한국재래산양의 임신60, 90, 105, 120일령 태아 및 신생아의 뇌를 대상으로 면역조직화학적방법을 통하여 면역반응을 나타낸 방사아교세포를 투과전자현미경적 방법을 이용하여 그 미세구조를 연구한 결과 임신 60일령 태아의 방사아교면역반응세포는 소수의 사립체와 많은 당원질 및 과립형질내세망이 관찰되었으며 임신90일령 태아 이후에서도 소수의 사립체, 많은 당원질 그리고 소수의 형질내세망이 관찰되었으며 임신95일령 태아에서 골지체가 관찰되었다. 그리고 임신 120일령에서 혈관에 부착되어 종말발을 뻗고 있는 GFAP 면역반응세포를 관찰할 수 있었다.
여러 가지 장점이 있음에도 일정성이 유지되지 않는 다는 단점이 있는 마이크로파 고정 효과를 "저에너지 마이크로파"를 사용하여 보완하고자 하였다. 이를 위해 사람 위선암(gastric adenocarcinoma)을 저 에너지 마이크로파(low energy of microwave, LEM)로 고정하여 미세구조와 항원-항체반응 수준에서 그 효과를 관찰하고자 하였다. LEM으로 고정한 시료에서 항원-항체반응은 monoclonal 생쥐-항-사람-p53 (IgG2b, kappa)과 토끼-항-사람-c-erbB-2로 처리하여 결과를 냉동 절편과 비교하였다. 암세포 특이 항원은 LEM으로 처리한 시료에서 발색반응 산물의 확산이 적은 것으로 관찰되었고 보다 쉽게 인지될 수 있었다. LEM으로 고정한 위선암 조직의 미세구조는 보존된 것으로 보였으나 그 고정효과는 2차 원인에 의해 손상되는 것으로 보였으므로 이를 보상하기 위해서 LEM 고정 후 저농도 화학 고정액으로 재차 처리하여 다소의 일정성을 유지할 수 있었으나 위선암 조직은 더 낮은 마이크로파 에너지 요구성이 있는 것으로 생각할 수 있었다. 따라서 암세포가 요구하는 "최소 마이크로파 요구 범위"를 밝히기 위해서 배양 HeLa 세포를 더 낮은 에너지의 마이크로파와 저농도 화학고정액으로 처리한 결과 HeLa세포 미세구조가 보존되는 등 비교적 좋은 효과를 볼 수 있었다. 이 결과로 보면 LEM 조사(照射)로서 생체 저분자 및 수용성 단백질이 crosslink되는 효과가 있는 것으로 보았고 이를 저농도 화학 고정액으로 재차 고정하는 방법으로서 미세구조 및 항원성 보존 효과가 있는 것으로 사료되었으므로 이에 대하여 논의하고자 하였다.
This experiment was performed to study the morphological responses of the epidermis of the rat scalp, following X-ray irradiation. Male rats were divided into normal and experimental groups. Rats anesthetized with sodium thiopental, were exposed only on their head areas with a single dose of 3,000rads or 6,000rads, respectively. Radiation was produced by Mitsubishi Linea Accelerator ML-4MV at the speed of 200rads/min. The target distance was 80cm. Animals were sacrificed on six hours, two days and six days following irradiation. By the perfusion fixation through the heart, rats were fixed with 1% glutaraldehyde-1% paraformaldehyde solution. Pieces of the tissue taken from the scalp were refixed in 2.5% glutaraldehyde-1.5% paraformaldehyde solution, followed by post-fixation with 1% osmium tetroxide, and embedded within araldite mixture. The sections were cut on a LKB-V ultratome, stained with uranyl acetate and lead citrate, and were observed with JEM 100CX-II electron microscope. The results were as follow; 1. Six hours after exposure to 3,000rads of X-ray. Disrupted intercellular spaces, within which some amorphous materials were filled, disrupted mitochondria, and vacuoles in the keratinocytes were frequently observed, but six days after exposure to 3,000rads of X-ray, Morphology of the keratinocytes was generally restored. 2. Many of the morphological changes were seen on the six days after exposure to 6,000rads of X-ray. 3. Widened intercellular spaces and thickened dense plaques of the desmosomes were frequently observed after exposure to 6,000rads of X-ray. 4. In the experimental groups, the Langerhans and the Merkel cells were damaged, similarly to the keratinocyte. Above results suggest that head irradiation with the dose of 3,000rads temporarily damaged the epidermis of the scalp, though most of the structures recover within six days, whereas with the dose of 6,000rads it severely damaged the epidermis without showing any recovering tendency.
