분만 후 3일 이내에 분비되는 임실 지역의 젖소 초유에서 유청 단백질을 효율적으로 분리하고 RAW 264.7 세포의 증식 및 면역활성에 미치는 영향을 조사하였다. 실험에 사용한 초유의 유청 단백질 g당 TGF-${\beta}1$은 875 pg/mL,TGF-${\beta}2$는 6,600 pg/mL이었으며 실험에 사용한 초유 유청 단백질 내 총 TGF-${\beta}$의 양은 7,475 pg/mL이었다. RAW264.7 세포에 대한 초유 유청 단백질 첨가에 따른 세포증식 정도를 알아본 결과 10 mg/mL의 농도까지는 세포성장을 유도하였으나 20 mg/mL 이상의 농도에서는 세포성장을 억제하였다. 이에 RAW 264.7 세포에서의 초유 유청 단백질의 면역관련 실험에 사용할 농도는 최대 10 mg/mL까지로 결정하였다. RAW 264.7 세포에 초유 유청 단백질(0-10 mg/mL)과 LPS(1 ${\mu}g/mL$)를 차례로 반응시키고 NO생성량을 측정한 결과 초유 유청 단백질이 농도 의존적으로 NO의 생성을 억제하였다. 또한 LPS 자극에 의한 염증성 사이토카인(TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6)이 생성되는 과정에서 초유 유청 단백질의 효과를 확인하였다. 그 결과, LPS를 단독으로 첨가했을 때 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6의 농도가 모두 증가하였으나 초유 유청 단백질을 첨가한 경우에는 염증성 사이토카인의 생성이 농도 의존적으로 감소하는 경향을 보였다. 초유 유청 단백질에 의해 NO를 비롯한 염증성 사이토카인의 생성이 억제되는 것이 heme oxygenase-1의 발현과 관련하는지 알아보고자 초유 유청 단백질을 농도별(0-10 mg/mL)로 처리하여 heme oxygenase-1의 발현여부를 측정한 결과 대조군과 비교하여 3-4배 이상의 발현 증가를 보였다. 이상의 결과들로 미루어보아 LPS로 자극된 RAW 264.7 세포에서 TGF-${\beta}$ 등을 함유한 초유 유청 단백질은 10 mg/mL 이하의 농도에서 농도 의존적으로heme oxygenase-1의 발현을 유도하여 염증성 사이토카인인 TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6 및 NO의 생성을 억제하는 것으로 판단되었다.
A substantial body of evidence has emerged over the last decade in support of the novel concept that dietary calcium and dairy foods play an important role in regulating energy metabolism and thereby promote healthy weight management and reduce obesity risk. This concept has been demonstrated in experimental animals studies, cross-sectional and prospective population studies and a number of randomized clinical trials. Notably, the effects of dairy foods in weight management are more consistent than the effects of supplemental calcium across clinical trials, and calcium per se is responsible for approximately 40-50% of the effects of dairy. The calcium component is only effective in individuals with chronically low calcium intake, as it serves to prevent the endocrine response to low calcium diets which otherwise favors adipocyte energy storage; calcium also serves to promote energy loss via formation of calcium soaps in the gastrointestinal tract and thereby reduce fat absorption. The calcium-independent anti-obesity bioactivity of dairy resides primarily in whey. The key components identified to date are leucine and bioactive peptides resulting from whey protein digestion. The high concentration of leucine in whey stimulates a repartitioning of dietary energy from adipose tissue to skeletal muscle where it provides the energy required for leucine-stimulated protein synthesis, resulting in increased loss of adipose tissue and preservation of skeletal muscle mass during weight loss. Finally, dairy rich diets suppress the oxidative and inflammatory responses to obesity and thereby attenuate the diabetes and cardiovascular disease risk associated with obesity.
본 시험은 GMP 내 기본적으로 7%로 결합되어 있는 sialic acid의 함유량을 그대로 보유하도록 제조한 유청단백가수분말(시험물질명: 7%-GNANA)을 기능성 식품 원료 개발함에 최종 연구목표를 두었다. 시험물질은 GMP(7% sialic acid 함유)를 원료로 하고, 여기에 식품첨가물로 허용된 효소인 Alcalase를 사용하여 지표성분인 sialic acid를 100% 효율로 분리시킨 후, 동결 건조한 7%-GNANA(7% sialic acid와 GMP 단백질로 구성, 제품명: HELICOBACTROL-7)을 (주)한일바이오메드사(한국)에서 공여 받아 GLP 가이드라인에 따라 미생물복귀돌연변이시험을 실시하였다. 미생물에 대한 돌연변이 유발성 유무를 검색하기 위해 히스티딘 요구성 균주인 Sal. typhimurium TA98, TA100, TA1535 및 TA1537과 트립토판 요구성 균주인 E. coli WP2uvrA를 이용하였다. 미생물복귀돌연변이시험은 시험물질을 5단계의 농도군(0, 61.7, 185, 556, 1,670, $5,000{\mu}g/plate$)으로 하여 평가하였다. 본 시험을 통한 평가결과, 대사활성계 존재 유무와 관계없이 모든 균주에서 시험물질의 각 농도에 의한 복귀돌연변이 유발원 양성기준인 콜로니 생성수치가 재현성 있는 증가를 나타내지 않았으며, 용량의존성도 확인되지 않았다. 결론적으로, 시험물질인 7% G-NANA의 식품첨가물로서 등록을 위하여 수행한 미생물돌연변이시험에서 안전성이 확인되었다.
