Production of biomass by fed-batch culture of Saccharomyces cerevisiae Hansen CBS5926, which is used to treat intestinal disorders, was investigated using ethanol as the sole carbon source. Ethanol was a better carbon source than glucose for high cell density culture of the st-rain since it could decrease the frequency of contamination while increasing the efficiency and final productivity of the fermentation process. Under optimal conditions, 38 g/ℓ of dry cell weight with $2.2{\times}10^{9}$ cfu/㎖ of maximum viable cell count was achieved after 72h cultivation. Freeze-drying of the cultured yeast cells resulted in severe reduction of viability. Of the freeze-drying protectants tested, 20% sucrose and 30% lactose were most effective for the preservation of yeast cells with a viability level of 16.3%. A combination of skim milk and lactose with 20% sucrose(w/v) exerted no synergistic influence upo the viability of the cells during cryopreservation by freeze-drying.
The objectives of present study were to investigate the effects of benzo[a]pyrene(BaP) on cytotoxicity, lipid peroxidation and antioxidant enzymes in rat hepatocyte primary culture. Primary cultures of rat hepatocytes were incubated for 24 hr, 48 hr or 72 hr in the presence of various concentrations (0, 10, 20, 30, 50 or 100 $\mu.$ M) of BaP. Cytotoxicity and cell viability were determined by measuring glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) activity, lactate dehydrogenase(LDH) activity and 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MIT) value. Lipid peroxidation was evaluated using thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) assay. Effects on antioxidant system were determined by measuring glutathione peroxidase(GPx) activity, glutathione reductase(GR) activity and glutathione concentration. Activities of GOT and LDH, MTT value as well as TBARS concentration were not affected by up to 100 $\muM$ of BaP for 24 hr incubation. However, BaP at the concentration of 50 $\muM$ for 48 hr incubation or at the concentration of 30 $\muM$ for 72 hr incubation began to increase LDH activity and TBARS concentration but decrease MTT value, representing that BaP caused cytotoxicity and decreased cell viability in dose- and time-dependent manners. GPx activity began to be decreased by BaP at the concentration of 50 $\muM$ for 72 hr incubation. Whereas, GR activity began to be decreased by BaP at the concentration of 20 $\muM$ for 72 hr incubation. Glutathione concentration began to be decreased by BaP at the concentration of 20 $\muM$ for 72 hr incubation and was further reduced to 90% by 100 $\muM$ of BaP. These results demonstrate that BaP caused cytoctoxicity and decreased cell viability by increasing lipid peroxidation and decreasing glutathione concentration as well as activities of GPx and GR.
Seahorse, a syngnathidae fish, is one of the important organisms used in Chinese traditional medicine. Hippocampus abdominalis, a seahorse species successfully cultured in Korea, was validated for use in food by the Ministry of Food and Drug Safety in February 2016; however. the validation was restricted to 50% of the entire composition. Therefore, to use H. abdominalis as a food ingredient, H. abdominalis has to be prepared as a mixture by adding other materials. In this study, the effect of H. abdominalis on muscles was investigated to scientifically verify its potential bioactivity. In addition, the anti-fatigue activity of a mixture comprising H. abdominalis and red ginseng (RG) was evaluated to commercially utilize H. abdominalis in food industry. H. abdominalis was hydrolyzed using Alcalase, a protease, and the effect of H. abdominalis hydrolysate (HH) on the muscles was assessed in C2C12 myoblasts by measuring cell proliferation and glycogen content. In addition, the mixtures comprising HH and RG were prepared at different percentages of RG to HH (20, 30, 40, 50, 60, 70, and 80% RG), and the anti-fatigue activity of these mixtures against oxidative stress was assessed in C2C12 myoblasts. In C2C12 myoblasts, $H_2O_2$-induced oxidative stress caused a decrease in viability and physical fatigue-related biomarkers such as glycogen and ATP contents. However, treatment with RG and HH mixtures increased cell viability and the content of fatigue-related biomarkers. In particular, the 80% RG mixture showed an optimum effect on cell viability and ATP synthesis activity. In this study, all results indicated that HH had anti-fatigue activity at concentrations approved for use in food by the law in Korea. Especially, an 80% RG to HH mixture can be used in food for ameliorating fatigue.
