To characterize the genotypic traits of clinical methicillin-resistant Staphyiococus aureus (MRSA) isolates (n=49), major virulence-associated genes were detected by using PCR-based methods. All the MRSA isolates possessed coagulase gene and showed four polymorphism types [500bp ($6{\%}$),580bp ($27{\%}$), 660bp ($65{\%}$) and 740bp ($2{\%}$)] due to variable numbers of tandem repeats present within the gene. The four or five different loci of hemolysin gene family were dominant in the MRSA isolates,25 of which($51{\%}$) possessed a combination of hla / hlb / hld/ hlg / hlg-2 genes as the most prevalent type. The prevalence of enterotoxin genes was varied among the MRSA isolates. sea and seb genes were detected from all the MRSA isolates. But sei, tsst-1, seg, sec, and seh genes were detected from 31 ($63{\%}$), 16 ($33{\%}$), 14 ($29{\%}$), 8 ($16{\%}$), and 5 ($10{\%}$) isolates, respectively. sed and sej genes were detected from 1 ($2{\%}$) isolate, respectively. see, eta, and etb genes were not detected at all. sea / seb genes were co-detected from 11 ($23{\%}$) isolates, sea / seb / sei genes from 9 ($19{\%}$) isolates, and sea / seb / seg / sei / tsst-1 genes from 5 ($10{\%}$) isolates. Other genes were co-detected with below $10{\%}$ frequencies.
The rice blast fungus, Magnaporthe oryzae, is an important pathogen of rice plants. It is well known that genes encoded in the genome have different evolutionary histories that are related to their functions. Phylostratigraphy is a method that correlates the evolutionary origin of genes with evolutionary transitions. Here we applied phylostratigraphy to partition total gene content of M. oryzae into distinct classes (phylostrata), which we designated PS1 to PS7, based on estimation of their emergence time. Genes in individual phylostrata did not show significant biases in their global distribution among seven chromosomes, but at the local level, clustering of genes belonging to the same phylostratum was observed. Our phylostrata-wide analysis of genes revealed that genes in the same phylostratum tend to be similar in many physical and functional characteristics such as gene length and structure, GC contents, codon adaptation index, and level of transcription, which correlates with biological functions in evolutionary context. We also found that a significant proportion of genes in the genome are orphans, for which no orthologs can be detected in the database. Among them, we narrowed down to seven orphan genes having transcriptional and translational evidences, and showed that one of them is implicated in asexual reproduction and virulence, suggesting ongoing evolution in this fungus through lineage-specific genes. Our results provide genomic basis for linking functions of pathogenicity factors and gene emergence time.
At the present study, it was aimed to explore the molecular genetic characterization of multiple antimicrobial resistant Salmonella spp. isolates from pigs and cattle. A total of 138 Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) isolates were typed with phage, among them, 83.3% of S. Typhimurium tested could divide into a 10 phage types. Definitive type 193 (DT193) (25.4%) and DT195 (24.6%) were exhibited as the dominant types. DT104 and U302 were found from pigs and cattle. On the other hand, S. Enteritidis had 6 phage types, of them, phage type 21 (PT21) and PT11b were the popular types. In the plasmid profiles, 135 of S. Typhimurium isolates were exhibited 1 to 6 plasmid bands which molecular weight ranged from 90 to 2kb. 35 isolates (25.4%) harbored a 90kb plasmid which is thought to be the serotype specific virulence plasmid. Two of twenty five S. Enteritidis had common plasmids at 2 and 1.5kb. With multiplex polymerase chain reaction, virulence genes (invA and spvC) were detected from all Salmonella spp. from 167 of S. Typhimurium, S. Enteritidis and chloramphenicol resistant S. Schwarzengrund, but some drug resistant genes, such as PSE-1, cml/tetR and flo were not determined but other drug resistant genes, for example TEM and int were found. The detection rates of spvC, TEM and int gene was 35.3%, 29.3% and 72.5%, respectively. The TEM gene was highly popular in S. Typhimurium, which was detected from ampicillin and amoxicillin resistant strains as 95.9%. int gene was able to detect from all the isolates identified as multidrug resistsnt (MDR), particularly DT193 was thought as the most prevalent virulence and multidrug resistance isolate. The major plasmid profile and drug resistance pattern of DT193 were 90, 40, 10.5, 6.3, 3.0kb and ACCbDNaPSSuT, respectively. MDR was commonly found in other phage types, particularly DT104, U302 and DT203.
The aim of this study was to investigate the distribution of genes that encode multi-drug efflux pumps and virulence factors in Enterococcus faecalis isolated from retail meat and antibiotic resistance patterns of these strains. Of the 277 retail meat samples, 93 Enterococcus faecalis were isolated. The strains exhibited resistance to ampicillin (35.5%), chloramphenicol (6.4%), ciprofloxacin (4.3%), erythromycin (18.3%), levofloxacin (0%), quinupristin-dalfopristin (76.3%), tetracycline (45.2%), teicoplanin (0%) and vancomycin (0%). The strains were positive for MFS type eme(A) (100%), ABC type efr(A) (100%), ABC type efr(B) (98.9%) and ABC type lsa (91.4%) efflux pump gene. The strains were positive for gelE (68.8%), ace (90.3%), asa1 (47.3%), efaA (91.4%) and esp (12.9%) virulence gene. This research will help to assess the hazards associated with the occurrence of drug resistance among enterococci from retail meat. Therefore, it is necessary to monitor enterococcus spp. isolated from retail meat continuously.