대두(大豆) 단백질에의 함유황(含硫黃) 아미노산 강화원(强化源)으로서 유청(乳淸)단백질을 사용하기 위한 목적으로 유청과 두유(豆乳)의 혼합물로부터 응고물을 만들고 유청(乳淸) 및 대두(大豆) 단백질의 공동침전 최적조건과 특성을 조사하였다. 유청과 두유는 1:1 부피비로 혼합한 다음 응고제인 $CaCl_2$의 농도를 $0.005{\sim}0.5M$, pH$1.5{\sim}8.0$, 온도를 $60{\sim}100^{\circ}C$로 조정하여 응고시키고 이 때 얻어지는 커드 여액(濾液)의 흡광도가 가장 낮은 조건을 결정하였다. 공동침전 최적조건은 여액의 흡광도가 낮고 그 때 얻어지는 커드의 조직감이 좋은 때로 하였다. 공동침전 최적조건은 $CaCl_2$농도 0.0125M, pH$6.5{\sim}7.5$, 온도 $70{\sim}80^{\circ}C$로 나타났다.
Kim, Sang-Bum;Ku, Min-Jung;Cho, Won-Mo;Ki, Kwang-Seok;Kim, Hyeon-Shup;Nam, Myoung-Soo
한국축산식품학회지
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제30권6호
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pp.923-929
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2010
Colostral whey prepared from colostrum (pooled from first six post-partum milkings) was heated for 10 min at $100^{\circ}C$ Heated colostral whey was incubated with 1% enzymes (protein equivalent basis) for 15, 30, 60, 90, and 120 min at $50^{\circ}C$. Papain, pepsin, trypsin, and alcalase produced different degrees of hydrolysis (DH), 10.66%, 12.42%, 10.83%, and 25.31%, respectively, at an incubation time of 120 min. The SDS-PAGE reveals that significant amounts of bovine serum albumin (BSA), ${\beta}$-lactoglobulin (${\beta}$-LG), and ${\alpha}$-lactalbumin (${\alpha}$-LA) survived papain digestion. In contrast, pepsin completely removed BSA but not ${\beta}$-LG present in heated colostral whey. Alcalase completely eliminated BSA, ${\beta}$-LG, and ${\alpha}$-LA. This differential hydrolysis was confirmed by reversed-phase HPLC analysis. Using ion-exchange chromatography, fraction-1 (F-1) was obtained from alcalase hydrolysate at a NaCl gradient concentration of 0.25 M. Reversed-phase HPLC chromatograms of alcalase F-1 showed numerous small peaks, which probably indicate that a variety of new peptides were produced. Iron content of alcalase F-1 was 28.94 ppm, which was the highest among all enzyme fractions, whereas iron content of colostral whey was 36.56 ppm. Main amino acids contained in alcalase F-1 were Thr (15.45%), Glu (14.12%), and Ser (10.39%). Therefore, alcalase can be used to generate good iron-binding peptides in heated colostral whey, and the resulting iron-binding peptides could be suitable as a value-added food ingredient for food supplements.
One growth trial and one digestibility trial were conducted to evaluate the nutritional value of HP300, a commercially processed soybean meal product for weanling pigs. Dried whey, fish meal and/or full fat extruded soybeans (FFES) as well as portions of soybean meal (SBM) were replaced with HP300 in weanling pig diets. The objectives were to investigate the effects of HP300 on growth performance, digestibility, ileal amino acid digestibility and blood amino acid concentration in weanling pigs. One hundred and twenty crossbred $(Duroc{\times}Beijing\;Black{\times}Landrace)$ pigs weaned at 28 days of age were used in the growth trial. The pigs were randomly allocated to five treatments, with three pens per treatment and eight pigs per pen. The trial duration was 28 days. The control (CTRL) diet contained no HP300; in treatments 2, 3 and 4, dried whey and fish meal were replaced by 3.0%, 7.5% and 10.5% HP300; in treatment 5, full fat extruded soybeans were replaced by 10.5% HP300 plus soybean oil to attain the same metabolic energy content as FFES. Five T-cannulated barrows were used in a digestibility trial with a $5{\times}5$ Latin square design to determine nitrogen retention and amino acid ileal digestibility of HP300 used alone or mixed with other ingredients. The results indicated that replacement of dried whey, fish meal, full fat extruded soybeans and a part of the soybean meal with HP300 in piglet diets improved average daily gain and feed conversion ratio (p < 0.05). There was a trend toward improved DM, crude protein and amino acid ileal digestibilities and improved protein and amino acid ileal digestibilities and improved protein net availability with the use of HP300 in swine diets.
