the Wilily and NBS libraries. The essential oil exhibited significant inhibition in DPPH free radical formation. Whereas reducing power and hydroxyl radical scavenging activity are dose dependent. When compared with the standard, it was found that the essential oil has more or less equal activity in scavenging free radicals produced. In the animal studies, the level of antioxidant enzymes catalase, superoxide dismutase and glutathione peroxidase, as well as glutathione, were found to be increased in treated groups whereas lipid peroxidation and nitric oxide were reduced. Histopathology report also shows that the essential oil has a significant combating effect against cancer development. Conclusion: In all the in vitro assays, a significant correlation existed between the concentrations of the essential oil and percentage inhibition of free radicals. The in vivo studies also has shown a very good antioxidant property for the essential oil during cancer development. From, these results the essential oil can be recommended for treating disease related to free radicals and to prevent cancer development.
식중독 병원균인 장염비브리오균 (V. parahaemolyticus)의 세포외 분비 효소 중 콜라겐분해효소를 발현벡터인 pET-29b에 클로닝시키고 대장균에서 발현시킨 다음, 부분정제하여 그 특성을 조사하였다. V. parahaemolyticus collagenase는 $(NH_4)_2So_4$침전, affinity adsorption, 그리고 Sephacryl S-100 gel filtration 과정을 통하여 부분정제 되었다. 이 collagenase는 73%의 회수율과 43.7의 정제도를 나타내었으며, 전기영동시 분자량은 약 35 kDa로 나타났다. 이 효소의 최적 pH 및 온도는 6~12와 $35^{\circ}C$이었고, 온도안정성 조사에서 $55^{\circ}C$까지는 90% 잔존 찬성을 유지하였으나 $60^{\circ}C$이상에서는 급격하게 효소활성이 실활되었다. 기질특이성조사에서 type I collagen과 콜라겐분해효소의 합성기질로 알려진 Z-GPGGPA에서 gelatin과 casein에 비해 높은 활성을 보이는 것으로 보아 이 효소가 진정한 콜라겐분해효소라는 것을 알 수 있었다.
Pseudomonas sp. strain DJ77로부터 클로닝한 catechol 분해와 관련된 phnDEFG 유전자들이 존재하는 pHENX7에서 phnF 유전자의 염기서열을 밝혔다. Extradiol dioxygenase 유전자인 phnE와, 2-hydroxymuconic semialdehyde dehydrogenase를 생산하는 phnG 유전자 사이에 존재하는 유전자 phnF는 432 bps로 된 하나의 open reading frame(ORF)으로 존재하였고, 여기서 유추한 아미노산은 143개로 분자량 13,859 dalton의 polypeptide를 만들어 내고 있다. phnF 유전자는 Sphingomonas sp. strain HV3 catE 유전자 부위와 sphingomonas yanoikuyae B1의 xylE와 xylG 사이에 존재하는 ORF 부위의 염기서열과 각각 99%, 68.6%의 상동성을 가지고 있었다. 또한 PhnF 단백질의 아미노산서열은 citrobacter freundii DSM30040의 orfY 부위의 아미노산서열과 62.3%의 상동성이 있었다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Docosahexaenoic acid (DHA), an n-3 long chain polyunsaturated fatty acid (LCPUFA), is acquired by dietary intake or the in vivo conversion of ${\alpha}$-linolenic acid. Many enzymes participating in LCPUFA synthesis are regulated by peroxisome proliferator-activated receptor alpha ($PPAR{\alpha}$). Therefore, it was hypothesized that the tissue accretion of endogenously synthesized DHA could be modified by $PPAR{\alpha}$. MATERIALS/METHODS: The tissue DHA concentrations and mRNA levels of genes participating in DHA biosynthesis were compared among $PPAR{\alpha}$ homozygous (KO), heterozygous (HZ), and wild type (WT) mice (Exp I), and between WT mice treated with clofibrate ($PPAR{\alpha}$ agonist) or those not treated (Exp II). In ExpII, the expression levels of the proteins associated with DHA function in the brain cortex and retina were also measured. An n3-PUFA depleted/replenished regimen was applied to mitigate the confounding effects of maternal DHA. RESULTS: $PPAR{\alpha}$ ablation reduced the hepatic Acox, Fads1, and Fads2 mRNA levels, as well as the DHA concentration in the liver, but not in the brain cortex. In contrast, $PPAR{\alpha}$ activation increased hepatic Acox, Fads1, Fads2, and Elovl5 mRNA levels, but reduced the DHA concentrations in the liver, retina, and phospholipid of brain cortex, and decreased mRNA and protein levels of the brain-derived neurotrophic factor in brain cortex. CONCLUSIONS: LCPUFA enzyme expression was altered by $PPAR{\alpha}$. Either $PPAR{\alpha}$ deficiency or activation-decreased tissue DHA concentration is a stimulus for further studies to determine the functional significance.
