An improved method for extracting high quality and quantity RNA from a jelly mushroom and a dimorphic fungus-Tremella fuciformis which is especially rich in polysaccharides, is described. RNA was extracted from T. fuciformis mycelium M1332 and its parental monokaryotic yeast-like cells Y13 and Y32. The A260/280 and A260/230 ratios were both approximately 2, and the RNA integrity number was larger than 8.9. The yields of RNA were between 108 and $213{\mu}g/g$ fresh wt. Downstream molecular applications including reverse transcriptional PCR and quantitative real-time PCR were also performed. This protocol is reliable and may be widely applicable for total RNA extraction from other jelly mushrooms or filamentous fungi rich in polysaccharides.
국내에서 처음으로 Hypoxylon truncatum을 채집하여 형태 및 유전적 특징을 관찰하였다. 채집된 균주의 형태적 특징은 문헌에 기록된 외국의 기존 균주의 특정과 일치하였으며 각기 다른 두 형태의 stromata를 지니고 있었다. 대상균주로부터 DNA를 추출한 후 ITS 부분에 대한 PCR-RFLPs를 이용하여 분석을 하였다. 그 결과, 총 6종의 제한효소로부터 유래된 절편들 중 대상균주간에는 서로 공통되는 절편이 관찰되지 않았다. 이러한 결과를 볼 때 다른 형태의 stromata를 지니고 있는 균주간에는 상당한 유전적 거리가 있다고 할 수 있다. 그러므로 다른 형태의 stromata를 지니고 있는 H. truncatum 균주는 다른 종일 것이라 사료된다. 또한 H. truncatum은 백목이 버섯의 인공재배에 있어서 아주 중요한 역할을 할 수 있으므로 본 균주를 사용하기 전에, 이 균에 대한 정확한 분류학적 개념 확립은 백목이 버섯 인공재배를 위한 정확한 균주 선발에 큰 도움이 되리라 생각된다.
Chronic ultraviolet (UV) radiation causes photoaging, which represents skin damage, disrupts skin barrier function, and promotes wrinkle formation. We investigated that the polysaccharide extract of an edible basidiomycetous white jelly mushroom, Tremella fuciformis, (TF-Glucan®) exhibited statistically photoprotective activity by inhibiting matrix metalloproteases (MMPs) and increasing collagen synthesis, and an anti-inflammatory activity by inhibiting nitric oxide and pro-inflammatory cytokines at the concentrations of less than 1000 ㎍/ml, which is not cytotoxic (p < 0.05). Additionally, TF-Glucan® increased the expression of involucrin and filaggrin to prevent the disruption of UVB-induced barrier function (p < 0.05). TF-Glucan® was assessed as a safe material by the human primary skin irritation (1, 3, 5%), human repeated insult patch test (no sensitization at 5%), 3T3 NRU phototoxicity assay (no phototoxicity, PIF < 2, MPE < 0.1), eye irritation test test by BCOP (no category, IVIS ≤ 3) and local lymph node assay (negative at 10, 25, 50%) for identifying potential skin sensitizing. These results suggest that TF-Glucan® may be useful as an anti-photoaging ingredient for developing cosmeceuticals.
본 연구에서는 혈당강하 소재로서 가능성이 확인된 GFPC와 잎새버섯 및 흰목이 추출 혼합물의 안전성을 평가하기 위하여 수행되었었다. 마우스에 대한 급성경구독성을 평가하기 위해 체중 kg 당 최고 5g의 각 시험물질을 마우스 위에 직접 투여하여 48시간 동안 관찰 한 결과 모든 실험군에서 사망예가 관찰되지 않아 LD50 은 5g/kg B.W. 이상으로 계산되었으며, 임상 증상이나 체중에서도 유의할만한 소견이 관찰되지 않았다. 따라서 본 실험의 GFPC와 잎새버섯 및 흰목이 추출 혼합물은 마우스에 있어서 단기 급성 경구독성이나 부작용을 유발하지 않는 안전한 식품소재로 평가되었다. 결론적으로 GFPC와 잎새버섯 및 흰목이 추출 혼합물은 급성 독성이나 부작용을 유발하지 않아 임상사용의 가능성을 제시하여 주었다.
