Effects of Fish Meal Replacement in Extruded Pellet Diet on Growth, Feed Utilization and Digestibility in Olive Flounder Paralichthys olivaceus

압출성형 배합사료 내 어분대체가 넙치(Paralichthys olivaceus)의 성장, 사료효율 및 소화율에 미치는 영향

Abstract

This study investigated the effects of replacing fish meal (FM) with a mixture of four protein sources (wheat gluten, soy protein concentrate, tankage meal, and poultry byproduct meal) in an extruded pellet (EP) diet for olive flounder Paralichthys olivaceus. Five experimental diets were formulated with alternative proteins replacing 0%, 20%, 30%, 40%, and 50% of FM. Taurine and betaine were added as attractants in the diets. Triplicate groups of fish (initial body weight: $196{\pm}2g$) were fed the diets to apparent satiation. Over the course of a 6-month feeding trial, there were no significant differences between the groups in growth performance, feed utilization, survival, or villus height. The dry matter and protein digestibility of FM50 diet were significantly lower than those of the control diet at water temperatures below $18.5^{\circ}C$ in months 4 and 6. This is a highly significant first report on FM replacement in an EP diet given to olive flounder over a 6-month-long feeding period. It shows that the proper mixture of protein sources can replace up to 50% of FM in olive flounder EP diets with taurine and betaine supplementation. It also shows that 40% of FM could be safely replaced in EP diets during periods of low water temperature.

서론

넙치는 국내 양식산업의 대표 어종으로써 2017년에 약41,207톤이 생산되었으며, 생산금액은 약 5,845억원에 달했다(KOSIS, 2017a). 넙치양식이 미래에도 지속 가능한 산업으로 발전하기 위해서는 사료 내 어분 함량을 낮춘 배합사료의 개발이 요구된다. 타 어종에서는 이미 extruded pellet (EP)을 이용하여 어분대체 연구를 하고 있으며(Overland et al., 2009), 6개월 이상의 장기간 실험도 진행되었다(Hansen et al., 2007). 넙치에서도 사료 내 어분을 대체하기 위해 다양한 연구가 진행되어 왔으며(Pham et al 2007; Kim et al., 2018), EP를 이용한 어분대체 연구도 진행되었다(Jang et al., 2013). 하지만 EP를 이용하여 6개월 이상 장기간 진행된 어분대체 연구는 미흡한 실정이다.

성공적인 양식산업 경영을 위해서는 사료, 양식환경, 어병 등 다양한 요인을 고려해야 한다. 사료비는 어류양식 생산원가의 약 50%를 차지하는 매우 중요한 요인이다(KOSIS, 2017b). 넙치는 단백질 이용성이 높고(Kim et al., 2000), 탄수화물의 이용능력이 낮아(Shin and Kim, 2002) 타 어종에 비해 사료 내 어분의 사용비중이 높다. 어분은 단백질 함량이 60-70%로 높고, 필수아미노산, 지방산, 미네랄과 같은 영양소가 풍부할 뿐만 아니라 미지성장인자(unidentified growth factors)를 다량 함유하고 있는 최적의 단백질원료이다(Lee et al., 1996; Hardy, 2010). 세계 양식생산량은 양식기술이 발전함에 따라 증가하였고(Tacon and Metian, 2008), 어분의 사용량도 함께 증가하였다. 그러나, 어분은 계속된 남획으로 인한 어획량감소와 생산국의 어분 소비 증가로 인해 수급이 불안정하다(Ha and Kim, 2018). 사료내 어분을 대체하기 위한 다양한 연구가 진행되어왔으나, 한 종류의 단백질원료만을 이용하여 어분을 대체할 경우, 대체 가능성의 한계를 드러냈다(Chen et al., 2010; Dawood et al., 2015). 특히, 단일 원료만으로 어분을 대체할 시, 제한아미노산과 항영양인자로 인한 소화율 저하 등의 문제가 발생하였다(Kim et al., 2000; Krogdahl et al., 2010). 다양한 단백질원료를 혼합하여 사용할 경우, 제한아미노산과 부족한 영양소를 서로 보완할 수 있어 한 가지 단백질원료를 사용하는 것 보다 효과적으로 어분을 대체할 수 있다고 보고되었다(Lee et al., 1996). 특히, 동∙식물성 단백질원료의 혼합은 다량의 어분을 대체할 수 있는 최적의 방법으로 알려져 있다(Kissinger et al., 2016; Scerra et al.,2016).

