본 연구에서는 멸균처리공정이 없는 돈육 포장공정을 대상으로 작업장에서 직접 분리한 야생균주인 Salmonella spp. KSC101를 작업장의 온도와 시간을 주요 변수로 하여, 이들 현장에서의 Salmonella spp. KSC101의 성장 특성을 파악하고, 이를 수학적으로 예측할 수 있는 모델을 개발하였다. 돈육포장공장 현장을 반영하여 온도는 0, 5, 10, 15, $20^{\circ}C$로, 시간은 0, 1, 2, 3시간으로 하였으며, $0^{\circ}C$와 $5^{\circ}C$에서는 성장이 발생하지 않았으며, $10^{\circ}C$, $15^{\circ}C$, $20^{\circ}C$에 는 약간의 성장이 있었으나 증가수준은 평균 0.34 log CFU/g정도였고, $20^{\circ}C$에서 성장율이 더 높았으나 $15^{\circ}C$와는 통계적으로는 유의하지 않았다(p < 0.05). 하지만 PMP와 비교시 야생균주인 Salmonella spp. KSC101의 성장이 더 빠른 것으로 나타났다. 이들 실험결과를 바탕으로 1차 모델은 Gompertz 4 parameter식을, 2차 모델은 Exponential decay식을 이용하여 성장예측모델을 개발하였으며, $R^2$값은 0.99이상으로 나타났다. 개발된 모델에 대한 검증으로 RMSE를 이용하였으며, 값이 0.103으로 양(+)의 방향으로 약간 초과 예측하는 것으로 나타났으나, 최종적으로 실험값과 예측값이 ${\pm}0.5$ log cfu/g 내에서 일치하고 있어, 본 연구에서 개발된 모델은 추후 냉장돈육 포장공정에서 위생관리기준 설정에 대한 과학적 근거자료로 활용할 수 있을 것이다.
단체급식용으로 납품되는 생계육에서 Salmonella를 분리하여 생육제어를 위한 생리특성을 분석하였다. 계육의 총균수는 표피의 내부 살부위에서도 표피 균수의 약 10%정도가 검출되었으며 75 개 계육시료로부터 선택배지를 사용하여 분리한 후 최종적으로 51 주의 Salmonella를 동정하였다. 이들 균주 중 약 70%의 Salmonella는 4종 이상의 항생제에 내성을 보이는 다제내성균으로 보여 국내에서의 기 분리균에 비해서 높은 비율의 항생제에 대한 내성을 나타내었다. 이들 Salmonella에 대한 여러 가지 위생처리제인 유기산의 중 lactic acid와 trisodium phosphate를 agar disk diffusion으로 표준균주인 S. typhimurium ATCC 14028, S. typhimurium ATCC 12023, S. heidelberg and S. enteritidis(isolated from egg)와 비교하였다. Lactic acid는 분리된 Salmonella나 표준균주 모두 비슷한 정도의 내성을 보여 주었고 오히려 분리 Salmonella는 더 내성이 적었다. 그러나 최근에 중요시되는 trisodium phosphate에는 표준균주에 비하여 분리된 wild type에서 내성이 강한 균주가 거의 절반에 가까운 정도로 많음을 알 수가 있었다. 또한 trisodium phosphate에 대한 내성은 처리시간과 처리 후 재생배지에 따라 다르게 보여서 이들은 환경에 따 라 내성이 다르게 나타난다는 것을 알았다. 계육에 오염된 Salmonella는 wild type이므로 실제 위생처리제로 사용할 때는 좀더 철저한 처리가 요망되었다. 그러므로 집단 급식소에 납품되는 계육은 브로일러 사육단계에서의 항생제 관리와 도계과정으로부터 세균오염을 줄여야 하는 노력과 함께 이러한 식중독균의 제어를 위한 위생처리제에 대한 지속적인 기술개발도 필요할 것이다.
