Background: Carcinoembryonic antigen (CEA) is well-known soluble tumor marker frequently detectable in peripheral blood of carcinoma patients and considered as good target for antigen-specific immunotherapy. However, it is known that the induction of immune response to CEA is very difficult because CEA is a self-antigen expressed in fetal cells and weakly expressed in normal colorectal epithelial cells. To enhance anti-tumor immunity specific for CEA, recombinant CEA protein was modified using listeriolysin O (LLO) for endosomal lysis and trans activator of transcription (Tat) domain for transducing extracellular proteins into cytoplasm. Methods: After immunization using dendritic cells pulsed with Tat-CEA, both Tat-CEA and LLO, and both Tat-CEA and Tat-LLO, antibody titer to CEA and LLO, cytotoxic T lymphocyte activity and the frequency of IFN-${\gamma}$ producing T lymphocytes were measured. Results: Immunization using DC pulsed with both Tat-CEA and Tat-LLO protein showed the increasement of production of CEA-specific antibody in serum, cytotoxic T lymphocyte activity, the frequency of IFN-${\gamma}$ secreting T cells, compared with DC pulsed with both Tat-CEA and LLO. Furthermore the ratio of CD8+T cell to $CD4^+$ cell among CEA-specific T cells was increased in group pulsed with both Tat-CEA and Tat-LLO. Conclusion: These results suggested that DC vaccine using Tat-LLO could be used for the development of effective immunotherapy for the treatment of tumor.
Ginseng has been widely used in Korea as a natural medicine due to its saponin contents. Although the total amount of ginseng stem and leaf saponins (GSLS) is 4~5 times higher than that of saponin in the root, the root is mainly used. This is due to two reasons: nervous system-stimulant activity of GSLS and pesticide residues in GSLS. In this study, residual agricultural pesticides were removed from GSLS using two types of bacterial treatments. Two GSLS treatment groups of chickens (GSLS-1 and GSLS-2) were established. The chickens were fed 0.4% GSLS-1 or GSLS-2 mixed with crop. We then evaluated the effects of GSLS on bodyweight and several immune parameters. At the end of the experiments, chickens fed GSLS-1 and red ginseng saponin had significantly higher growth rates (16.6% and 8.0%, respectively) compared to the vaccine control group treated with Noblis Salenvac-T. The group fed GSLS-1 also had the highest IgG titer that was significantly different at the end of experiments compared to the other groups. These findings imply that GSLS-1 is a good candidate feed additive for the chicken industry.
Lee, Seung Jin;Lim, Soon Ok;Jeong, Jae Yeop;Park, Min Jeong;Park, Ju Eun
대한임상검사과학회지
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제46권1호
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pp.12-16
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2014
Tetanus has high lethality and can cause serious complication, so it is very important to have a quick and exact checkup and treatment. In this study, we conducted a study about clinical characteristics and types of tetanus patients in Daegu Emergency Medical Center and we studied possibility of Tetanos Quick Stick (TQS) as a selective check up to treat tentanus by comparing the results of local checkup kit measured from tetanus quick stick developed to check up tetanus antibody titer and results measured from ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). The result of the study showed that tetanus happens more to males, and by looking at season, tetanus happened most in summer (from June-August) as 19 cases (45.3%), and when patients come to the emergency medical center, the diagnosis name was electrolyte imbalance 14 cases (33.3%), peripheral nerve 11 cases (26.2%), Meningitis 8 cases (19.0%), drug addiction 7 cases (16.7%), and the patients who are diagnosed as tetanus at the beginning of hospitalization was 2 cases (4.8%). The result of TQS usefulness by comparing with ELISA, in TQS, 42 people was positive and 478 people was negative. it was positive when the result was over 0.1 IU/mL, 48 people was ELISA positive while 472 people was negative. TQS checkup has accuracy of 98%, sensitivity of 83.3%, specificity of 99.5%, positive predictability of 95.2% and negative predictability of 98.3%. The evaluation of current immunity statuses of tetanus patients is available for TQS checkup, and it has an advantage of preventing side effects coming from the injection of unnecessary vaccine and immunoglobulin, and it is thought that it can give help to emergency checkup and treatment at the beginning.
