L-canavanine was added to GAs treated barley seeds, and induced amylase activity, soluble protein content, and arginine content were mesured. Canavanine, added at the beginning of the incubation period, inhibited amylase activity and protein accumulation. Amylase activity decreased markedly by addition of canavanine at 6 hr after incubation, where soluble protein content was not affected. The addition of canavanine after 12 hr incubation did not show serioud inhibited effect on the amylase activity and protein accumulation. GAs incubation caused decrement in arginine content per mg protein, but it was somewhat recovered by canavanine treatment. The longer the time between GAs and canavanine addition was, the less the recovery ration was. Arginine content in the $\alpha$-amylase fraction (ammonium sulfate 20~50% saturation) was lower than in 0~20% fraction, but higher than in 50~80% fraction. These results and control expreiments, using cordycepin and cycloheximide, support the idea that canavanine might incorporate into protein.
The control of intestinal α-amylase and α-glucosidase is an effective therapeutic strategy for prevention of post-prandial hyperglycemia associated with diabetes mellitus. The objective of this study was to evaluate the anti-diabetes activities of Korean edible seaweed against α-amylase and α-glucosidase, two carbolytic enzymes involved in serum glucose regulation. Of the 41 species initially screened, Cladophora wrightiana var. minor, Eisenia bicyclis, Ecklonia cava, Ishige foliacea, and Ishige okamurae exhibited the strongest inhibitory activities from brown seaweeds. Asparagopsis taxiformis showed the strongest inhibitory effects from red seaweeds. The results of this study suggest that the crude brown seaweed extracts (C. wrightiana var. minor, E. bicyclis, E. cava, I. foliacea, and I. okamurae) and crude red seaweed extracts (A. taxiformis) may have beneficial effects suppressing the rise in postprandial hyperglycemia through the inhibition of α-amylase and α-glucosidase.
In currently, stress diseases are increased that present several sign and symptoms. Under stress condition, there are dry mouth, burning mouth syndrome, oral mucosa diseases and halitosis more frequently. Changing of salivary proportion is checked in almost patients with changing of function and structure in salivary gland. This study purpose are what effect stress does on salivary gland, and a-amylase on salivary gland. This study was resulted that 1. Under restraint stress, acinar cells are vacuolization and changing of intercellular spaces are separated, and peripheral tissues of duct are changed 2. Acinar cells were shrunk after 3 hours under restraint stress, intercellular space was separated after 6hours, peripheral tissues of duct started to change after 72 hours, and acinar cells and peripheral tissues of duct were all severely changed after 168hours. 3. In immunohistochemical study, amylase reaction was showed partially and irregularly after 3 hours, was getting little milder after 6 hours. And amylase reaction was gradually increased from the time of 12 hours after experiment up to the time of 48 hours after experiment. But after 168 hours, amylase appearance was diminished. According this result, emotional stress can change of salivary gland structure, and amylase secretion, the important digestive enzyme from salivary gland is changed and it is supposed to make digestive disorder and to make halitosis efficiency. So, we need to study about secretion of amylase.
Flow cytometric techniques were used to investigate cell size, protein content and cell cycle behavior of recombinant Saccharomyces cerevisiae strains producing human lysozyme (HLZ). Two different signal sequences, the native yeast $MF\alpha1$ signal sequence and the rat $\alpha-amylase$ signal sequence, were used for secretion of HLZ. The strain containing the rat $\alpha-amylase$ signal sequence showed a higher level of internal lysozyme and lower specific growth rates. Flow cytometric analysis of the total protein content and cell size showed the strain harboring the native yeast signal sequence had a higher total protein content than the strain containing the rat $\alpha-amylase$ signal sequence. Cell cycle analysis indicated that the two lysozyme producing recombinant strains had an increased number of cells in the $G_2+M$ phase of the yeast cell cycle compared with the host strain SEY2102.
The ${\alpha}$-amylases activity was improved by random mutagenesis and screening. A region comprising residues from the position 34-281 was randomly mutated in B. licheniformis ${\alpha}$-amylase (AmyL), and the library with mutations ranging from low, medium, and high frequencies was generated. The library was screened using an effective liquid-phase screening method to isolate mutants with an altered pH profile. The sequencing of improved variants indicated 2-5 amino acid changes. Among them, mutant TP8H5 showed an altered pH profile as compared with that of wild type. The sequencing of variant TP8H5 indicated 2 amino acid changes, Ile157Ser and Trp193Arg, which were located in the solvent accessible flexible loop region in domain B.
For the purpose of investigating the in vitro antidiabetic activity of a medicinal herb mixture prepared through traditional antidiabetic prescription, the study analyzed the existence of insulin-similar components and examined ${\alpha}$-amylase and ${\alpha}$-glucosidase inhibition activity. As a result of arranging the medicinal herb mixture extracts over the 3T3-L1 fibroblast in the concentration of $10{\mu}g/mL$, which confirmed that it included much of insulin sensitizer components as 151.7% in the differentiation of 3T3-L1 fibroblast. The inhibition activity against ${\alpha}$-amylase of the medicinal herb mixture extracts as hypoglycemic agent were 38.4, 31.5 and 16.6% in the concentration of 10.0, 1.0 and 0.1 mg/mL, respectively. The inhibition activity against ${\alpha}$-glucosidase of the medicinal herb mixture extracts were 81.3, 35.8 and 26.7% in the concentration of 10.0, 1.0 and 0.1 mg/mL, respectively. The inhibition activity against ${\alpha}$-glucosidase in the ethyl acetate fractions of the water and 80% ethanol extracts were 66.9% and 55.1%, respectively, the highest levels in the various solvent extracts.