따라서, 본 연구는 동∙식물성 단백질원료들의 혼합을 통해 넙치 사료 내 어분을 대체하고자 하였다. 특히, EP 실험사료를 이용하여 6개월 간 semi-pilot규모의 사양실험을 통해 넙치용 저어분사료 개발을 위한 기초자료를 제공하고자 수행되었다.

 

재료 및 방법

실험어 및 사육관리

실험에 사용된 넙치는 제주도 서귀포시 성산읍 신산리에 위치한 대형수산에서 구입하였다. 실험환경에 적응시키기 위해 시판용 넙치 배합사료를 공급하면서 순치하였다. 예비사육 후, 육성기 넙치(196±2 g)를 수조마다 40마리씩 각 사료구 당 3반복으로 2000 L 원형 propylene 수조에 무작위로 배치하였다. 실험사료는 1일 2회(08:30, 17:30), 6개월간 만복공급 되었고 사료공급 30분 후에 환수를 진행하였다. 사육수는 모래 여과된 해수가 사용되었고, 수조 당 유수량은 15-20 L/min이 되도록 조절하였다. 모든 실험수조에 에어스톤을 설치하였고, 사양실험 동안의 사육수온은 자연수온에 의존하였다(Table 1).

 

Table 1. Monthly water temperature during the feeding trial Water temperature (℃)

 

실험사료

실험사료(Table 2)에는 2종류의 어분(정어리, 멸치)이 사용되었다. 대조사료(Control)의 어분함량은 국내 배합사료의 어 분사용 평균치인 약 65%로 설정하였다. 실험사료는 4종의 원료(wheat gluten, soy protein concentrate, tankage meal, poultry by-product meal)를 이용하여 대조사료 내 어분함량을 각각 20, 30, 40, 50% (FM20, FM30, FM40, FM50) 대체하였다. Tau-rine과 betaine은 사료의 기호성 증진을 위해 어분대체 실험사료에 첨가되었다. 실험사료는 국립수산과학원 사료연구센터에서 압출성형기(ATXD-II Extruder, Fesco, Korea)를 이용하여 제조되었다. 성형된 실험사료는 70℃에서 3시간동안 열풍 건조되었으며, 수분분석기를 이용하여 건물(dry matter) 함량 계산 후, 어유를 첨가하였다.

 

Table 2. Composition (% of dry matter basis) of the experimental diets for olive flounder Paralichthys olivaceus

 

어체측정

성장률과 생존율 조사를 위해 매달 수조 전체 어류를 측정하였다. 실험 넙치는 어체측정 18시간 전부터 절식되었다. 사양실험 종료까지 매달 평균무게(mean body weight, g), 사료섭취량(feed intake, g/fish), 사료전환효율(feed conversion ratio), 단백질전환효율(protein efficiency ratio)을 조사하였다. 사양실험 종료 후에는 비만도(condition factor), 간 중량지수(hepato-somatic index, %), 장 중량지수(viscerosomatic index, %)를 추가로 조사하였다.

샘플수집

최종무게 측정 후, 각 수조마다 3마리의 실험어를 무작위로 선별한 후, 2-phenoxyethanol 용액(200 ppm)으로 마취시켰다. 대상 어류의 융모길이(villus height) 관찰을 위해 유문부와 장의 접점을 기준으로 1 cm 떨어진 전장(anterior intestine)을 자르고, Bouin’s solution에 고정하여 장 조직을 샘플하였다. 내장이 제거된 실험어(carcass)는 -50℃에서 냉동시킨 후, 일반성분분석에 사용하였다.

일반성분분석

실험사료, 전어체의 일반성분분석은 AOAC (2000) 방법에 따라 수분은 상압가열건조법(125℃, 3시간), 조회분은 직접회화법(550℃, 4시간)으로 분석되었다. 단백질은 자동조단백질분석기(Keiltec system 2300, FOSS, Sweden)로 분석되었다. 지방은 Folch et al. (1957)의 방법에 따라 분석되었다.

