The effect of protein kinase C inhibitors, sturosporine and 1-(5-isoquinolinyl sulfonyl)-2-methyl piperazine(H7) on in vitro differentiation of erythroid progenitor cells which were isolated from spleens of mice infected with the anemia-inducing strain of Friend virus were examined. Erythropoietin-mediated differentitation of erythroid progenitor cells, as determined by the incorporation of $^{59}Fe$ into protoporphyrin, was inhibited by staurosporine and H7 in a concentration -dependent manner. Scatchard analysis of the $^3H-phorbol-12$, 13-dibutyrate binding to erythroid progenitor cells revealed that at the high affinity sites the dissociation constant was 22nM and the maximum number of $^3H-phorbol-12$, 13-dibutyrate binding to erythroid progenitor cells revealed that at the high affinity sites the dissociation constant was 22nM and the maximum number of $^3H-phorbol-12$, 13-dibutyrate binding sites per cell was approximately $3.7\times10^5$. Cytosonic protein kinase C was isolated from erthroid progenitor cells and then purified by sequential column chromatogrphy. Two isoforms of protein kinase C were found. Photoaffinity labeling of the purified protein kinase C samples with $^3H-phorbol-12$12-myristate 13-acetate followed by analysis of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and autofluorography showed radiolabeled 82-KDa pepticles. Rediolabeling of the 82-KDa peptides with $^3H-phorbol-12$myristate 13-acete was almost completely blocked by excess unlabeled phorbol 12-myristate 13-acetate was almost 12-muristate 13-acetate-promoted phosphorylation with the puyrified protein kinase C samples showed that the phosphorylation of 82-KDa peptides was increased as the concentration of phorbol 12-myristate 13-acetate was increased from $10^{-8}M{\;}to{\;}10^{-4}$M. In light of the findings that erythroid progenitor cells possessed an abundance of protein kinase C and that stauroporine and H7 inhibited erythroid differentiation, it seemed likely that protein kinase C would play a role in the erythroid progenitor cell development.
The effect of storage temperature and period on the contents of tin, iron, lead and vitamin C, browning index and pH was studied for canned and bottled orange juices currently sold in Korean market, which were stored for 24 weeks at 20, 30, 40 and $50^{\circ}C$ and analyzed at 4 week intervals. The change of metal content in bottled juices was negligible but metal release in canned juices was remarkably affected by storage temperature. Tin content after 16 weeks increased by $2.7{\sim}13.1$ times, iron content after 24 weeks increased by $4.3{\sim}5.2$ times and lead content after 24 weeks increased by $1.1{\sim}2.9$ times. Retention of total ascorbic acid in canned juices after 24 weeks at $30{\sim}50^{\circ}$ decreased to $13{\sim}76%$, while that in bottled juices decreased to $4{\sim}80%$. Browning index in canned juices after 24 weeks below $40^{\circ}C$ increased slightly with serious discoloration at $50^{\circ}C$ while that in bottled juices increased a little rapid. pH change in canned and bottled juices during storage below $40^{\circ}C$ was not observed regardless of container type but a great change of pH was accompanied with swelling of container ends in the case of canned juices after 24 weeks at $50^{\circ}C$.
We have observed the 10-9 transitions of $HC_3N$ and its $^{13}C$ substitutes ($H^{13}CCCN,\;HC^{13}CCN$, and $HCC^{13}CN$), and the vibration ally excited 12-11 ($v_r=1$) $HC_3N$ transition toward the Sgr B2 molecular cloud. The observed $HC_3N$ emission shows an elongated shape around the Principal Cloud ($\~$4.5 pc in R.A. $\times$ 7.4 pc in Decl.). The optically thin $H^{13}CCCN$ line peaks around the (N) core and we derive the total column density $N(H^{13}CCCN) = 4 {\times}10^{13} cm^{-2}$ at this position. Toward the 2' N cloud which shows the peculiar chemistry, the $HC_3N$ lines show enhancements compared to the extended envelope. The shocks of the 2' N may have resulted in the enhancement of $HC_3N$. The hot component of $HC_3N$ is strongly concentrated around the (N) core and its HPW is $\~$0.9 pc in diameter. We derive the lower limit of the abundance ratio $N(HC_3N)/N(H^{13}CCCN)$ to be larger than 40 in most regions except the (M) and (N) cores. The fractionation processes of $^{13}C $at this region may not be as effective as previously reported.