The HIV-1 p24(202-221) sequence ETINNEEEWDRVHPV HAGP contains a B-cell epitope with the earliest immune response and the highest antibody titer against anti-mouse sera obtained by immunization with p24 antigens. A novel mouse monoclonal antibody (mAb) was generated against the immunodominant B-cell epitope of the HIV-1 p24 capsid protein, p24(202-221). BALB/c mice were immunized with the four branched multiple antigenic peptide (MAP) containing the HIV-1p24(202-221) sequence, and antibody-secreting hybridoma were produced by fusion of mouse splenocytes with P3X63Ag8.653, mouse myeloma cells. One clone which produced the antigen-specific mAb named KI-24 (Isotype IgG1, light chain: ${\kappa}$) was identified. mAb KI-24 was highly specific for both the p24(202-221) and p24 proteins when analyzed by ELISA and Western blotting. Since p24(202-221) also contains a cytotoxic T-lymphocyte epitope, this specfic peptide epitope and the monoclonal antibody with specific reactivity against the p24 protein and p24(202-221) can be used in peptide vaccine development and p24 antigen detection from HIV patients.
Kim, Joo-Young;Chung, Kun-Sub;Park, Jeon-Han;Kwak, Yi-Sub;Lee, Bong-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권1호
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pp.55-64
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2009
A B cell-specific growth substance (BGS) was isolated from the slime layer of Bacillus licheniformis E1. Unlike LPS, the BGS was not affected by polymixin B, an inhibitor of LPS, or by TLR4, and resulted in the growth of B cells. When BALB/c mice were treated with the BGS, the B cell population was found to increase in both the bone marrow and the spleen, with a marked increase after 24 h in the bone marrow and after 48 h in the spleen. When using antibodies to B cell lineage-restricted surface molecules to analyze the B cell population changes resulting from treatment with the BGS, an increase in immature B cells ($IgM^+$ and $AA4.1^+$) and mature B cells ($IgM^+$ and $IgD^+$) was found in the bone marrow 24 h after treatment with the BGS, whereas a decrease in mature B cells and increase in $IgG^+$ B cells were found in the spleen. When the BGS and OVA antigen were injected into the peritoneal cavity of BALB/c mice, this resulted in a high OVA-specific antibody titer in the sera, similar to that induced by aluminum hydroxide. Therefore, it is anticipated that the mass production of the BGS by B. licheniformis E1 could be used for studies of B cells in immunology, and contribute to the development of a new adjuvant for vaccine manufacture.
임상적으로 급성 류마티스 열을 진단할 때 Jones 진단기준에 맞지 않는 경우, 특히 관절염이 있고, 이하학적 검사상 A군 베타 용혈성 연구균감염과 관련이 있을 때, 급성 류마티스 열과 연구균 감염성 반응성 관절염의 구분은 치료나 예후를 결정하는데 중요하다. 지금까지의 문헌을 참고한 결과, 연구균 감염성 반응성 관절염으로 진단된 환아 중 소수에서도 심염이 발생했음을 알 수 있고, 따라서 예방적 항생제 요법을 시행함에 있어 1년간 매달 페니실린 예방요법을 시행하고 심염이 발생한 경우에는 급성 류마티스 열로 재분류 후 이에 준해 치료하여야 하겠다. 저자들의 증례는 고열과 왼쪽 무릎 관절통을 주소로 내원한 연구균 감염성 반응성 관절염 환아 1례를 경험하였기에 보고하는 바이다.
Effects of different photoperiod regimens on the cellular and humoral immunity in broiler chickens were studied(Exp 1). Total one hundred ninety two one-day-old commercial broiler chicks(Cobb$\times$Cobb) were raised between constant lighting(CL) and intermittent lighting (1h light: 3h darkness(IL; 1l; 3D) Body weight, feed intake and feed conversion were measured for seven week. Peripheral blood and splenic lymphocyte activities were tested at 3 and 5 wk of age by performing a mitogen cellproliferation assay with a polyclonal T-cell mitogen, concanavalin A (Con A), and B-cell mitogen, lipopolysaccharide (LPS). To investigate the effect of photoperiod on the humoral immunity, chicks were immunized with sheep red blood cell(SRBC) and iinactivated Newcastle disease virus(NDV) vaccine. Total immunoglobulin G(IgG) concentration was also determined. Diurnal change of melatonin was tested in sera. In experiment 2, 0.1ml melatonin were subcutaneously injected from three to five weeks old if immunomodulation effect of lighting regimen was due to the melatonin or not. Injections of melatonin were made at 0700h and the dosage was 10ng (M2), 100ng(M3), 1$\mu\textrm{g}$(M4) per bird daily, respectively. control were quivalent injections of vehicle(M1). Lymphocyte activities were tested and humoral immunities were examined at 5 weeks of age. Blood melatonin concentration was determined at 0h, 1, h, 2h, and 3h posterior to injection at five weeks old. It was higher in CL chicks than IL chickens during the subsequent period of 3 to 5 wk of age. However, weight gain of chicks raised IL were significantly higher at 6 wk of age than CL(P<0.05). Antibody response to NDV was not affected by both photoperiod regimens and melatonin injection, whereas anti-SRMB titer and IgG concentration were enhanced. Lymphocyte activity of chickens raised under IL was sighificantly higher than those of chickens raised under CL. Melatonin injection also increased lymphocyte activity. When peripheral blood lymphocytes were used, proliferation response to LPS and Con A were significantly increased in M2 and respectively. The results of this experiments suggest that IL improved host immune response and melatonin have immunomodulatory roles.