조직학적 분석

전장 조직은 Bouin’s solution으로 고정되었으며, 분석 시까지 70% ethyl alcohol에 고정되었다. 고정된 전장 조직은 적절한 크기로 절단되어 tissue processor (TP1020, Leica, Germany)에서 단계별 탈수과정을 거친 후, 파라핀(paraffin) 작업 후 hematoxylin and eosin (H&E) 염색을 하였다. 융모의 길이는 현미경(CKX-41, Olympus, Japan)을 이용하여 100배 확대 후 측정되었다.

소화율 평가

소화율 실험사료는 곱게 분쇄된 99%의 EP 실험사료와 1%의 chromium oxide (Cr₂O₃, DaeJung, Korea)를 혼합하여 제작하였다. 혼합물 총 중량의 25%에 해당하는 증류수를 첨가하여 사료혼합기로 혼합∙반죽한 후, 펠렛성형기(SP-50, Geumgang ENG, Korea)를 이용하여 펠렛사료 형태로 제작하였다. 제작된 실험사료는 건조기를 이용하여 25℃에서 24시간 건조시켰으며, -20℃에 보관하면서 소화율실험에 사용하였다. 소화율 평가에 사용된 넙치는 실험환경에 대한 적응과 장내에 일반사료가 남아있지 않도록 1주간 순치되었다. 예비사육 후, 실험넙치는 5개의 400 L guelph system (분 수집 장치 수조)에 각 수조 당 25마리씩 무작위로 선택되어 배치되었다. 사육수는 1차적으로 모래 여과된 해수를 카트리지필터가 장착된 필터하우징을 통해 여과되었다. 각 수조의 유수량은 1 L/min로 세팅하였으며, 실험기간 동안의 사육수온은 자연수온에 의존되었다. 소화율 평가는 실험 2개월차부터 6개월차까지 사양실험과 동시에 진행되었다. 매달 2주간 소화율 실험사료를 공급하면서 분을 수집하였다. 매달 분을 수집한 후 다음 달 분 수집 전까지 EP 실험사료가 공급되었다. 분 수집 16시간 전 실험어를 소화율 실험사료로 만복 공급시켰다. 만복공급 후, 수조에 남은 사료 및 이물질을 깨끗이 청소하였다. 그 후, 카트리지 필터를 교체하여 다시 한 번 환수한 후, 1일 1회(09:00 h) 분 수집을 진행하였다. 수집한 분 샘플은 여과지를 이용하여 해수를 제거한 후 -50℃ 저온 냉동고에 보관하고, 동결냉동건조(freeze-dryer) 시킨 후 분석에 사용하였다. 실험사료와 분 샘플에서의 chromium oxide는 Divakaran et al. (2002)의 방법을 토대로 분석되었다. 실험사료의 단백질소화율은 Bui et al. (2014)의 방법으로 계산되었다.

통계분석

실험사료의 배치는 완전확률계획법(completely randomized design)으로 실시되었다. 실험결과들은 SPSS (version 18.0) 프로그램이 이용되어 One-way ANOVA로 통계분석 되었다. 데이터 값의 유의적인 차이는 Tukey’s HSD를 통해 평균값 간의 유의성(P≤0.05)이 비교되었다. 데이터는 평균값±표준편차(mean ±SD)로 나타내었으며, 백분율 데이터는 arcsine 변형값으로 계산되어 통계분석 되었다.

 

결과

6개월간 매달 측정한 성장, 사료섭취량, 사료효율 결과는 Fig. 1에 나타내었다. 매월 평균무게, 사료섭취량, 사료전환효율 및 단백질전환효율은 대조구와 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었다. 사양실험 종료 후의 생존율, 비만도, 간중량지수 및 장중량지수 조사 결과에서도(Table 3) 대조구와 어분대체 실험구간에 유의적인 차이는 없었다.

전어체 수분함량은 대조구에 비해 FM20, FM30 실험구가 유의적으로 낮았다(Table 4). 전어체 단백질과 회분은 경향적으로 FM30 실험구가 대조구에 비해 높았으나 유의적인 차이는 없었다. 전어체 지방분석 결과 FM20 실험구가 가장 높았으나 실험구 간의 유의적인 차이는 없었다.

