• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제19권8호
• /
• pp.787-791
• /
• 2009

In the course of screening for substances that inhibit etoposide (10 ${\mu}g$/ml)-induced apoptosis in human leukemia U937 cells, fungal strain F000120, which exhibits potent inhibitory activity, was selected. The active compound was purified from an ethyl acetate extract of the microorganism by Sep-pak $C_{18}$ column chromatography and HPLC, and was identified as heptelidic acid (koningic acid) by spectroscopic methods. This compound inhibited caspase-3 induction in U937 cells with an $IC_{50}$ value of 40 ${\mu}M$ after 8 h of etoposide treatment. Fluorescent dye staining with acridine orange and ethidium bromide showed that heptelidic acid inhibited apoptosis. Furthermore, it was found that DNA fragmentation and caspase-3 activation, the biological hallmarks of apoptosis, were inhibited by the compound in a dose-dependent manner, suggesting that heptelidic acid inhibits etoposide-induced apoptosis via downregulation of caspases.

• 생명과학회지
• /
• 제27권1호
• /
• pp.44-49
• /
• 2017

본 연구에서는 일반적으로 분리 및 분석에 가장 빈번히 사용되고 있는 C18 column과 UV 검출기가 장착된 액체크로마토그래피(HPLC)와 항산화 활성 측정에 사용되는 1, 1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH) 라디칼 소거능 측정 방법을 결합한 HPLC-DPPH 동시 측정법의 최적화와 유용성 확인을 약용식물의 추출물을 대상으로 실시하였다. 최종적으로 적용된 HPLC-DPPH 동시 측정법의 유용성은 갈근, 건강, 유근피, 모과, 황기 등 5종 약용식물의 열수추출물과 대조군으로서 ascorbic acid의 라디칼 소거능을 측정하여 확인하였다. HPLC-DPPH 동시 측정에 앞서 추출액 중 고형분 함량을 refractometer를 사용하여 측정함으로써 추출 수율에 따른 활성 차이를 보정할 수 있도록 하였다. 갈근, 모과, 유근피 열수추출물의 라디칼 소거능이 대조군으로 사용된 ascorbic acid와 비교하여 7.77%, 4.71%, 4.19%로서 다른 열수추출물보다 상대적으로 높은 것으로 확인되었다. 이와 같은 측정법은 실제 활성 성분의 분리 및 분석에 있어서 불필요한 시간 및 시약의 낭비를 줄일 수 있는 유용한 수단이 될 수 있을 것으로 판단된다.

• 대한환경공학회지
• /
• 제32권6호
• /
• pp.639-648
• /
• 2010

본 연구는 극미량의 BPA 분석법을 정립하기 위하여 HPLC-MS/MS를 이용한 BPA 분석 조건을 개발하였고, 초음파를 이용한 BPA의 분해 특성을 조사하였다. HPLC-MS/MS에 의한 BPA의 MDL과 LOQ는 각각 0.13 nM과 1.3 nM로 조사되었는데, 이는 기존의 HPLC-UV (MDL: 81.1 nM, LOQ: 811 nM) 및 FLD (MDL: 4.6 nM, LOQ: 46 nM) 보다 약 620배 및 35배 우수하였으며, U.S. EPA의 음용수 권고기준(1.53 ${\mu}M$ 혹은 350 ${\mu}g/{\ell}$)의 약 1,180배 이하까지 정량분석이 가능하였다. 초음파 조사에 따른 BPA의 분해효율은 저주파(28 kHz)를 제외한 중?고주파 조건(580 and 1000 kHz)에서 반응 30분 이내에 95%이상 제거되었다. 특히 BPA의 분해효율 및 k1의 결과는 580 kHz에서 가장 우수하였는데, 이는 580 kHz 근처의 주파수 영역에서 최적의 초음파 공동현상 및 열분해/산화분해가 일어남을 알 수 있었다. 0.01 mM의 $CCl_4$를 첨가하여 분해효율을 측정한 결과 30분 이내에 BPA 초기농도(1 ${\mu}M$)의 98% 이상까지 제거되었으며, 반응 초기(5분)와 후기(30분)의 $k_1$값은 무첨가 반응에 비해 각각 1.4배 및 1.1배씩 증가하였다. 10 mM의 t-BuOH이 첨가된 결과 무첨가 반응에 비해 약 60% 이상 BPA 분해효율이 감소한 것을 감안할 때 BPA의 주된 초음파 기전은 OH 라디칼에 의한 산화분해임을 알 수 있었다. 그러나 t-BuOH이 첨가된 반응시간 동안(30분) 약 33%의 BPA가 분해가 일어난 것은 OH 라디칼 뿐 아니라 열분해 및 기타 라디칼 등에 의한 분해가 진행되었을 것으로 판단된다.