Polyhydroxyalkanoic acid (PHA) inclusion bodies were analyzed in situ by $^{13}C$-nuclear magnetic resonance ($^{13}C$-NMR) spectroscopy. The PHA inclusion bodies studied were composed of poly(3-hydroxybutyrate) or poly(3hydroxybutyrate-co-4-hydroxybutyrate), which was accumulated in Hydrogenophaga pseudoflava, and medium-chain-length PHA (MCL-PHA), which was accumulated in Pseudomonas fluorescens BM07 from octanoic acid or 11-phenoxyundecanoic acid (11-POU). The quantification of the $^{13}C$-NMR signals was conducted against a standard compound, sodium 2,2-dimethyl-2-silapentane-5-sulfonate (DSS). The chemical shift values for the in vivo NMR spectral peaks agreed well with those for the corresponding purified PHA polymers. The intracellular degradation of the PHA inclusions by intracellular PHA depolymerase(s) was monitored by in vivo NMR spectroscopy and analyzed in terms of first-order reaction kinetics. The H. pseudoflava cells were washed for the degradation experiment, transferred to a degradation medium without a carbon source, but containing 1.0 g/l ammonium sulfate, and cultivated at $35^{\circ}C$ for 72 h. The in vivo NMR spectra were obtained at $70^{\circ}C$ for the short-chain-length PHA cells whereas the spectra for the aliphatic and aromatic MCL-PHA cells were obtained at $50^{\circ}C\;and\;80^{\circ}C$, respectively. For the H. pseudoflava cells, the in vivo NMR kinetics analysis of the PHA degradation resulted in a first-order degradation rate constant of 0.075/h ($r^{2}$=0.94) for the initial 24 h of degradation, which was close to the 0.050/h determined when using a gas chromatographic analysis of chloroform extracts of sulfuric acid/methanol reaction mixtures of dried whole cells. Accordingly, it is suggested that in vivo $^{13}C$-NMR spectroscopy is an important tool for studying intracellular PHA degradation in terms of kinetics.
The divergent synthesis of novel phosphorus-containing dendrimer with 4,4'-sulphonyldiphenol at the core has been accomplished involving simple condensation reactions using $P(O)Cl_3$, $P(S)Cl_3$, 3-amino-phenol, 3-hydroxy-benzaldehyde, and 2-butyn 1, 4-diol. The final compound was a Schiff's base macromolecule possessing 4 imine bonds, 8 acetylenic bonds and 8 OH groups at the periphery. The structures of intermediate compounds were confirmed by IR, NMR ($^1H$, $^{13}C$ and $^{31}P$), LC-Mass and C, H, N analysis. The structure of the final dendrimer (5) was confirmed by IR, NMR ($^1H$, $^{13}C$ and $^{31}P$), MALDI-TOF-MS, and C, H, N analysis. The surface morphological characteristics of the final dendrimer were understood by Scanning Electronic Microscopic study (SEM). The thermal stability of the final dendrimer was studied by TGA/DTA analysis.
1. Penicillium sp. C 13-13 strain was obtained with the treatment of mutagenic agents(N.T.G.) and by single spore isolation method from the Penicillium sp. C8-14 strain, which was reported in the previous paper. 2. The above strain had a few spores and to obtain seed culture, it was cultured at $30^{\circ}C$ and initial pH $4.5{\sim}5.0$, with air rate 6l/min., and agitation 600 rpm for 48 hours in 10% wheat bran medium in 20l- Jar fermenter. When the broth that had above 70ml of mycelium was inoculated into wheat bran medium and incubated at $29{\sim}33^{\circ}C$ for 72 hrs, the cellulase activity of the koji was higher. 3. Adding calcium chloride and magnecium sulfate to the wheat bran medium to 1.5% and 0.015% respectively, the cellulase activity of the koji was higher than that of the control.
$^1H$ and $^{13}C$ NMR spectra of series of (E)-1-aryl-(2- and 3-thienyl)-2-propenones, that are aldol condensation products between 2- and 3-thiophenecarbaldehydes and m- and p-substituted acetophenones, were examined to make complete assignments of the chemical shifts. Long range couplings, $^4J$ and $^5J$, are observed in the $^1H-^1H$ COSY of both 2- and 3-thienyl compounds, which makes the elucidation of the conformation in solution possible. In contrast, the 2-furyl analogue shows the long range coupling phenomena, but the 3-furyl and phenyl analogues do not show similar phenomena.
Two new compounds 1'-(stigmast-11,20(21),25-trien 3$\alpha$,9$\alpha$-diolyl)-3'-(pimara-11,15-dien-3$\alpha$-olyl) glycerol (1) and stigmast-5-en-3$\alpha$,26-diol (2) along with known fatty acids n-hexacosanoic acid (3) and hexadecanoic acid (4), have been isolated from the methanol extract of rice hulls of Oryza sativa. The structures of the compounds were elucidated using 1D and 2D NMR spectral methods, viz; $^1H, ^{13}C, ^{13}C$-DEPT, $^1H-^1H$ COSY, $^1H-^{13}C$ HETCOR, HSQC and HMBC aided by IR, EIMS, FABMS and HRFABMS. Compound (1) showed inhibition to radish germination, growth of shoot and root length.
From the methanolic extract of defatted tender leaf of Camellia sinensis a new 4-hydroxy angular furocoumarin $C_{12}H_8O_5$, m.p. $212^{\circ}C$, was isolated using high-speed counter-current chromatographic technique. The structure of the compound was established as 4-hydroxy-2'-methoxy angular furocoumarin on the basis of physical methods viz. $^1H$ NMR, $^{13}C$ NMR and MS.
The systematic modification of titanium(IV) isopropoxide with acetic acid as a organic additive was done and identifided by FT-IR, $^1H$, $^{13}C$ NMR and UV-Vis spectroscopy. The structure was cbanged after hydrolysis-condensation reaction and drying process. The hydrolysis-condensation rates of modified Ti alkoxide with acetic acid were investigated by $^1H$ NMR spectroscopy. This modified Ti(IV) alkoxide was less reactive toward hydrolysis-condensation reaction than $Ti(OPr^i)_4$, which can be attributed to the stable ligand structure between Ti alkoxide and ligand. The structural change on obtained from gel powders with heat treatment was also observed by FT-IR spectroscopy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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