Characterization of Bacillus stearothermophilue Cyclodextrin Glucanotransferase that Expressed by Saccharomyces cerevisiae

The cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) gene from Bacillus stearothermophilus NO2 was expressed in Saccharomyces cerevisiae 2805 under the adhl promoter. The CGTase was purified from S. cerevisiae 2805/pVT-CGTS. The purified enzyme exhibited a optima of activity around pH 7.0 and $65^{\circ}C$. Thermal stability of the enzyme was increased fairly as compared with the CGTase of B. stearothermophilus NO2. The conversion yield of cyclodextrin (CD) and the production ratio of $\alpha$-, $\beta$,-, ${\gamma}$-CD from starch were showed similarly aspect to the CGTase of B. stearothermophilus NO2.

Saccharomyces cerevisiae에서 발현된 Bacillus stearothermophilus Cyclodextrin Glucanotransferase의 특성

효모 S. cerevisiae에서 B. stearothermophilus 유래의 CGTase를 발현 생산하였으며, 분비, 생산된 단백질을 정제하여 그 특성을 조사하였다. 재조합 효모 S. cerevisiae 2805/pVT- CGTS가 생산하는 CGTase의 분자량은 효모에서 발현될 때 고당쇄가 부가되어 야생형의 68kDa에 비해 15-160% 증가된 약 78-178 kDa으로 나타났다. 효모 S. cerevisiae에서 발현된 CGTase의 효소반응 최적활성조건은 pH7.0, $65^{\circ}C$였고, 열안정성에 있어서 $75^{\circ}C$에서 약 90%의 잔존활성을 가질 정도로 내열성이 개선되었다. 효모 S. cerevisiae에서 발현된 CGTase는 5% soluble starch를 기질로 약 40.2%의 CD 전환율 및 3 : 6 : 1의 $\alpha$-, $\beta$-, ${\gamma}$-CD의 생산 비율을 나타내어 야생형과 별다른 변화가 없었다.