간세포 배양에서 Linoleic Acid와 혈청알부민의 첩가가 지질대사에 미치는 영향

Effects of Linoleic Acid and Serum Albumin Concentrations on Lipid Metabolism in HepG2 Cells

사람 간세포 유래의 배양 세포인 HepG2 세포의 지질 합성과 분비에 미치는 linoleic acid(LA, 18 : 2 n-6) 및 우혈청알부민 (bovine serum albumin: BSA) 첨가 농도의 영향에 대하여 검토하였다. 간세포는 DMEM배지(기본 배지)에 0.2 mM LA을 첨가한 배지 및 LA와 BSA(0.2-1.0%)를 첨가한 배지(LA+BSA 배지)에서 배양하였다. 각 지질의 동위원소 표적에는 $[^{14}C]acetate$를 이용하여 6시간 배양후의 지질합성과 분비를 측정하였다. 그 결과, 기본 배지중에 LA의 첨가는 콜레스테롤의 $[^{14}C]acetate$ 표적량을 저하 시켰다. 한편, LA배지에 BSA의 첨가에 의해, 총 콜레스테롤의 $[^{14}C]acetate$ 표적량은 증가하는 경향을 나타내었다. LA+BSA 배지에서 간세포의 총 콜레스테롤 변동은 유리형 콜레스테롤에의 표적량 증가에 기인하는 것으로 나타났다. LA배지에 BSA를 첨가 하였을때 콜레스테롤 분비가 증가 하였는데, 이는 지질의 분비과정에 BSA가 관여하는 것을 시사하는 것이다. 간세포내 총 지질에의 $[^{14}C]acetate$ 표적량은 각 군간의 유의치는 인정되지 않았다. 그러나, LA 배지에의 BSA 첨가는 $[^{14}C]acetate$표식 지방산의 중성지질 획분에의 표적량은 증가하고, 인지질 획분에 표적량은 감소하여, 양지질의 합성에는 상반되는 결과를 나타내었다. $[^{14}C]acetate$ 표적 중성지질, 인지질 및 유리지방산의 분비는 LA배지에 비교해 LA+BSA 배지에서 현저하게 증가하였다. 이상의 결과에서, 사람 간배양 세포에서 LA와 BSA는 각각 지질대사에 다른 영향을 미치고, BSA 농도는 리포단백질 분비에 영향을 미치는 것으로 시사된다.

The effects of linoleic acid(LA, 18 : 2) and/or bovine serum albumin(BSA) on the lipid metabolism in human hepatoma cell line HepG2 cells were evaluated. HepG2 cells were cultured in basal Dulbecco's modified Eagle's(DME) medium(Basal medium), DME medium containing 0.2 mM LA(LA medium), or DME medium containing both 0.2 mM LA and 0.2-1.0% BSA(LA+BSA medium). $[^{14}C]Acetate(0.3\;{\mu}Ci/ml\;medium)$ was added as a radioactive lipid precursor and the cells were incubated for 6 hours. An addition of LA to basal medium resulted in a decrease in the incorporation of $[^{14}C]acetate$ into total cholesterol fraction. In contrast, an addition of BSA to LA-containing medium tended to increase the incorporation of $[^{14}C]acetate$ into total cholesterol. The alteration of cholesterol metabolism in HepG2 cells incubated in LA+BSA medium was attributed by an increase in the incorporation of $[^{14}C]acetate$ into free cholesterol, but not cholesteryl ester fraction. In addition, the secretion of cholesterol was increased by LA+BSA medium, suggesting that BSA stimulates cholesterol secretion. No significant change in the incorporation of $[^{14}C]acetate$ into cellular total lipids was observed among the experimental groups. However, an increased incorporation of $[^{14}C]-labelled$ fatty acid into cellular triacylglycerol and decreased incorporation into phospholipid were observed in cells incubated with LA+BSA medium as compared to those of LA medium. The secretions of $[^{14}C]-labelled$ triacylglycerol, phospholipid, and free fatty acid were also stimulated in HepG2 cells incubated with LA+BSA medium. In conclusion, the present study suggests that in human hepatocytes, LA and BSA influence lipid metabolism, and BSA enhances the secretion of lipids.