큰발웃수염박쥐 (Myotis macrodactylus)의 세정관 정상피의 분화과정과 미세구조적 특징들은 알아보기 위하여 광학 및 전자현미경을 이용하여 조사하였다. 정자형성 과정은 4월부터 9월까지로 나타났다. 정자형성세포의 미세 구조적 특징에 있어서, A형 (Ad, Ap)의 정원세포는 기저막 위에 위치하며, Sertoli cell에 의해 둘러싸여져 있고, 대부분의 세포는 타원형이다. Ad형은 Ap형 보다 핵과 세포질의 전자밀도가 높은 것이 특징적인 반면에, B형의 정원세포는 구형의 세포로서 A형 정원세포 보다 세포가 크며, Ap형과 마찬가지로 세포질이 밝고, 거의 핵소체가 핵막에 인접되어 있다. 정모세포는 크고 구형이지만, 제 1 정모세포가 제 2 정모세포보다 다소 크다. 정자변태는 골지, 두모, 첨체, 성숙 및 이탈기로 구분하였고, 세포구조물의 특징들에 의해 각각 전 후기로 다시 세분하여 전과정을 9 (기)로 나누었다. 핵질의 변화는 골지후기부터 서서히 응축하기 시작하여, 이탈기에서 완전한 핵을 형성하였다. 정자꼬리의 형성시기는 골지전기에서 형성하기 시작하여 이탈기에서 완성되었다. 동면직전 10월부터 동면기 (11월, 12월, 이듬해 1, 2, 3월)까지는 정자형성 세포의 퇴화과정이 일어났다. 즉 미분화 정자형성 세포들은 세르톨리 세포의 식작용에 의해 포식되어졌는데 이는 동면을 위한 에너지 효율적 이용과 번식조절을 위한 적응 메카니즘이라 여겨진다.
난태생어류인 성숙한 블랙몰리(black molly, Poecilia sphenops)와 세일핀몰리(sailfin molly, Poecilia latipinna)의 정소를 적출하여 정자형성과정과 정자의 미세구조를 광학현미경과 전자현미경을 이용하여 관찰하였다. 정소는 부레와 창자사이에 위치하고 있었고 장축 7 mm, 단축 2 mm 정도의 크기로 흰색을 띠고 있었다. 두 종 모두 정자형성 과정은 정소낭(testicular cyst)에서 이루어졌으며, 각 정소낭 내에 동일한 분화시기의 생식세포가 분포하고 있었다. 제1정모세포는 타원형으로 관찰되었으며, 핵과 세포질의 전자밀도는 다른 생식 세포들에 비해서 매우 낮았고 미토콘드리아는 핵막주위에 분포하고 있었다. 제2감수분열 전기의 태사기에 나타나는 태기사복합체(synaptonemal complex)들이 확인되는 경우도 있었다. 두 종 모두 제2정모세포는 구형으로 정원세포보다 크기는 작았고 인은 발달되어 있지 않았으며, 핵의 전자밀도는 더 높아졌다. 특히 미토콘드리아는 세포질 전체에 분포하고 있었고 정세포가 정자로 발달하는 정자완성과정시기에 편모가 형성되는 경우가 일반적이지만 이미 제2정모 세포시기에 편모형성이 관찰되었다. 정자의 중편부위를 횡단한 결과 미토콘드리아는 2~4개 정도로 관찰되었고 편모의 미세소관 배열은 전형적인 두 종 모두 9+2 구조를 이루고 있었고 편모에 lateral fin이 발견되었다. 성숙한 정자의 두부형태는 구형인 정세포와 달리 장원추형이었으며 염색질 응축이 매우 뚜렷하였고, 두부에서 첨체는 관찰되지 않았으며 중편부의 미토콘드리아는 두 종 모두 8~10개가 종렬로 위치하고 있었다. 이상과 같이 두 종의 정자형성과정과 정자의 형태는 같으며 이런 특징은 난태생 송사리과 어류의 공통적인 특성으로 생각된다.
