Studies on the Isolation of Cholesterol Oxidase Producing Soil Microorganism and the Culture Condition for the roduction of High Activity Cholesterol Oxidase

Cholesterol Oxidase를 생성하는 토양 미생물의 분리 및 효소 생산에 관한 연구

A novel strain of HSL613 producing a large amount of cholesterol oxidase as an extra~ cellular enzyme was isolated from soil samples. Experiments were carried out to optimize the condition of cholesterol oxidase production using HSL613 strain. This microorganism was shown to give the maximum yield f)f cholesterol oxidase in the medium containing 2% glucose, 2% yeast extract, 0.2% $K_2HP0_4$, 0.1% NaCl. 0.005% $CaCl_22H_2O, 0.001% $FeSO_47H_20$. The optimum temperature was $30^{\circ}C$ and the enzyme production reached a maximum level at 144 hours of cultivation (10.3$\mu$/ml).

토양으로부터 cholesterol oxidase 생산성이 있는 균주를 분리하고, 이들 분리된 균주들로 부터 여러 단계의 균주 선발 실험을 통하여 cholesterol oxidase 생산성이 가장 우수한 미생물을 선별하여 HSL613이 라고 명명하였다. 이 HSL613은 $37^{\circ}C$에서 보다 $30^{\circ}C$에서 배양했을 때 더 높은 효소생산성을 나타내었고 배양시간이 경과함에 따라 pH가 높아지면서 효소생산이 증가하여, 144시간 배양하였을 때 pH는 8.5로 높아졌고 효소생산량도 가장 높았다. 균체량은 120 시간 배양하였을 때 가장 많았다. 본 실험에서 HSL613의 효소생산조건을 검토한 결과 최적 배지조성은 2.0% glucose, 2.0% yeast extract, 0.2% $K_2HP0_4$, 0.1% NaCl. 0.005% $CaCl_22H_2O, 0.001% $FeSO_47H_20$ 로 판명되었으며, $30^{\circ}C$에서 144시간 (6일때) 배양하였을 때 효소생성이 가장 많았고 (10.3U/ml), 종균의 접종량은 1.0%(v/v)일때가 가장 효소생성이 잘 되었다.