 

Fig. 1. Cummulative mean body weight (A), feed intake (B), feed conversion ratio (C) and protein efficiency ratio (D) of olive flounder Paralichthys olivaceus (initial mean body weight: 196±2g) fed the fed experimental diets for 6 months [Feed intake (g/fish)=dry feed consumed (g)/fish, Feed conversion ratio=dry feed intake/wet weight gain, Protein efficiency ratio=wet weight gain/protein intake]. FM20, 20% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM30, 30% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM40, 40% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM50, 50% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet.

 

Table 3. Survival and morphological indexes of olive founder fed five experimental diets for 6 months¹

 

Table 4. Carcass composition (% of wet weight) of olive flounder Paralichthys olivaceus fed the fed experimental diets for 6 months¹

 

5개월 간의 장내 융모의 길이를 측정한 결과는 Fig. 2에 나타냈었다. 1개월 차 측정에서는 683-958 μm로 나타났으며, 이후 매월 816-1141 μm, 1188-1417 μm, 1479-1641 μm로 나타나 4개월차 측정까지 점점 증가되는 경향을 보였다. 5개월차 조사에서는 1372-1804 μm이었다. 모든 실험구 사이의 유의적인 차이는 없었다.

 

Fig. 2. Villus heights of olive flounder Paralichthys olivaceus fedthe fve experimental diets for 5 months. FM20, 20% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM30, 30% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM40, 40% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM50, 50% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet.

 

소화율 조사결과(Fig. 3), 건물소화율은 3개월째에 FM20 실험구가 FM50 실험구에 비해 유의적으로 높았다. 4개월차 조사에서는 FM50 실험구가 다른 모든 실험구에 비해 유의적으로 낮았다. 2, 5, 6개월차 조사에서는 모든 실험구에서 유의적인 차이가 없었다. 단백질소화율은 4개월차 조사에서 FM50 실험구가 다른 모든 실험구에 비해 유의적으로 낮았다. 6개월차 조사에서는 FM30 실험구가 FM40, FM50 실험구에 비해 유의적으로 높았다. FM50 실험구의 단백질 소화율은 다른 실험구에 비해 유의적으로 낮았다.

 

Fig. 3. Apparent digestibility coefficient (%, ADC) of dry matter(A) and protein (B) in the experimental diets. Values (mean±SD) with different letter are significantly different (P<0.05). ADCd, apparent digestibility coefficient dry matter. ADCp, apparent digestibility coefficient protein. FM20, 20% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM30, 30% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM40, 40% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet. FM50, 50% fish meal was replaced with mixture of protein sources in diet.

 

고찰

넙치 사료 내 동∙식물성 원료의 어분대체율은 대두박 17-30%, 주정박 18.5%, 우모분 18.8-26%, 돈모분 7.5-30%, 참치 부산물20-30%, 육골분 10-20%로 보고되었다(Kikuchi et al., 1994;Kim et al., 2008; Ye et al., 2011; Lee et al., 2012; Kim et al., 2014; Bae et al., 2015; Kim et al., 2018). 위의 연구결과 다양한 원료에서 7-30%의 어분대체 가능성이 보고되었는데, 모두단일 단백질원료로 어분대체 연구가 진행되었다. 반면, 대두박, 건조 홍합살, 혈분, 콘글루텐밀을 혼합하였을 경우, 넙치사료 내어분을 46%까지 대체 가능하다고 보고되었다(Kikuchi, 1999). 유럽농어(Dicentrarchus labrax)를 대상으로 진행된 연구에서 녹두박, 우모분, 혈분을 혼합하여 사료 내 어분을 50%까지 대체 가능하다고 보고되었으며(Scerra et al., 2016), 혈분, 대두농축 단백, 콘글루텐밀, 밀글루텐, 채종박 혼합물로는 82% 까지 대체 가능하다고 보고되었다(Torrecillas et al., 2017). 본 연구에서도 4가지 단백질 원료(wheat gluten, soy protein concentrate, tankage meal and poultry by-product meal)의 조합을 통해 단일 원료 사용시에 부족하게 되는 영양소를 서로 보완해 줄 수 있었기 때문에 어분을 50%까지 대체함에도 성장과 사료효율에 문제가 없었던 것으로 판단된다.