개 추간판 디스크 2 증례(症例)를 대상으로 봉독약침 및 봉독약침과 한약제로 각각 치료하였다. 증례(症例) 1은 흉-요추부 추간판탈출증(T11-T12, T12-T13, L3-L4 및 L4-L5)으로 진단(診斷)된 증례이었으며. 증례 2는 흉추부 추간판탈출증(T10-T11 및 T12-T13)으로 진단(診斷)된 증례이었다. 이들 증례에 대하여 봉독약침(0.1 ml/혈위, 총$200{\mu}g$)을 실시(實施)하였으며, 운동요법과 수영요법도 병용하였다. 봉독약침에 사용한 혈위는 GV20-Bai Hui, GB30-Huan Tiao, ST36-Zu San Li, GB34-Yang Ling Quan, ST40-Feng Long, ST41-Jie Xi 및 BL40-Wei Zhong, 병변부 및 압통점이었다. 또한 증례 2에 대하여는 봉독약침과 더불어 Zheng Gu Zi Jin Dan(정골자금단(正骨紫金丹) : 1 g), Shiuh Duann(속단(續斷) .0.2 g), Du Zhong(두중(杜仲) : 0.2 g), Mo Yao(몰약(沒藥 : 0.2 g), Ru Xiang(유향(乳香) : 0.2 g) 및 Pyrite(자연동(自然銅) : 0.2 g)를 각각 총 9일간 경구투여(2회/1일)하였다. 증례 1은 총 4주간 11회 치료, 증례(症例) 2는 총 2주간 6회 치료 후 각각 보행이 가능하였다.
The study was carried out to compare the factors of overall preference In the sensory test to the analyzation of some compositions in the 7 kinds of old grasses : An Evening Primerose, a Spiderworts, the flower of a Convolvulus, So Ru Jang Yl, Shoe Bl Rum.O Yi Pul, Jip Sean Na Mul. Results were summaries as follows. 1. The Tannin contents of fresh sample and cooked samples were determined as 0.27~2.4g%, 0.25~1.439% respectively. The largest amount of fresh samples was contained In a Shoe Bi Rum. The smallest amount of them was in an Evening Primerose. The highest level of cooked samples was found in a Shoe Bi Rm, and the lowest was in the O Yi Pul. These results were similar to sensory test. 2. The free amino acid contents of 2 kinds of samples were determined as 25.15~179.5mg%, 1.86~13. 6mg% respectively. The largest amount of sweet taste of them was 0 Yi Pul and So Ru Jaeng Yl respectively. But So Ru Jaeng Yi is not appeared sweety becase this have much tannin. The smallest amount of sweet taste was a Spiderwort. The highest level of bitter taste was So Ru Jaeng Yl the and lowest was Jip Sean Na Mul. Among of them Jlp Sean Na Mul is similar to organoleptic test but So Ru Jaeng Yi is not strong bitter taste in sensory evaluation. The highest level of sour taste of cooked samples was So Ru Jaeng Yi and the lowest of them was Shoe Bi Rum. The reducing sugar contents of fresh sample and cooked samples were determined as 1.80~ 4.9g%, 1.84 ~3.579% respectively. The largest of fresh samples were So Ru Jaeng Yl and the lowest was Shoe Bi Rum. The highest of cooked samples were an Evening Primerose and the lowest was a Convolvulus. Among of these results an Evening Primerose was not similar to sensory test because it has much other components. The level of chlorophyll of fresh samples and cooked samples were determined as 11.7~39mg%, 11.3~40.3mg% respectively. The highest of fresh samples was Shoe Bl Rum and the lowest was J ip Sean Na Mul. The largest of cooked samples was So Ru Jaeng Yi and the lowest was a Jlp Seu Na Mul.