Formaldehyde (FA) is an important irritant compound in pesticide to induce asthma and allergy in respiratory system. Alveolar macrophage is also an pivotal cell in the immune response of respiratory system. However, the effect of FA in macrophage cell viability has not been elucidated. Thus, this study was conducted to investigate the effect of FA on apoptosis in Raw 264.7 cells, alveolar macrophage cell line. In this study, FA decreased cell viability of lung alveolar macrophage cells in a dose-dependent manner (>$100{\mu}M$). FA-induced decrease of cell viability was blocked by the treatment of antioxidants (vitamin C, NAC, and catalase). Indeed, FA induced lipid peroxide formation in Raw 264.7 cells. FA decreased Bcl-2 expression but increased Bax expression in lung alveloar macrophage cells. In addition, FA also increased the cleaved form of caspase-3. In conclusion, FA induced apoptosis via oxidative stress in cultured Raw 264.7 cells.
Wang, Qian;Lee, Ah Young;Choi, Ji Myung;Lee, Dong Gu;Kim, Hyun Young;Lee, Sanghyun;Cho, Eun Ju
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.45
no.2
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pp.147-153
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2014
This study was focused on the evaluation of radical scavenging effect and the protective activity against oxidative stress of the extract and fractions from Petasites japonicus. P. japonicus was extracted with methanol and then fractionated into 4 fractions [n-butanol, ethyl acetate (EtOAc), methylene chloride, and n-hexane]. The extract and fractions showed strong 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical scavenging activity. Among all the fractions, particularly, the EtOAc fraction showed the strongest effect with the $IC_{50}$ value of $0.02{\mu}g/ml$. In addition, the fractions also showed strong hydroxyl radical scavenging activity and nitric oxide scavenging activity as well. Furthermore, cell viability generated by the P. japonicus extract and 4 fractions were examined under C6 glial cellular model. The C6 glial cells showed high generation of reactive oxygen species (ROS) and decrease in cell viability by the treatment generator of hydrogen peroxide. However, the production of ROS formation was decreased by the treatment of the fractions of P. japonicus and also founded that the EtOAc fraction led to significant increase in the cell viability at concentration $100{\mu}g/ml$. Results from this work indicated that P. japonicus showed protective effects against oxidative stress and its EtOAc fraction may be served as a useful natural antioxidant.
This study investigated the protective effect of the butanol (BuOH) fraction from Laminaria japonica (BFLJ) extract on high glucose-induced oxidative stress in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Freeze-dried L japonica was extracted with distilled water, and the extracted solution was mixed with ethanol then centrifuged. The supernatant was subjected to sequential fractionation with various solvents. The BuOH fraction was used in this study because it possessed the strongest antioxidant activity among the various solvent fractions. To determine the protective effect of the BFLJ, oxidative stress was induced by exposing of HUVECs to the high glucose (30 mM) or normal glucose (5.5 mM) for 48 hr. Cell viability, lipid peroxidation, glutathione (GSH) concentration, and antioxidant enzyme activities such as catalase, superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-px), and glutathion reductase (GSH-re) were measured. Exposure of HUVECs to high glucose for 48 hr resulted in a significant (p<0.05) decrease in cell viability, SOD, GSH-px and GSH-re and a significant (p<0.05) increase in thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) formation in comparison to the cells treated with 5.5 mM glucose or untreated with glucose. BFLJ treatment decreased TBARS formation and increased cell viability, GSH concentration, and activities of antioxidant enzymes including catalase, SOD, GSH-px, and GSH-re in high glucose pretreated HUVECs. These results suggest that BFLJ may be able to protect HUVECs from high glucose-induced oxidative stress, partially through the antioxidative defence systems.
Benzene is one of volatile environmental pollutants to induce asthma and allergy in respiratory system. The airway epithelium is a physical barrier to inhaled toxicants and particulates. However, the effect of benzene in lung epithelial cell viability has not been elucidated. Thus, this study was conducted to investigate the effect of benzene on apoptosis in A549 cells, lung epithelial cell line. In this study, benzene decreased cell viability of A549 cells in a dose-dependent manner (> $10{\mu}M$). Benzene-induced decrease of cell viability was blocked by the treatment of antioxidants (vitamin C and NAC). Indeed, benzene induced lipid peroxide formation in A549 cells. Benzene decreased Bcl-2 expression but increased Bax expression in A549 cells. In addition, benzene also increased the cleaved form of caspase-3. In conclusion, benzene induced apoptosis via oxidative stress in cultured epithelial cells.