Taurine은 어분과 동물성 원료에 다량 함유되어 있으나, 식물성 원료에는 함량이 적어 식물성 원료를 이용한 어분대체 연구 시 taurine의 첨가가 필요하다(Lunger et al., 2007: Lim et al., 2013). 넙치사료 내 taurine을 첨가할 경우 성장률, 사료효율이 유의적으로 향상된다고 보고되었다(Park et al., 2002; Kim et al., 2005). Taurine(a beta-amino sulfur amino acid)은 대부분의 동물조직에 고농도로 함유되어 있으며 식물조직에는 거의 존재하지 않는 황함유 아미노산의 일종이다. 세포막의 안정화와 항산화효과 및 삼투압 조절에 taurine이 중요한 역할을 하기 때문에 어류는 사료로부터 충분한 taurine이 공급되어야 한다. 특히, 사료에 식물성 단백질원료가 다량 함유되면 taurine이 반드시 첨가되어야만 하는 조건부 필수영양소로 알려져 있다(Lim et al., 2013). 넙치사료 내 taurine의 요구량은 참돔(Pagrus major, 0.5%, Matsunari et al., 2008), 유럽농어(0.2%, Martinez et al., 2004), 돌돔(Oplegnathus faciatus, 0.88%, Limet al., 2013)에 비해 매우 높은 1.5-2.0%로 보고되었다(Park et al., 2001). Choi et al. (2004)는 betaine을 어분대체 사료에 첨가하면 넙치의 성장과 소화율을 향상시킬 수 있다고 보고하였다. 본 연구에서는 대조구를 제외한 모든 실험구에 taurine과 betaine을 첨가하였으며, 어분대체율이 10% 증가할수록 taurine을 0.1%씩 추가적으로 첨가하였다. 그 결과, 넙치의 성장률과 사료효율에 긍정적인 영향을 주어 어분대체 가능성을 향상시킨 것으로 판단된다.

육식성 어종의 경우 식물성 단백질원료 내 다양한 항영양인자가 소화기관에 피해를 끼친다고 보고되었다(Martí nez-Llorenset al., 2012). 농어(Lates calcarifer), 대서양연어(Salmo salar), 터봇(Scophthalmus maximus)을 대상으로 식물성 단백질원료가 사용된 사료를 공급하였을 때, 장세포 공포화, 흡수성 공포수 감소, 점막고유층과 점막하 조직의 넓이 및 세포침윤 증가와 같은 장변화가 관찰되었다(Boonyaratpalin et al., 1998; overland et al., 2009; Gu et al., 2016). 특히, 융모의 길이는 사포닌과 같은 항영양인자로 발생된 염증에 의해 감소된다(Zhang et al., 2018). 넙치사료 내 대두농축단백을 22% 이상 사용하면 융모길이의 감소가 나타났다(Khosravi et al., 2018). 반면, Tus-che et al. (2012)는 무지개송어(Oncorhynchus mykiss) 사료 내밀글루텐을 이용하여 어분을 대체할 시 항영양물질의 작용이 관찰되지 않는다고 보고하였다. 대서양연어를 대상으로 한 연구에서는 사료 단백질의 35%까지 밀글루텐을 사용해도 장 변화가 발생하지 않았다(Storebakken et al., 2000). 본 연구에서는 식물성 단백질원료로써 대두농축단백과 밀글루텐이 사용되었다. 대두농축단백의 함량은 최대 8.75%였으며, 어분대체율이 증가함에도 장 길이의 유의적인 변화가 없었던 것으로 보아 어분대체에 의한 장내 부작용은 없는 것으로 판단된다.