Objectives : The purpose of this study is analyzing the current research methodology of pharmacopucture for the treatment of animal cancer models. Methods : Four electronic databases were searched for animal studies published from January 2000 to September 2014 onward using these search terms "cancer, anticancer, pharmacopuncture, beevenom". Selected articles were described about animal cancer models. The methods used to induce cancer and the outcome measures used to assess the effects of pharmacopuncture on animal cancer models were analyzed. Results : 37 articles were included. For producing animal cancer models BALB/C mice(n=22) and C57BL/6 mice(n=17) were selected. And intravenous injection of B16-F10 melanoma cells into tail vein(n=14) or intraperitoneal injection of sarcoma-180 cells(n=14) were frequently used to induce cancer. Various pharmacopunctures were injected into acupoints $CV_{12}(n=19)$, $ST_{36}(n=8)$, $BL_{18}(n=8)$ or peritoneal cavity(n=6), tumor site(n=2), tail vein(n=2). Outcome measures were categorized into anti-cancer, anti-metastasis, general condition, cytotoxicity, immune response, toxicity. Median Survival Time(MST) and increase of life span(ILS)(n=26) was frequently used for evaluating anti-cancer effects. And pulmonary colonization assay(n=13) was frequently used for evaluating anti-metastasis effects Conclusions : Based on these data, further research would be needed to ascertain the effectiveness of pharmacopuncture for treating cancer and broaden the range of clinical applications.
Background: Dendritic cell (DC)-based cancer immunotherapy is studied for several years. However, it is mainly derived from autologous PBMC or leukapheresis from patient, which has limitations about yield and ability of DC production according to individual status. In order to solve these problems, inquiries about allogeneic DCs are performed but there are no preclinical trial answers for effect or toxicity of allogeneic DC to use for clinical trial. In this study, we compared the anti-tumor effect of allogeneic and autologous DCs from mouse bone marrow stem cells in mouse metastatic melanoma model. Methods: B16F10 melanoma cells ($5{\times}10^4$/mouse) were injected intravenously into the C57BL/6 mouse. Therapeutic DCs were differentiated from autologous (C57BL/6: CDC) or allogeneic (B6C3F1: BDC) bone marrow stem cells with GM-CSF, SCF and IL-4 for 13days and pulsed with B16F10 tumor cell lysate (Blys) for 18hrs. DC intra-peritoneal injections began on the 8th day after the tumor cell injection by twice with one week interval. Results: Anti-tumor response was observed by DC treatment without any toxicity especially in allogeneic DC treated mice (tumor burden score: $2.667{\pm}0.184,\;2.500{\pm}0.463,\;2.000{\pm}0.286,\;1.500{\pm}0.286,\;1.667 {\pm}0.297$ for saline, CDC/unpulsed-DC: U-DC, CDC/Blys-DC, BDC/U-DC and BDC/Blys-DC, respectively). IFN-${\gamma}$ secretion was significantly increased in allogeneic DC group stimulated with B16F10 cell lysate ($2,643.3{\pm}5,89.7,\;8,561.5{\pm}2,204.9.\;6,901.2{\pm}141.1pg/1{\times}10^6$ cells for saline, BDC/U-DC and BDC/Blys-DC, respectively) with increased NK cell activity. Conclusion: Conclusively, promising data was obtained that allogeneic DC can be used for DC-based cancer immunotherapy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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