Purpose: The aim of this study was to observe a direct effect of irradiation on the periodontopathic Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis). Materials and Methods: P. gingivalis 2561 was exposed to irradiation with a single absorbed dose of 10, 20, 30, and 40Gy. Changes in viability and antibiotic sensitivity, morphology, transcription, and protein profile of the bacterium after irradiation were examined by pour plating method, disc diffusion method, transmission electron microscopy, RT-PCR, and immunoblot, respectively. Results: Viability of irradiated P. gingivalis drastically reduced as irradiation dose was increased. Irradiated P. gingivalis was found to have become more sensitive to antibiotics as radiation dose was increased. With observation under the transmission electron microscope, the number of morphologically abnormal cells was increased with increasing of irradiation dose. In RT-PCR, decrease in the expression of fimA and sod was observed in irradiated P. gingivalis. In immunoblot, change of profile in irradiated P. gingivalis was found in a number of proteins including 43-kDa fimbrillin. Conclusion: These results suggest that irradiation may affect the cell integrity of P. gingivalis, which is manifested by the change in cell morphology and antibiotic sensitivity, affecting viability of the bacterium.
To improve the semen production, the selenium(Se) and vitamin E(Vit. E) were administrated into Hanwoo young sire for intensification an antioxidant system and the taurine were supplemented into semen extender for improving the semen characteristics. The 16 heads ranging from twenty to thirty two months of age were randomly assigned to control group, Se-admistrated group(Se-group), Vit. E-administrated group(Vit. E-Group) and Se and Vit. E administrated group(Se and Vit. E-group). Se and Vit. E dministrated 3 times every 30 days by intramuscular injection. The administration of Se, Vit. E, and Se and Vit. E didn't affect on semen volume, sperm concentration, and total sperm number among all groups(p>0.05). Adiministration of Se improved sperm motility and viability. Motility of Se-group and control were 26.01% and 19.20%, respectively(p<0.05). Viability of Se-group(47.07%) was higher than control group(35.73%), Vit. E group(36.55%)(p<0.05). The administration of Se and Vit. E didn't affect sperm capacitation and acrosome reaction. The 100mM taurine supplement into semen extender increased the motility of frozen/thawed semen in the Vit. E-group(p<0.05) and had a beneficial effects on decreasing abnormality of frozen/thawed semen in all groups(p<0.05). These results indicate that Se administration improve sperm motility and viability, and the taurine supplement into semen extender decrease abnormality in Hanwoo young sire.
Ha, Ho-Kyung;Jeon, Na-Eun;Kim, Jin Wook;Han, Kyoung-Sik;Yun, Sung Seob;Lee, Mee-Ryung;Lee, Won-Jae
Food Science of Animal Resources
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v.36
no.2
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pp.267-274
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2016
The purposes of this study were to investigate the impacts of concentration levels of whey protein isolate (WPI) and inulin on the formation and physicochemical properties of WPI/inulin nano complexes and to evaluate their potential prebiotic effects. WPI/inulin nano complexes were produced using the internal gelation method. Transmission electron microscopy (TEM) and particle size analyzer were used to assess the morphological and physicochemical characterizations of nano complexes, respectively. The encapsulation efficiency of resveratrol in nano complexes was studied using HPLC while the potential prebiotic effects were investigated by measuring the viability of probiotics. In TEM micrographs, the globular forms of nano complexes in the range of 10 and 100 nm were successfully manufactured. An increase in WPI concentration level from 1 to 3% (w/v) resulted in a significant (p<0.05) decrease in the size of nano complexs while inulin concentration level did not affect the size of nano complexes. The polydispersity index of nano complexes was below 0.3 in all cases while the zeta-potential values in the range of -2 and -12 mV were observed. The encapsulation efficiency of resveratrol was significantly (p<0.05) increased as WPI and inulin concentration levels were increased from 1 to 3% (w/v). During incubation at 37℃ for 24 h, WPI/inulin nano complexes exhibited similar viability of probiotics with free inulin and had significantly (p<0.05) higher viability than negative control. In conclusions, WPI and inulin concentration levels were key factors affecting the physicochemical properties of WPI/inulin nano complexes and had potential prebiotic effect.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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