GA 생합성에 결정적 역할을 하는 GA 3$\beta$-hydroxylase를 pIG121-Hm 벡터에 GUS유전자를 빼고 antisense로 클로닝하여 이를 동진벼에 도입한 결과 17개체의 절간신장이 억제된 형질전환한 식물체를 얻을 수 있었다. 일반 재배 동진벼를 대조군으로 하여 비교하였을때 antisense GA 3$\beta$-hydroxylase 유전자가 형질 도입된 식물체의 획득형질은 평균적으로 대조군에 비해 절간 신장의 억제가 확인되었다. 절간신장의 억제가 보인 개체의 엽육조직을 co취하여 Southen blot hybridization분석 결과 3개의 line에서 모두 single copy로 도입된 것으로 나타났다. 이로써$T_o$ 식물체 내에 antisense GA 3$\beta$-hydroxylase 유전자를 내포하고 있는 것으로 확인되었다. 이것은 antisense GA 3$\beta$-hydroxylase 유전자가 생체내에서 직접 또는 간접적으로 GA 3$\beta$-hydroxylase유전자의 발현에 관여한 것이라 사료되어진다.
$\beta$-l, 3-glucans are well known to enhance the immune reactions, resulting in antitumor, antibacterial, antiviral, anticoagulatory and wound healing activities. $\beta$-1, 3-glucans have various activities depending on molecular weight, degree of branching, conformation, water-solubility and intermolecular association. However, the $\beta$-1, 3-glucans linked backbone structure is essential and $\beta$-D-glucopyranosyl units are required for immunopotentiating activities. In this study, we tested the immunophamacological activities of insoluble $\beta$-1, 3-glucan from Agrobacterium sp. R259 KCTC 10197BP and confirmed the following activities: (1) IFN-${\gamma}$ production in PBMCs in the presence or in the absence of PHA, LPS, IL-18, and IL-12; (2) the induction of various cytokines in the spleen and thymus; (3) the adjuvant effect on the antibody production; (4) the cytotoxic and antitumor effects on cell lines and ICR mice. These results strongly suggest that $\beta$-1, 3-glucan from Agrobacterium sp. R259 KCTC 10197BP possesses various immunopharmacologica1 activities.
Kim, Sun-Yeou;Gao, Jian Jun;Lee, Won-Chu;Ryu, Kang-Sun;Lee, Kang-Ro;Kim, Young-Choong
Archives of Pharmacal Research
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제22권1호
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pp.81-85
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1999
Nine flavonoids (1-9) were isolated from the leaves of Morus alba (Moraceae). The structures of compounds were determined to be kaempferol-3-O-$\beta$-glucopyranoisde (astragalin, 1) kaempferol-3-O-(6"-O-acetyl)-$\beta$-D-glucopyranoside (2), quercetin-3-O-(6"-O-acetyl)-$\beta$-D-glucopyranoside (3), quercetin-3-O-$\beta$-D-glucopyranoside (4), kaempferol-3-O-$\alpha$-L-rhamnopyranosyl-(1 6)-$\beta$-D-glucopyranoside (5), quercetin-3-O-$\alpha$-L-rhamnopyranosyl-(1 6)-$\beta$-D-glucopyranoside (rutin, 6), quercetin-3-O-$\beta$-D-glucopyranosyl-(1 6)-$\beta$-D-glucopyranoside (7), quercetin-3,7-di-O-$\beta$-D-glucopyranoside (8) and quercetin (9) on th basis of spectroscopic and chemical studies. Compounds 7 and 9 exhibited significant radical scavenging effect on 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical.
Assay conditions for screening of $\beta$-1,3-glucan synthase inhibitor were evaluated. Cells in the beginning of mid-log phase showed the highest activity of the $\beta$-1,3-glucan synthase. Cells permeabilized with 1% digitonin treatment could be used as a good crude enzyme source for convenient screening of the $\beta$-1,3-glucan synthase inhibitors. Calcofluor white (0.125% in final) and papulacandin B (25 $\mu$g/ml) inhibit 90% and more than 50% of the $\beta$-1,3-glucan synthase activity, respectively. Cells grown at 37$\circ$C showed higher enzyme activity than those of 25$\circ$C. Catalytic factor of the $\beta$-1,3-glucan synthase was solubilized from particulated membrane preparations, holoenzyme, by extracting with 0.00938% CHAPS.