• 생명과학회지
• /
• 제17권1호
• /
• pp.51-55
• /
• 2007

갈파래(Ulva lactuca)의 용매별 분획의 항산화활성 측정을 위해 갈파래를 95% ethanol로 추출하고 diethyl ether, ethyl acetate, $H_2O$ 등의 용매로 분획하였다. 각 분획을 HPLC로 분석한 결과 각 분획에서 단일 peak가 검출되었으며 용출시간이 서로 달랐다. 각 분획의 항산화 활성을 DPPH 라디칼 소거능, 지질과산화억제활성 방법으로 검증하였다. 각 분획의 DPPH 라디칼 소거활성은 농도의존성을 나타내었고 활성은 수층, ethyl acetate 층, diethyl ether층 분획의 순서였다. 지질과산화 억제활성은 diethyl ether 분획에서 가장 높게 나타났으며 같은 농도의 $\alpha-tocopherol$과 비슷하였다. 본 연구 결과는 갈파래를 이용한 천연 항산화제 생산에 응용이 가능할 것으로 생각된다.

• 고려인삼학회:학술대회논문집
• /
• 고려인삼학회 1993년도 학술대회지
• /
• pp.206-214
• /
• 1993

Ginseng saponins have been known as main active principles and analyzed as the index components in ginseng and its products for quality control. But it is generally difficult to analyze the saponins in crude drug preparations. Saponins, Prosapogenins and sapogenins of crude drug preparation were identified by TLC and determined quantitatively by HPLC. $Prosapogemins-Rg_3\;-Rg_2\;and\;{\Delta}^{20}-prosapogenin$ were extracted with ethyl acetate from $50\%$ acetic acid hydrolyzates of saponin fractions and identified by TLC with lower phase of $CHCl_3/MeOH/H_2$ O\65:35:10. v/v)on silica gel plate, and quantified by HPLC on $Lichrosorb-NH_2$ column with $CH_3CN/H_2O(90:10,\;v/v).$ Sapogenins. panaxadiol and panaxatriol. were extracted with ethyl ether from $7\%-sulfuric$ acid hydrolyzates of saponin fractions and identified by TLC with chloroform/acetone(1 : 1 v/v) on silica gel plate. and quantified by HPLC on u - Bondapak $C^{18}$ column with $CH_3CN/MeOH/CHCl_3(83:10:7.\;v/v).$ These analyses of prosapogenins and sapogenins are more useful for quality control than those of saponins in crude drug preparations such as So - Shi - Ho - Tang(소시호탕), Sa - Kun - Ja - Tang(사군자탕), Yook - Kun - Ja - Tang(육군자탕), and In - Sam -Tang(인삼탕)

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제7권3호
• /
• pp.180-188
• /
• 1997

Bacillus subtilis C9 was selected by measuring the oil film-collapsing activity and produced biosurfactant in a medium containing glucose as a sole carbon source. The biosurfactant emulsified hydrocarbons, vegetable oils and crude oil, and lowered the surface tension of culture broth to 28 dyne/cm. A biosurfactant, C9-BS produced by B. subtilis C9 was purified by ultrafiltration, extraction with chloroform and methanol, adsorption chromatography, and preparative reversed phase HPLC. Structural analyses, IR spectroscopy, FAB mass spectroscopy, amino acid composition, and NMR analyses, demonstrated that C9-BS was a lipopeptide comprising a fatty acid tail and peptide moiety. The lipophilic part consisting of $C_{14}\;or\;C_{15}$ hydroxy fatty acid was linked to the hydrophilic peptide part, which contained seven amino acids (Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu) with a lactone linkage.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제19권3호
• /
• pp.286-290
• /
• 2009