Jin, Young Hee;Ryu, Seung Hee;Kwak, Jae Eun;Kim, Ri Ra;Choi, Young Hee;Lee, Myung Sook;Hwang, In Sook
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.53
no.4
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pp.495-500
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2021
This study investigated the prevalence, serotypes, virulence genes, and antimicrobial resistance patterns of Listeria monocytogenes isolates collected from salmon products. A total of 16 out of 65 salmon products (24.6%) were positive for L. monocytogenes. Bacteria were most frequently identified in smoked salmon products (15/53, 28.3%). Serological tests revealed that serotype 1/2b (62.5%) was the predominant serotype of L. monocytogenes, followed by 1/2a (37.5%). All isolates harbored 10 virulence-associated genes (inlA, inlB, plcA, plcB, hlyA, actA, prf, fbpA, iap, and mpl), confirming their potential pathogenicity. The isolates of L. monocytogenes showed resistance to cefotetan (100%), cefotaxime (87.5%), cefepime (31.3%), erythromycin (6.3%), and tetracycline (6.3%); however, most of the strains were susceptible to antimicrobials except cephalosporins. These results provide useful information regarding the contamination of salmon products with L. monocytogenes, which may have implications for public health.
The objective of this study was to investigate the pathogenicity and antimicrobial resistance of foodborne pathogens isolated from farmstead cheeses. Twenty-seven isolates, including 18 Bacillus cereus, two Escherichia coli, and seven Staphylococcus aureus, were subjected to polymerase chain reaction (PCR) to detect virulence genes and toxin genes, and the antibiotic resistances of the isolates were determined. All E. coli isolates were determined by PCR to be non-pathogenic. Among the 18 B. cereus isolates, 17 isolates (94.4%) were diarrheal type, as indicated by the presence of nheA, entFM, hbIC, cytK and bceT genes, and one isolate (5.6%) was emetic type, based on the presence of the CER gene. Among the seven S. aureus isolates, three (42.9%) had the mecA gene, which is related to methicillin-resistance. Most B. cereus isolates (94.7%) showed antibiotic resistance to oxacillin and penicillin G, and some strains also showed resistance to ampicillin (26.3%), erythromycin (5.3%), tetracycline (10.5%), and vancomycin (5.3%). These results indicate that microbial food safety measures for farmstead cheese must be implemented in Korea because antibiotic resistant foodborne pathogens, with resistance even to vancomycin, harboring virulence genes were found to be present in the final products of farmstead cheese.
Seo, Byoung-Joo;Jeong, Chang-Gi;Kang, A-Rum;Cho, Ho-Seong;Kim, Won-Il
Korean Journal of Veterinary Service
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v.39
no.2
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pp.87-92
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2016
Porcine edema disease (ED) is a communicable disease of pigs caused by infection with Shiga toxin (Stx)-producing Escherichia coli (STEC) which expresses F18 fimbriae and/or Stx type 2e (Stx2e). While STEC causes a severe illness including hemorrhagic colitis and hemolytic-uremic syndrome in humans, it induces damage to the vascular endothelium, which results in edema, hemorrhage, and microthrombosis, leading in high mortality in pigs. In the present study, we cultured Stx2e-producing E. coli field isolates from conventional pig farms that experienced sudden deaths previously with symptoms similar to porcine edema disease, which were further investigated with Shiga toxin profiles. A total of 43 strains were identified from the collected samples by F18 or Stx2e specific PCR. Based on the PCR, 42 isolates out of 43 isolates were proved to carry one of F18 or Stx2e genes and 14 isolates to carry both F18 and Stx2e genes. All of the 30 isolates that harbored Stx2e gene induced the cytopathic effect (CPE) in vero cells and especially, the isolate 150229 produced the highest level of Shiga toxin. Therefore, we identified the virulence genes (F18 and Stx2e) and demonstrated Shiga toxin-producing abilities from porcine edema disease causing E. coli filed isolates. These results suggested that one of the isolates could be a vaccine antigen candidate against STEC through further investigating to elicit an immune response.
Our group had isolated Bifidobacterium breve strain BS2-PB3 from human breast milk. In this study, we sequenced the whole genome of B. breve BS2-PB3, and with a focus on its safety profile, various probiotic characteristics (presence of antibiotic resistance genes, virulence factors, and mobile elements) were then determined through bioinformatic analyses. The antibiotic resistance profile of B. breve BS2-PB3 was also evaluated. The whole genome of B. breve BS2-PB3 consisted of 2,268,931 base pairs with a G-C content of 58.89% and 2,108 coding regions. The average nucleotide identity and whole-genome phylogenetic analyses supported the classification of B. breve BS2-PB3. According to our in silico assessment, B. breve BS2-PB3 possesses antioxidant and immunomodulation properties in addition to various genes related to the probiotic properties of heat, cold, and acid stress, bile tolerance, and adhesion. Antibiotic susceptibility was evaluated using the Kirby-Bauer disk-diffusion test, in which the minimum inhibitory concentrations for selected antibiotics were subsequently tested using the Epsilometer test. B. breve BS2-PB3 only exhibited selected resistance phenotypes, i.e., to mupirocin (minimum inhibitory concentration/MIC >1,024 ㎍/ml), sulfamethoxazole (MIC>1,024 ㎍/ml), and oxacillin (MIC >3 ㎍/ml). The resistance genes against those antibiotics, i.e., ileS, mupB, sul4, mecC and ramA, were detected within its genome as well. While no virulence factor was detected, four insertion sequences were identified within the genome but were located away from the identified antibiotic resistance genes. In conclusion, B. breve BS2-PB3 demonstrated a sufficient safety profile, making it a promising candidate for further development as a potential functional food.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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