어분을 식물성 단백질원료로 대체할 경우 사료 내 섬유소와항영양인자 함량이 증가할 수 있다(Gatlin et al., 2007). 대부분의 육식성 어류는 섬유소를 소화할 수 있는 능력이 부족하여 식물성 사료원료 사용시 소화율이 낮아진다(Apper-Bossardet al., 2013). 식물성 단백질원료 내 항영양인자에 의한 소화율감소도 보고되었다(Krogdahl et al., 2010). 이전 연구에서 넙치 사료 내 탈피대두박을 이용하여 어분을 30% 대체시 건물소화율과 단백질소화율이 감소하였다(Choi et al., 2004). 대두농축단백을 이용하여 어분을 25% 이상 대체시 건물, 단백질, 아미노산소화율이 유의적으로 감소하였다(Deng et al., 2006). 반면, 본 연구에서 사용된 식물성 단백질 원료 중 밀글루텐은 섬유소 함량이 낮고, 사료 내 사용시 항영양인자에 의한 부작용이 관찰되지 않는 식물성 단백질원료이다(NRC, 2011; Tuscheet al., 2012). 은연어(Oncorhynchus kisutch), 무지개송어, 귀족도미(Saparus aurata), 틸라피아(Oreochromis niloticus), 대서양대구(Gadus morhua)를 대상으로 원료소화율을 측정한 결과 밀글루텐이 어분에 비해 높은 단백질 소화율을 보였다(Sugiuraet al., 1997; Kissil and Lupatsch, 2004; Schneider et al., 2004;Tibbetts et al., 2006). Storebakken et al. (2000)은 대서양연어 사료 내 어분을 밀글루텐으로 대체할 시 소화율이 향상된다고 보고하였다. 동물성 단백질원료는 뼈, 가죽, 고기, 피와 같은 구성요소에 따라 영양소 함량 및 소화율이 다르다(Yigit et al., 2006). 본 연구에서 사용된 가금부산물분과 수지박은 각각 가금류와 육류의 가식부를 주로 사용하여 높은 단백질(crude protein, CP: 71.6%, 86.3%) 조성을 지닌 제품이다. 가금부산물분(CP: 64.9%)을 사용하여 틸라피아 사료 내 어분을 100% 대체한 연구에서 소화율이 감소하지 않았다고 보고하였다(Hernández et al., 2010). 본 연구에서는 4개월차, 6개월차 소화율 측정을 제외하면 어분을 50% 대체했음에도 소화율에 있어 대조구와 타 실험구 사이에 유의적인 차이가 나타나지 않았다. 밀글루텐, 고품질의 가금부산물분과 수지박을 사용하였기 때문에어분을 대체했음에도 소화율의 저하가 발생하지 않았던 것으로 판단된다.

선행 연구에서 대두박을 이용하여 사료 내 어분을 30% 대체시 소화율이 감소하였으나, betaine이 포함된 섭이촉진제 첨가시 대조구와 소화율에서 차이가 없었으며, 어분을 20% 대체한 사료 내 첨가시 대조구에 비해 소화율이 증가되었다(Choi et al., 2004). 코비아(Rachycentron canadum) 자어를 대상으로 한 연구에서는 사료 내 taurine 첨가시 amylase, lipase, trypsin, pepsin과 같은 소화효소의 활성이 증가하였다(Salze et al., 2012). 본 연구에서도 대조구를 제외한 모든 실험사료 내 be-taine과 taurine이 첨가되었으며, 어분대체에 따른 소화율 감소를 보완해준 것으로 사료된다.

어류의 소화율은 사육수온과 같은 환경조건 등에 영향을 받을 수 있으며(Sullivan and Reigh, 1995), 항상 일정한 수준으로 유지되지 않는다(McGoogan and Reigh, 1996). 넙치의 최적사육수온은 21-24℃이다(Son et al., 2006). 본 연구에서 6개월 간의 수온측정 결과, 4개월차에 최적사육 수온 보다 낮은 평균수온을 나타내었으며, 15.4℃까지 수온이 내려간 것으로 나타났다. 6개월차 평균수온은 13.7℃, 최저수온 11.4℃까지 내려갔다. FM50 실험구가 4, 6개월차에 대조구에 비해 소화율이 감소한 이유는 수온저하에 민감하게 반응하였기 때문으로 판단된다.

따라서, 적정수온에서 넙치사료 내 taurine과 betaine 첨가시밀글루텐, 대두농축단백, 수지박, 가금부산물분을 혼합하여 사료 내 어분의 50%까지 대체가 가능할 것으로 판단된다. 소화율 결과를 고려하였을 때, 저수온(18.5℃ 이하)에서는 40%까지 어분대체가 가능할 것으로 판단된다.