Kim, Kyung-Ai;Chang, Hyun-You;Choi, Sung-Woo;Yoon, Jeong-Weon;Lee, Chan
Food Science and Biotechnology
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제15권6호
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pp.889-895
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2006
Cytotoxic effects of extracts from Tremella fuciformis strain FB001 were evaluated on the DLD-1 human colon adenocarcinoma cell line and the content of polyphenolic compounds in the extracts were analyzed. Hexane, chloroform, and ethyl acetate subfractions (experimental setting I) exhibited cytotoxic effects on the human colon adenocarcinoma DLD-1 cell line with $IC_{50}$ values of 350, 400, and 450 ppm, respectively. When T. fuciformis was extracted sequentially with ether, ethyl acetate, chloroform, and ethanol (experimental setting II), the ether extract demonstrated potent cytotoxicity with an $IC_{50}$ value of 150 ppm, followed by ethyl acetate and chloroform fractions. If the first extraction solvent was chloroform instead of ether (experimental setting III), exposure of the cell line to chloroform, ethyl acetate, and ether extracts at 1,000 ppm led to cell death. High levels of phenolic compounds were estimated for all hydrophobic extracts, which exhibited cytotoxic effects. We propose that this useful information gives additional support to our understanding of the biology and utility of this particular mushroom.
본 연구에서 흰목이버섯의 추출조건별 추출수율과 기능성 성분의 함량을 비교하여 최적 추출조건을 분석하였으며, 모든 분석에서 R2이 0.9331~0.9462로 유의성을 보이는 것을 확인하였다. 각 독립변수에 따른 추출수율과 ergothioneine, 𝛽-glucan 성분을 분석한 결과 추출수율은 추출온도와 추출시료농도에 반비례했으며, 추출시간에는 큰 영향이 없었다. Ergothioneine 성분은 온도가 증가할수록 증가하며, 추출시간은 4.33 h가 가장 높았고 시료량에 큰 영향이 없었다. 𝛽-glucan 성분은 온도가 증가할수록 감소했으며, 추출시간에 큰 영향이 없었고 시료량이 21.2 mg/mL에서 가장 높았다. 모든 종속변수의 최대 독립변수는 온도 60℃, 추출시간 4.33 h, 추출시료농도 16.6 mg/mL에서 추출수율 24.9%, ergothioneine 성분함량 66.8 ug/g, 𝛽-glucan 성분함량 34.9 g/100 g으로 나타났다.
Background : The white jelly mushroom (Tremella fuciformis), one of the most popular edible fungi, has medicinal properties. However, the effects of T. fuciformis in skin whitening or anti-wrinkle efficacy has not been defined to date. The aim of the present study was to investigate the effects of T. fuciformis extracts on whitening and anti-wrinkle efficacy in skin cells. Methods and Results :We prepared T. fuciformis extracts with water. The extracts ($80^{\circ}C$) contained 12.11 mg/g polyphenol and 8.54 mg/g flavonoid concentration. T. fuciformis extracts markedly decreased melanin contents and tyrosinase activity in ${\alpha}$-MSH-stimulated melanocytes (B16F10 cells). In addition, the mRNA expression of melanin formation factors, such as microphthalmia-associated transcription factor (MITF), tyrosinase-related protein-1 (TRP-1) and tyrosinase-related protein-2 (TRP-2) were significantly down-regulated in ${\alpha}$-MSH-stimulated melanocyte. Furthermore, T. fuciformis extracts increased the synthesis of type I procollagen and reduced mRNA expression of matrix metalloproteinase 1 (MMP-1) in the human dermal fibroblast (HDFn cells). These data indicated that T. fuciformis extracts induce repression of cellular melanogenesis and protect against wrinkles caused by UVB-stimulated damage. Conclusions : Thus T. fuciformis extracts could be a cosmetic candidate for skin whitening and anti-wrinkle effects.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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