표준균주 S. Typhimurium과 분리균주 Salmonella spp.에 오염된 돈육을 $10^{\circ}C$에서 다른 돈육(삼겹살, 안심), 컨베이어벨트와 스테인리스 스틸, 도마에 일정시간(2, 4, 24시간)동안 접촉시킨 후 부착율을 조사하였다. Salmonella 표준균주와 분리균주에 오염된 돈육으로부터 삼겹살에 6시간 접촉 시 부착율은 4.21%, 26.87%를 나타내었고, 안심부위에 16.40%, 27.48%를 각각 나타내었지만, 24시간 후에는 두균 모두 삼결살과 안심부위에 100%의 부착율을 보였다. S. Typhimurium에 오염된 돈육으로부터 컨베이어벨트로의 부착율은 접촉시간 2시간 후에는 1.34%을 증가율을 나타냈으나, 6시간 후에는 0.60%로 감소하였고 분리균주 Salmonella spp. 는 접촉 6시간에 부착율이 5.14%의 부착율을 보였다. 스테인리스 스틸의 경우, 표준균주는 6시간 접촉 후에도 부착율이 전혀 없었으며, 분리균주는 접촉 6시간 후에 5.01%의 부착율을 보였다. 그러나 항균도마에는 표준균주와 분리균주 모두 전혀 부착하지 않았다. 본 연구결과, S. Typhimurium과 Salmonella spp.에 오염된 돈육에서 다른 돈육 또는 식품접촉면으로의 부착율은 접촉시간에 따라 영향이 컸으며 분리균주가 표준균주에 비하여 현저하게 높은 부착율을 나타내었다.
This study was conducted to investigate the infection of livestock diseases using 500 blood samples from wild boars captured in six cities and one county in northern Gyeonggi province, South Korea. We examined 239 cases of classical swine fever virus (CSFV), and each of 500 cases of foot and mouth disease virus (FMDV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), porcine circovirus type 2 (PCV2), Mycoplasma hyopneumoniae (MH), Actinobacillus pleuropneumoniae (APP), Pasteurella multocida type A (PMA), Hemophilus parasuis (HP), Salmonella (Sal.) spp. infections. Antibodies were detected against CSFV (23.4%), PRRSV (4.0%), PCV2 (60.4%), MH (3.0%), APP (69.2%), PMA (52.8%), HP (11.8%), and Sal. spp. infections (37.2%). No antibodies were detected against FMDV. As a result of antigenic analysis of 68 positive cases (13.6%) out of 500 PRRS antigen tests, 61 North American cases, 6 European cases, 1 North American-European complex case. PCV2 has 158 positive cases (31.6%) out of 500 antigen tests, and the results indicate that a considerable number of individuals are infected. To our knowledge, this is the first seroprevalence report of MH, APP, PMA, HP, and Sal. spp. infections in wild boars in South Korea.
Salmonella spp. are gram-negative flagellated bacteria that cause a variety of diseases in humans and animals, ranging from mild gastroenteritis to severe systemic infection. To explore development of a potent vaccine against Salmonella infections, the gene encoding outer membrane protein L (ompL) was inserted into the swinepox virus (SPV) genome by homologous recombination. PCR, western blot, and immunofluorescence assays were used to verify the recombinant swinepox virus rSPV-OmpL. The immune responses and protection efficacy of rSPV-OmpL were assessed in a mouse model. Forty mice were assigned to four groups, which were immunized with rSPV-OmpL, inactive Salmonella (positive control), wild-type SPV (wtSPV; negative control), or PBS (challenge control), respectively. The OmpL-specific antibody in the rSPV-OmpL-immunized group increased dramatically and continuously over time post-vaccination, and was present at a significantly higher level than in the positive control group (p < 0.05). The concentrations of IFN-γ and IL-4, which represent Th1-type and Th2-type cytokine responses, were significantly higher (p < 0.05) in the rSPV-OmpL-vaccinated group than in the other three groups. After intraperitoneal challenge with a lethal dose of Salmonella typhimurium CVCC542, eight out of ten mice in the rSPV-OmpL-vaccinated group were protected, whereas all the mice in the negative control and challenge control groups died within 3 days. Passive immune protection assays showed that hyperimmune sera against OmpL could provide mice with effective protection against challenge from S. typhimurium. The recombinant swinepox virus rSPV-OmpL might serve as a promising vaccine against Salmonella infection.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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