본 연구는 15% 글리콜산과 30% 글리콜산이 포함된 각각의 필링제를 털이 제거된 mice 등쪽 피부에 처리하여 시술 전후의 피부 수분량, 유분량 및 pH를 Cutometer로 분석하였고 표피 각 질의 변화에 대한 미세구조를 더마스코프와 주사전자현미경을 사용하여 관찰하였다. 15% 글리콜산을 처리한 실험군 I과 30% 글리콜산을 처리한 실험군 II에서 피부의 수분량, 유분량 및 pH의 변화는 필링제의 농도가 높을수록 감소하는 것으로 확인되었다. Mice 피부의 표면을 더마스코프로 관찰한 결과 정상 대조군의 피부는 전반적으로 투명한 상태로 표피에서 각질이 분리되어 있거나 탈락되기 직전의 상태로 나타났다. 15% 글리콜산으로 처리한 mice 피부 표면의 각질은 많이 제거된 상태로 관찰되었으며 30% 글리콜산으로 처리한 mice 피부 표면은 매끄러운 상태로 선홍색을 띠고 있었다. Mice 피부 각질층을 인위적으로 탈락시켜서 주사전자현미경으로 관찰한 결과 정상 대조군의 각질층 표면은 각화세포 막의 함입에 의해서 불규칙하였다. 15% 글리콜산으로 처리한 mice 피부의 각질층 표면은 비교적 매끄러웠으며 노출된 각화세포의 세포질 표면은 약간의 주름이 형성되어 있었다. 30% 글리콜산으로 처리한 mice 피부에서 각질층 표면은 매끄러웠으며 이들 표면은 주름이 형성되어 있지 않았다.
국내 토착 악구충을 발견하기 위하여 1994년 3월부터 1997년 6월까지 미꾸리 3,450마리, 황소 개구리 24마리, 무자치 55마리, 능구렁이 2마리, 유혈목이 62마리, 살모사류 87마리 및 고양이 (stomach only) 438마리를 조사하였던 바, 12마리의 살모사에서 총 21마리의 악구충 유충이 검출되었다. 종 동정을 위하여 검출한 유충의 일부는 glycerin-jelly 봉입 표본 및 조직절편 횡단표본 으로 제작하여 광학현미경으로 관찰하였고, 일부는 주사전자현미경으로 관찰하였다. 유충은 평균 $2.233{\;}times{\;}0.343{\;}mm$ 크기이었고, 작은 피극이 일정한 간격으로 배열되어 있는 약 210줄의 가로 주름을 가지고 있었다. 특징적인 head-bulb에는 소구 (booklet)가 전방에서부터 평균 36.8개, 39.0개, 41.7개 및 44.3개씩 4줄 배열되어 있었다. 중장 부위의 횡단면에서는 19-25개의 상피세 포로 이루어진 장벽이 관찰되었고, 대부분의 장상피세포는 1개씩의 큰 핵을 가지고 있었다. 주사 전자현미경 관찰에서는 충체 전단의 입 부위, 특징적인 head-bulb, 가로주름 (transverse striation)과 피극 (cuticularspine), ceivicalpapilla, 후단 부위 표피 등에서 특징적인 소견을 나 타내었다. 이상의 형태학적 특징을 근거로 하여 한국산 살모사에서 검출한 악구충의 유충을 돼지 악구충 (Gnohostoma hispidum)의 advanced third-stage larva로 동정하였고, 이 연구를 통하여 살모사 (Afkisfodon breuicaudus)가 돼지악구충의 중간숙주임이 최초로 밝혀졌다.
The egg morphology of minute intestinal flukes (MIF) that can occur as human infections in the Republic of Korea, i.e., Metagonimus yokogawai, M. miyatai, M. takahashii, Heterophyes nocens, Heterophyopsis continua, Stellantchasmus falcatus, Stictodora fuscata, Pygidiopsis summa, and Gymnophalloides seoi, was studied in comparison with Clonorchis sinensis. The adult worms were obtained from residents of endemic areas, and their intrauterine eggs were studied and measured using light microscopy; the length, width, length-width ratio (LWR), and Faust-Meleney index (FMI). Several specimens were processed for scanning electron microscopy (SEM), and before gold-coating, the uterine portion of each fluke was etched with a sharp pin in order to expose the eggs. The MIF eggs were ovoid, pyriform, or elliptical with a size range of $21-35{\times}12-21{\mu}m$. S. fuscata eggs revealed the highest FMI (largest in the area) and lowest LWR, whereas P. summa eggs showed the lowest FMI and medium LWR. SEM revealed that G. seoi and S. fuscata had remarkably clean shell surface lacking the muskmelon-like structure which is prominent in C. sinensis eggs. In Metagonimus spp., H. continua, H. nocens, and S. falcatus eggs, minute surface ridges were recognizable though less prominent compared with C. sinensis. On the surface of P. summa eggs, thread-like curly structures were characteristically seen. The results revealed that important differential keys for MIF eggs include the length, width, area (FMI), shape of the eggs, and the extent of the muskmelon-like structure or ridges on their shell surface and operculum.