본 연구에서는 분만 후 5일 이내에 분비되는 젖소 초유의 whey 및 whey 분획이 Th1 cell의 증식에 어떤 영향을 미치는지, 그리고 Th1 cell 증식에 직접적으로 관여하는 whey 분획이 macrophage의 $TNF-{\alpha}$ 분비에 미치는 영향을 조사하였다. 초유 whey를 ultrafiltration으로 분자량별로 분획한 결과, 단백질 성분의 회수율은 Fr. I, II, III가 각각 72%, 17.7%, 10.2%였으며, 당 성분의 회수율은 Fr. I, II, III가 각각 22.1%, 7.4%, 70.1%였다. Fr. II를 재분획한 Fr. P의 단백질 회수율과 Fr. O의 당 회수율은 각각 86.9%, 88.8%였다. 각각의 whey 분획의 농도 대비 Th1 cell 증식 효과를 검증한 결과, 1 mg/mL 농도에서 Fr. II가 Th1 cell을 가장 많이 자극시켰으며, 세포증식율은 67.1%였으나, Fr. II의 단백질 및 올리고당 분획의 세포증식효과는 없는 것으로 나타났다. Whey의 각각의 분획을 이용하여 $TNF-{\alpha}$ 분비 능력을 조사한 결과, Fr. O가 양성대조구로 사용한 LPS보다 약 80% 이상의 $TNF-{\alpha}$분비 유도 능력이 있는 것으로 나타났다.
Milk fat globule membrane (MFGM) is a lipid carrier in mammals including humans that consists mainly of polar lipids, like phospholipids and glycolipids. In this study, a process to enrich polar lipids in commercial butter and whey powder, including polar lipids of MFGM, was developed. WPC (whey protein concentrate) 60 was selected as the most suitable raw material based on the yield, phospholipid, protein, and lactose content of the polar lipid fraction obtained by ethanol extraction of two WPC (WPC60 and WPC70) and two buttermilk (A and B). After fractionation under optimum conditions, the polar-lipid enriched fraction from WPC60 contained 38.56% phospholipids. The content of glycolipids, cerebroside, lactosylceramide, ganglioside GM3, ganglioside GD3, was 0.97%, 0.55%, 0.09%, and 0.14%, respectively. Rancimat results showed that the oxidation stability of fish oil increased with an increase in the polar-lipid fraction by more than 30 times. In addition, the secretion of IL-6 and TNF-α decreased in a concentration-dependent manner after treatment of RAW 264.7 cells with 0.1 to 100 ppm of the polar lipid fraction. In this study, polar lipid concentrates with antioxidant and anti-inflammatory activity, were prepared from milk processing by-products. The MFGM polar lipid concentrates made from by-products are not only additives for infants, but are also likely to be used as antioxidants in cooking oils and as active ingredients for functional foods.
Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) has low resistance to low pH and bile salt in the gastrointestinal juice. In this study, the gel made from whey protein concentrate (WPC) and pullulan (PUL) was used as the wall material to prepare the microencapsulation for LGG protection. The gelation process was optimized and the properties of gel were also determined. The results showed the optimal gel was made from 10% WPC and 8.0% PUL at pH 7.5, which could get the best protective effect; the viable counts of LGG were 6.61 Log CFU/g after exposure to simulated gastric juice (SGJ) and 9.40 Log CFU/g to simulated intestinal juice (SIJ) for 4 h. Sodium dodecyl sulphite polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) confirmed that the WPC-PUL gel had low solubility in SGJ, but dissolved well in SIJ, which suggested that the gel can protect LGG under SGJ condition and release probiotics in the SIJ. Moreover, when the gel has highest hardness and water-holding capacity, the viable counts of LGG were not the best, suggesting the relationship between the protection and the properties of the gel was non-linear.
냉각유도젤화(cold-induced gelation) 기술을 이용하여 제조한 엽산 함유 유청단백질 나노담체에 대하여 실험적 변수, 즉, 고분자의 종류, 분리유청단백 용액의 농도 및 pH, 수용액층(aqueous phase)과 유기용매층(organic phase)의 비율, 분리유청단백 용액의 열처리 온도 등에 따른 입도 및 용출 양상의 변화를 고찰하였다. 고분자의 경우 알긴산을 이용하였을 때 가장 작은 입도를 나타내었으며, kcarrageenan의 경우 가장 큰 입도를 나타내었다. 수용액층과 유기용매층의 비율의 경우 그 값이 감소할수록 낮은 평균입도를 나타내었다. 분리유청단백 용액의 농도는 1%, pH는 8.0, 열처리 온도는 $80^{\circ}C$일 때 가장 작은 입자경 (<330 nm)을 나타내었다. 용출시험 결과, pH 7.4에서 2시간 이내에 대부분의 포집된 엽산이 용출된 반면, pH 1.2에서는 6시간 이상 용출이 지연되는 것을 확인하였다. 이와 같은 결과는 냉각유도젤화에 의해 나노담체를 제조하는 경우 실험적 변수들이 나노담체의 특성에 큰 영향을 미치는 것을 의미한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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