Western immunoblot analysis of antigen of T sergenti merozoite revealed that the immunodominant proteins of this organism were characterized as the 18KD, 29KD, 34KD, 45KD and 105KD in Korea. The 34KD and 45KD among those immunodominant proteins of the parasite were isolated and their amino acid sequences from the $NH_2$-terminus were determined and synthesized. They respective polypeptides were cationized to enhance their antigenicity, fortified with Freund's adjuvant and tested for immunogenicity in rabbits and cattle. The results obtained were as follows; 1. Theileria sergenti merozoite antigen was shown in 120KD, 100KD, 66KD, 45KD, 34KD and 30KD in western immunoblot using serum of rabbits immunized with 34KD synthetic polypeptide and 70KD, 58KD, 55KD and 45KD using bovine serum. In western immunoblot, 45KD, 34KD and 30KD were recognized by immunized rabbits, and 50KD and 45KD by cattle sera immunized with 45KD synthetic polypeptide, respectively. 2. The ELISA utilizing the synthetic polypeptides demonstrated significant antibody response to the respective peptides. After the 2nd booster injection, an OD of 0.760(preimmunization 0.132) in rabbits and an OD of 0.645(preimmunization 0.488) to 34KD synthetic polypeptide in cattle were observed. In animals immunized with 45KD synthetic polypeptide, after the 2nd booster injection, an OD of 0.640(preimmunization 0.144) in rabbit, and an OD of 0.776 (preimmunization 0.477) in cattle were measured. 3. After the 2nd booster the reciprocal IFA titer was 1:64 in rabbits and 1:512 in cattle immunized with the 34KD synthetic polypeptide. The IFA titre was observed as 1:512 in rabbit and 1:1,024 in cattle in immunized with the 45KD synthetic polypeptide.
Korean mistletoe Lectin (KML-C) is composed of A and B sub-chain. B chain binds to carbohydrates on cell surface and A chain hinders translation and induces an apoptosis as a RIP (ribosome inactivating protein). KML-C has very strong biological activities, it has seriously limits to use as a cancer therapy or adjuvant because of its toxicity to normal cells. This study is therefore conducted to see if B chain of KML-C might have immunological activity, especially adjuvant activities with less toxicity. We isolated B chain from KML-C using the lactose affinity chromatography, and examined their immunoadjuvant activity. The isolated B-chain did not show any cytotoxicity against tumor cell, RAW264.7, and P388D1 while KML-C had a very strong toxicity. This non-toxic effect was observed also by in-vivo study. Both humoral and cellular immunities were observed ; the antibody titer was increased when the mice were immunized with B-chain used as adjuvant like Freund's adjuvant, indicating that B chain of mistletoe lectin alone might be used for adjuvant; it also increased DTH in cellular immunity. These results suggest that B-chain of KML-C might be used for adjuvant used for the production of antibody or vaccine with less toxicity.
Kim, Kyoung-A.;Son, Young-Ok;Kim, So-Soon;Jang, Yong-Suk;Baek, Young-Hyun;Kim, Chun-Chu;Lee, Jeong-Hoon;Lee, Jeong-Chae
Food Science and Biotechnology
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제27권6호
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pp.1823-1831
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2018
This study examined the efficacy of Atractylodes macrocephala Koidz (AMK) protein and polysaccharide extracts as adjuvant or adjuvant booster when given together with porcine pleuropneumonia vaccine. Experimental mice (n = 5/group) were subcutaneously immunized with $25{\mu}g$ ApxIIA #3 antigen, a target protein against A. pleuropneumoniae, together with alum and/or various concentrations ($0-500{\mu}g$) of the AMK extracts, while the control group received PBS only. Immunization with ApxIIA #3 antigen increased the antigen-specific IgG titer and this increase was enhanced in the immunization together with AMK protein, but not polysaccharide extract. Supplementation of AMK protein extract exhibited dose-dependent increases in the antigen-induced protective immunity against A. pleuropneumoniae challenge and in the lymphocyte proliferation specific to the antigen. Glycoproteins present in the AMK extract were the active components responsible for immune response induction. Collectively, the present findings suggest that AMK glycoproteins are useful as immune stimulating adjuvant or adjuvant booster.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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