Streptomyces coelicolor A3(2)의 $\beta$-glucosidase 유전자를 분리하여 대장균에서 발현하여 특성을 조사하였다. 최적 활성을 나타내는 온도는 pH 5에서는 $20^{\circ}C$, pH 6에서는 $60^{\circ}C$에서 높은 활성을 나타냈다. pH에 따른 활성은 pH 3 이하와 pH 9 이상의 범위에서는 낮은 활성을 나타냈으며 pH 7에서 가장 높은 활성을 나타냈다. $\alpha$-pNPG($\rho$-nitrophenyl-$\alpha$-D-glucopyranoside), $\beta$-pNPG ($\rho$-nitrophenyl-$\beta$-D-glucopyranoside), $\beta$-pNPF($\\rho$-nitrophenyl-$\beta$-D-fucopyranoside)는 pH 3-10까지 비슷한 활성을 나타냈으며, $\alpha$-pNPG가 pH 7에서 다소 높은 활성을 보였다. $\beta$-pNPGA는 pH 5-9까지 높은 활성을 나타냈으며, 특히 pH 9에서 3배 이상의 높은 활성을 나타냈다. 기질 $\alpha$-pNPG, $\beta$-pNPG, $\beta$-pNPF의 온도에 따른 활성변화는 $\beta$-pNPF의 활성이 $60^{\circ}C$에서 증가하였고, $\beta$-pNPGA는 $30-50^{\circ}C$까지 활성이 증가하여 $50^{\circ}C$에서 최대활성을 나타내었다. 당화 flavonoid를 이용한 기질특이성의 상대활성은 daidzin, glycitin, genistin, 순으로 나타났으며 esculin과 apigenin-7-glucose는 기질로 사용하지 않았다. $\beta$-Glucosidase 활성은 EDTA, DTT에 의해 억제되었으며, $MnSO_4$, $CaCl_2$, KCl, $MgSO_4$에 의해 증가하였고, 특히 Mn이온에 의해 증가하였다. $CuSO_4$, NaCl에 의해 효소활성이 저해되었으며, 특히 $ZnSO_4$의 경우 효소활성이 강하게 억제되었다.
Wnt/${\beta}$-catenin 신호전달체계는 세포의 분화와 증식, 기관의 발생과 조절을 담당하는 중요한 세포내 신호전달체계이다. 발생과정에서 Wnt/${\beta}$-catenin 신호전달체계의 작용이 지방세포로의 분화를 억제하고 조골세포와 신경세포로의 분화는 촉진한다는 많은 연구들이 보고되어 있으며, 현재 Wnt/${\beta}$-catenin 신호전달체계의 조절을 통한 여러 질병의 치료와 예방에 대한 관심이 대두되고 있다. 본 연구에서는 세포를 기반으로 한 초고속 저분자 스크리닝 시스템을 이용하여 Wnt의 상승제인 silybin을 발굴하였다. silybin은 Wnt가 존재 않을 경우에는 ${\beta}$-catenin 단백질의 수준에 영향을 미치지 않지만 Wnt가 존재할 경우, mRNA 발현양의 변화 없이 세포질내의 ${\beta}$-catenin 단백질의 수준을 증가시킨다. 또한 silybin에 의해 증가된 ${\beta}$-catenin으로 인해 지방세포분화에 중요한 전사인자라고 알려진 PPAR-${\gamma}$와 C/EBP-${\alpha}$의 발현을 억제한다. 따라서 이 연구에서는 silybin이 세포질내 ${\beta}$-catenin 단백질의 수준을 증가시킴으로써 Wnt/${\beta}$-catenin 신호전달체계를 활성한다는 사실을 제시하였다.
Sialytrisaccharides based on $\beta$-galactosyldisaccharides were synthesized using $\beta$-galactosidase and trans-sialidase in one pot. Using $\beta$-galactosidase from Bacillus Ciculans and trans-sialidase from Trypanosoma cruzi simulaneously, 6mM sialyltrisaccharides composed of about 95% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,4)GlcNAc and 5% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,6)GlcNAc were produced from a reaction mixture containing 25mM o-nitropheny1-$\beta$-D-galsctolneuraminic acid. One beauty of this reaction was that a secondary hydrolysis of the disaccharide intermediate occurring between the activated galactopyranoside and N-acetylgucosamine was prevented. Using $\beta$-galactosidase from Escherichia cloi and the same trans-sialidase, 15mM sialyltrisaccharides composed of about 90% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,6)GlcNac and 10% NeuAc$\alpha$(2,3)Gal$\beta$(1,4)GlcNAc were produced from a reaction misture containing 400nM galactose, 800nM N-acetylglucosylation rection between galactose and N-actylgucosamine was diminant since the disaccharide intermediate mainly resulted sreulted in the silylated product.