In the course of screening for substances inhibiting apoptosis of U937 human leukemia cells induced by etoposide ($10\;{\mu}g/ml$), Forsythiae fructus, which showed a high level of inhibition, was selected. The regulating compounds were purified from the ethyl acetate extract by silica gel column chromatography and HPLC. The active substance was purified and identified as rengyolone by spectroscopic methods. This compound showed inhibitory activity on caspase-3 induction, a major protease of the apoptosis cascade, with an $IC_{50}$ value of $38.96\;{\mu}M$ after 8 h of etoposide treatment in U937 cells. The expression level of caspase-3 and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) were dose-dependently inhibited by the compound, suggesting that rengyolone inhibits etoposide-induced apoptosis via downregulation of caspases.

• 약학회지
• /
• 제24권2호
• /
• pp.117-122
• /
• 1980

A new application of high pressure liquid chromatography for the determination of fenitrothion and cis- and trans-neopynamin in insecticidal preparations was investigated. Optimum conditions for a good separation and determination were determined; solvent system: dichloromethane + n-hexane = 17 + 83; Bow rate: 0.5ml/min; column: u-porasil ($4mm{\times}3Ocm$); absorbance wavelength: 254nm; 0.05 AUFS and sample size: 30 ul. Recovery of fenicrothion, cis- and trans-neopynamin from mixed artificial preparations was 99.6%, 99.7% and 99.8% respectively. Also reproducibility tests showed that the coefficient of variation was 0.89% for fenitrothion, 0.74% cis-neopynamin and 1.1% for trans-neopynamin. There was no interference with insecticidal preparation containing DDVP, allethrin, S-421 and kerosene. HPLC method was rapid, accurate and it gave better reproducibility and higher sensitivity than any other analytical method. It was considered that HPLC could be greatly applied to the analysis of fenitrothion and neopynamin in insecticidal preparations.

• 대한약학회:학술대회논문집
• /
• 대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
• /
• pp.217.1-217.1
• /
• 2003

Phytoestrogen has been used as supplement in order to treat osteoporosis. The representative phytoestrogen, isoflavones, are daidzein, genistein and formononetin which were present highly in legumes. We have studied the quantitative analysis of isoflavones in KUNBO by HPLC. KUNBO, a mixed herbal extract including Astragali Radix and Rhynchosiae nulubilis Semen (Leguminosae), etc., is a nutraceutical candidate for type I osteoporosis. olumn used in HPLC was LUNA 5${\mu}$ C18 (250 ${\times}$4.6mm) (Phenmenex Co.m Torroance, CA, U.S.A.). (omitted)

• 생명과학회지
• /
• 제34권1호
• /
• pp.59-67
• /
• 2024

산딸기, 치자, 유백피의 혼합물인 복합 천연물 LS-RUG-com이 위염, 위궤양, 식도성 역류염 및 Helicobacter를 억제함을 확인한 바, LS-RUG-com을 건강기능식품 개별인정형 소재로 개발하고자 하였다. 본 연구에서는 소재 개발을 위한 LS-RUG-com 분석방법을 확립하고자 하였으며, 산딸기, 치자 및 유백피의 지표물질을 HPLC/UV system을 이용하여 분석방법을 최적화하였다. 본 연구에서는 분석법 validation을 입증하기 위하여 특이성(specificity), 정확성(accuracy), 정밀성(precision), 검출한계 및 정량한계(detection & quantitation limit) 및 직선성(linearity)을 평가하였으며, 그 결과 본 연구의 HPLC/UV 동시 분석법이 산딸기, 치자 분석에 적합하며, 신뢰성이 있음을 증명하였다. 또한 유백피의 HPLC/UV 단독 분석법이 적합하며 신뢰성이 있음을 증명하였다.