Kim, Jeong-Soo;Cho, Jeom-Deog;Park, Hong-Soo;Kim, Kook-Hyung;Kim, Kyung-Soo
The Plant Pathology Journal
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제19권2호
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pp.117-122
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2003
Six isolates of Turnip mosaic Potyvirus (TuMV) namely, TuMV-CA7 from oriental cabbage, TuMV-TU and TuMV-TU2 from turnip, TuMV-RA from rape, TUMV-ST from stock, and TuMV-R9 from radish, and Ribgrass mosaic Tobamovirus (RMV-FG22) from oriental cabbage were isolated. Three kinds of characteristics of the six TuMV isolates were sorted by bioassay: TuMV-CA7 and TuMV-TU isolates infected mostly oriental cabbages; TuMV-ST, TuMV-TU2, and TuMV-R9 infected radishes; and TuMV-RA infected both oriental cabbages and radishes. Mixed infections of crucifers were RMV-FG22+TuMV-CA7, RMV-FG22+TuMV-TU, RMV-FG22+TuMV-RA, RMV-FG22+TuMV-ST, RMV-FG22 +TuMV-TU2 and RMV-FG22+TuMV-R9. Crops used were 'Tambok' cultivar resistant to TuMV, 'SSD63' susceptible inbred line of oriental cabbage, pure line of leaf mustard and 'Daeburyungyeorum' cultivar of radish. New specific ultrastructures of nonagon-like ring (NLR) and spiral aggregates (SA) by mixed infection with TuMV and RMV were formed in cells of crucifer plants. The NLR was made by a TuMV surrounded loosely by nine RMV particles, and the SA was formed spirally by full mixed of two virus particles. The SA had some NLR in its center, which was observed from cross sectioned SA. Host plants with specific ultrastructures expressed synergistic symptoms. Specific ultrastructures of NLR and SA were formed in combinations of RMV-FG22 and in TuMV-CA7, TuMV-TU, or TuMV-RA that could infect oriental cabbages. How-ever, no specific ultrastructures and mixing of the two virions in the same cell were observed in combinations of RMV-FG22, and TuMV-57, TuMV-TU2, or TuMV-R9 isolates haying virulence in radishes.
이락촌폐흡충(Paragonimus iloktsuenensis)의 성장 발육에 따른 표피 미세구조의 변화를 주사전자현미경으로 관찰하였다. 충체는 말똥게(Sesarma dehaani)에서 분리한 피낭유충과 흰쥐 감염 후 5∼4주에 얻은 유약충 및 감염 8주에 얻은 성충을 대상으로 하였다. 탈낭한 피낭유충은 작은 표주박 모양으로 전신이 상모양의 피극(tegumental spine)으로 덮혀 있었다. 대형의 제 II형 감각 유두(large, non-ciliated round swelling)가 구흡반 주위에 11∼12개, 복흡반 주위에 6∼8개 배열되어 있었다. 감염 2주의 유약충은 홀쭉하고 긴 모양이었고 피극이 피낭유충 보다 덜 밀생하고 있었으며 피극 끝이 2개로 갈라진 것도 관찰되었다. 많은 제 I형 감각 유두 (ciliated knob-like papillae)가 구흡반 주위에 분포하며 대형의 제 II형 감각 유두가 복흡반 주위에서 관찰되었다. 감염 4주의 유약충은 몸체가 두꺼워졌고 표피에는 3∼5개씩 군집된 피극들이 관찰되었다. 구흡반 및 복홉반 주위에는 제 I형 감각 유두와 소형의 제 II형 감각 유두가 분포하고 있었다. 감염 8주 된 성충은 매우 두꺼운 몸체를 보였고 곰의 발톱처럼 생긴(bearfoot-like) 피극이 전신의 표피에 밀생하고 있었다. 특히 배측에는 자갈 모양의 세포 돌기(cobblestone-like cytoplasmic process) 들이 잘 발달되어 있었고 많은 피극들이 여기에 매몰되어 있는 것이 관찰되었다. 이 연구에서는 이락촌폐흡충이 피낭유충에서 유약충 및 성충으로 성장함에 따라 그 표피의 형태 및 구조도 점차적으로 바뀌며 계속 분화되어 간다는 것을 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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