Cancer metastasis is a major determinant of cancer patient mortality. Mounting evidence favors a strong positive role for $TGF-{\beta}$ in human cancer progression. The complex pattern on cross-talk of $TGF-{\beta}$ and the related other signaling pathways is an important area of investigation that will ultimately contribute to understanding of the bifunctional role of $TGF-{\beta}$ in cancer progression. This review summarizes some of the current understanding of $TGF-{\beta}$ signaling with a major focus in its contribution to the tumor cell invasion and metastasis. Five issues are addressed in this review: (1) $TGF-{\beta}$ signaling, (2) $TGF-{\beta}$ and EMT, (3) $TGF-{\beta}$ and MMP, (4) $TGF-{\beta}$ and Ras, and (5) Role of $TGF-{\beta}$ in invasion and metastasis. Due to the bifunctional cellular effects of $TGF-{\beta}$, as a tumor promoter and a tumor suppressor, more precisely defined $TGF-{\beta}$ signaling pathways need to be elucidated. According to the current literature, $TGF-{\beta}$ is clearly a major factor stimulating tumor progression through a complex spectrum of the interplay and cross-talk between various signaling molecules. Understanding the role of $TGF-{\beta}$ in invasion and metastasis will provide valuable information on establishing strategies to manipulate $TGF-{\beta}$ signaling which should be a high priority for the development of anti-metastatic therapeutics.
Varietal and annual variations in the contents of ${\beta}$-glucan fractions per weight grain samples were examined in sixteen covered and eighteen naked barley and five oat cultivars developed in Korea. Also, the effect of pearling on ${\beta}$-glucan content was investigated. Average contents of total, soluble and insoluble ${\beta}$-glucan fractions were 5.25, 3.72, and 1.53%, respectively, in covered barley, and 5.86, 3.51, and 2.35%, respectively, in naked barley. Soluble ${\beta}$-glucan content was higher in covered barley, though total ${\beta}$-glucan content higher in naked barley. The total and insoluble ${\beta}$-glucan contents were higher in pearled grains. Total ${\beta}$-glucan content was higher in waxy barley than in non-waxy barley. Duwonchapssalbori, a two-rowed and waxy naked barley cultivar, was highest in total, soluble and insoluble ${\beta}$-glucan contents. Highly significant positive correlations were observed between total ${\beta}$-glucan and soluble ${\beta}$-glucan contents both in covered and naked barley. There were significant annual variations in total ${\beta}$-glucan content in barley. Average contents of total, soluble and insoluble ${\beta}$-glucans of oat cultivars were 4.33, 3.44, and 0.89%, respectively. Contents of all fractions of ${\beta}$-glucans were higher in barley than in oat. These results would be useful for the breeding of high ${\beta}$-glucan variety and also for the use barley and oat as valueadded food ingredients.
The preparation and electrical conductivity of $\beta$-$Al_2O_3$ are investigated as a function of $Na_2O$ content from the-oretical composition of $\beta$-$Al_2O_3$ to that of $\beta$"-$Al_2O_3$. $\beta$-$Al_2O_3$$\beta$"$Al_2O_3$$\alpha$-Al2O3 and ${\gamma}$-NaAlO2 phases appear in the calcined powder at 125$0^{\circ}C$ for 2 hours. The majoity phase is $\beta$-$Al_2O_3$ in sintered specimens at 155$0^{\circ}C$ and 1$650^{\circ}C$ for 30 mins respectively and ${\gamma}$-4NaAlO_2$ phase also exists when Na2O content is over 10.39w/o ${\gamma}$-4NaAlO_2$ phase does not affect the grain growth of $\beta$-$Al_2O_3$ in sintering at 155$0^{\circ}C$ but acts as a reactive liquid for the abnormal grain growth of $\beta$-$Al_2O_3$in sintering at 1$650^{\circ}C$ The electrical conduction of $\beta$-$Al_2O_3$is predominated by 4Na^+$ ion. Contribution of ionic con-ductivity to total conductivity is gradually decreased with increasing temperature at given oxygen pressure and to -tal conductivity is increased by positive hole due to interstitial oxygen with increasing oxygen pressure.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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