Ben Abdelmalek, Imen;Urdaci, Maria Camino;Ali, Mamdouh Ben;Denayrolles, Muriel;Chaignepain, Stephane;Limam, Ferid;Bejar, Samir;Marzouki, Mohamed Nejib
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.19
no.11
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pp.1306-1318
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2009
The filamentous ascomycete Sclerotinia sclerotiorum is well known for its ability to produce a large variety of hydrolytic enzymes. Two $\alpha$-amylases ScAmy54 and ScAmy43 predicted to play an important role in starch degradation were showed to produce specific oligosaccharides essentially maltotriose that have a considerable commercial interest. Primary structure of the two enzymes was established by N-terminal sequencing, MALDI-TOF masse spectrometry and cDNA cloning. The two proteins have the same N-terminal catalytic domain and ScAmy43 derived from ScAmy54 by truncation of 96 amino acids at the carboxyl-terminal region. Data of genomic analysis suggested that the two enzymes originated from the same $\alpha$-amylase gene and that truncation of ScAmy54 to ScAmy43 occurred probably during S. sclerotiorum cultivation. The structural gene of Scamy54 consisted of 9 exons and 8 introns, containing a single 1,500-bp open reading frame encoding 499 amino acids including a signal peptide of 21 residues. ScAmy54 exhibited high amino acid homology with other liquefying fungal $\alpha$-amylases essentially in the four conserved regions and in the putative catalytic triad. A 3D structure model of ScAmy54 and ScAmy43 was built using the 3-D structure of 2guy from A. niger as template. ScAmy54 is composed by three domains A, B, and C, including the well-known $(\beta/\alpha)_8$ barrel motif in domain A, have a typical structure of $\alpha$-amylase family, whereas ScAmy43 contained only tow domains A and B is the first fungal $\alpha$-amylase described until now with the smallest catalytic domain.
Jehotang is a cold traditional Korean drink made with honey and several ingredients used in traditional Korean medicine. The ingredients include Fructus mume, Fructus amomi, Fructus tsaoko, Santalum album and honey. In this study, Jehotang and its ingredients were determined through the analysis of antioxidant activity, total phenolic content, ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase inhibitory activity. In addition, quality characteristics of Jehotang made by a traditional recipe(Yeonmil) and a modern recipe(double boiling and boiling) were also compared in terms of pH, color and sugar content. Total phenolic content of extract from Fructus ammomi was found to be 120.45 mg, and Yeonmil recipe was discovered 152.66 mg equivalent of gallic acid per g of extract. DPPH free radical scavenging activity were Feuctus amomi(93.13%) and Yeonmil recipe(56.44%). The Fructus amomi extract showed the highest ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity(89.51%) at the concentration of $100{\mu}g/mL$. ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase inhibitory activity of boiled Jehotang were 52.38% and 72.52%, respectively. These results suggest that extract of Fructus amomi has an antioxidant activity and antidiabetic effects. Yeonmil recipe is useful for antioxidant effects more than the others. Also, the double boiling recipe has an excellent antidiabetic effect.
Three Korean native steers ($779{\pm}24$ kg) fitted with duodenal cannulas were used in a $3{\times}3$ Latin square design to investigate the influence of oral administration of soluble proteins, intact casein (IC) and acid hydrolyzed casein (AHC), on gastro-intestinal hormone (GIH) secretion in the blood and pancreatic ${\alpha}$-amylase activity in the duodenum. Oral treatment consisted of a basic diet (control), IC (C+100% protein), or AHC (C+80% amino acid, 20% peptide) for 21 d. Blood and duodenum samples were collected for measurement of serum GI hormones, and pancreatic ${\alpha}$-amylase activity was determined at 900, 1030, 1330, 1630, and 1930 h after feeding on d 21 of treatment. The levels of serum cholecystokinin (CCK) and secretin in the IC treatment group were higher compared to the other treatment groups (p<0.05). In addition to the changes in CCK and secretin levels upon IC treatment, the pancreatic ${\alpha}$-amylase activity in the duodenum was higher in the IC group compared to the control diet group (p<0.05). The response of serum ghrelin to IC and AHC treatment was in accordance with the response of serum secretin. The level of peptide fragments flowing in the duodenum was higher in the IC treatment group than the other treatment groups (p<0.05). In conclusion, this study demonstrated that an increase in duodenal CCK and secretin upon IC oral administration increased pancreatic ${\alpha}$-amylase secretion. In addition, ghrelin may be associated with GI hormone secretion in Korean native steers.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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