Mahesh Adhikari;Hyun Seung Kim;Hyun Seung Kim;Ki Young Kim;In Kyu Lee;Eun Jeong Byeon;Ji Min Woo;Hyang Burm Lee;Youn Su Lee
한국균학회지
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제50권3호
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pp.205-215
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2022
Penicillium pimiteouiense was discovered in South Korea during an investigation of fungal communities in soil collected from the Gyeongsangbuk-do province. In this study, we performed molecular analysis of this fungal isolate using internal transcribed spacer rDNA, β-tubulin, and Calmodulin gene sequences. We also performed morphological analysis using five agar media, potato dextrose, oatmeal, malt extract, czapek yeast extract, and yeast extract sucrose. In this study, the molecular and morphological analyses of P. pimiteouiense with detailed descriptions and figures has been carried out.
인간 제대혈 세포는 조혈모세포, 중간엽 줄기세포와내피전구세포를 풍부하게 포함하고 있다. 인간 제대혈 속의 중간엽 줄기세포는 조혈모세포와는 달리 다능성 줄기세포이며 신경세포로 분화할 수 있는 잠재성을 가지고 있다. 본 연구에서는 세포배양을 통해 제대혈의 중간엽 줄기세포를 신경세포와 콜린성 신경세포로 분화를 유도하였다. 중간엽 줄기세포를 신경세포로 분화시키기 위해 배양액에 dimethyl sulphoxide(DMSO)와 butylated hydroxyanisole(BHA)를 첨가하여 유도하였으며 basic fibroblast growth factor(bFGF), retinoic acid(RA), sonic hedgehog(Shh)를 처리하여 콜린성 신경세포로 분화시켰다. DMSO와 BHA에 처리된 중간엽 줄기세포가 빠르게 신경세포 모양으로 분화하는 것을 관찰하였으며, 이것은 면역조직학적 염색에서 신경세포 특이 표지인 $\beta$-tubulin III, 별아교세포에 대한 특이 표지인 GFAP, 희돌기아교세포에 대한 특이 표지인 Gal-C에 대해 양성반응을 나타내었고, 그 비율은 각각 $32.3{\pm}2.9%$, $11.0{\pm}0.9%,\;9.4{\pm}1.0%$였다. RT-PCR 분석에서 배양 단계에 따라 신경세포에 특이적인 표지 인자가 발현됨을 통해, 중간엽 줄기세포가 신경세포로 분화됨을 확인하였다. 또한, 중간엽 줄기세포에 bFGF, RA, Shh를 처리하여 콜린성 신경세포로 분화시켰을 때, 전체 중간엽 세포 중 $31.3{\pm}3.2%$가 신경세포 특이 표지인 $\beta$-tubulin III에 양성반응을 보였으며 이들 세포 중 $70.0{\pm}7.8%$가 콜린성 신경 특이 표지인 ChAT에 양성반응을 보였고, 이것은 Woodbury 방법에 의한 신경분화의 경우보다 3배 가량 높은 비율로 콜린성 신경의 분화를 유도한 것이다. 이러한 실험 결과들은 인간 제대혈의 중간엽 줄기세포가 콜린성 신경세포로 분화가 가능하고 이러한 잠재성을 가진 제대혈 중간엽 줄기세포는 퇴행성 신경질환에 대한 세포 치료제로서 가능성을 제시한다.
목적 : 마우스 대뇌조직에 방사선이 조사되었을 경우 아포토시스와 세포주기의 조절작용에 어떤 영향을 미치는 지를 연구하고자 하였다. 대상 및 방법 : 8주간 성숙된 C57B1/6J 마우스의 전뇌에 코발트 방사선조사기로 25 Gy의 방사선을 단일 조사하였다. 방사선조사후 1, 2, 4, 8, 24시간 간격으로 마우스를 경추 탈구사시킨 후 뇌조직을 채취하였다. 채취한 뇌조직을 TUNEL 분석법에 의하며 아포토시스 유도 수준을 평가하였으며 Western blotting법을 이용하여 유전자 산물인 p53, Bcl-2, Bax 그리고 세포주기 조절인자인 cyclin Bl, Dl, E, cdk2, cdk4, $p34^{cdc2}$를 분석하였다. 세포주기의 변화는 유세포분석법에 의하여 분석되었다. 결과 : 아포토시스는 방사선조사후 8시간에서 최고치를 보였고 아포토시스 지수는 $24.0{\pm}0.25$ (p<0.05)였다. 세포주기에서 조절인자의 변화는 cyclin D1를 제외하고는 특이하지 않았다. 결론 : 마우스의 전뇌에 방사선을 조사한 결과 아포토시스는 대뇌의 상의하(subependyma)에서 주로 일어났으며 세포주기의 조절인자에는 영향을 미치지 않는 것으로 판명되었다.
The p53 gene is inactivated by the human papillomavirus (HPV) E6 protein in the majority of cervical cancers. Treatment of HeLa S3 cells with siRNA for HPV E6 permitted adenovirus-mediated transduction of a p53 gene linked to an upstream estrogen response element (ERE). Our previous study in non-siRNA treated HHUA cells, which are derived from an endometrial cancer and express estrogen receptor ${\beta}$, showed enhancing effects of an upstream ERE on adenovirus-mediated p53 gene transduction. In HeLa S3 cells treated with siRNA for HPV E6, adenovirus-mediated transduction was enhanced by an upstream ERE linked to a p53 gene carrying a proline variant at codon 72, but not for a p53 gene with arginine variant at codon 72. Expression levels of p53 mRNA and Coxsackie/adenovirus receptor (CAR) mRNA after adenovirus-mediated transfer of an ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) were higher compared with those after non-ERE-linked p53 gene transfer in siRNA-treated HeLa S3 cells. Western blot analysis showed lower ${\beta}$-tubulin levels and comparatively higher p53/${\beta}$-tubulin or CAR/${\beta}$-tubulin ratios in siRNA-treated HeLa S3 cells after adenovirus-mediated ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) transfer compared with those in non-siRNA-treated cells. Apoptosis, as measured by annexin V binding, was higher after adenovirus-mediated ERE-linked p53 gene (proline variant at codon 72) transfer compared with that after non-ERE-linked p53 gene transfer in siRNA-treated cells.
One of the most extensively studied populations of multipotent adult stem cells are mesenchymal stem cells (MSCs). MSCs derived from the human umbilical cord vein (HUC-MSCs) are morphologically and immunophenotypically similar to MSCs isolated from bone marrow. HUC-MSCs are multipotent stem cells, differ from hematopoietic stem cells and can be differentiated into neural cells. Since neural tissue has limited intrinsic capacity of repair after injury, the identification of alternate sources of neural stem cells has broad clinical potential. We isolated mesenchymal-like stem cells from the human umbilical cord vein, and studied transdifferentiation-promoting conditions in neural cells. Dopaminergic neuronal differentiation of HUC-MSCs was also studied. Neural differentiation was induced by adding bFGF, EGF, dimethyl sulfoxide (DMSO) and butylated hydroxyanisole (BHA) in N2 medium and N2 supplement. The immunoreactive cells for $\beta$-tubulin III, a neuron-specific marker, GFAP, an astrocyte marker, or Gal-C, an oligodendrocyte marker, were found. HUC-MSCs treated with bFGF, SHH and FGF8 were differentiated into dopaminergic neurons that were immunopositive for tyrosine hydroxylase (TH) antibody. HUC-MSCs treated with DMSO and BHA rapidly showed the morphology of multipolar neurons. Both immunocytochemistry and RT-PCR analysis indicated that the expression of a number of neural markers including NeuroD1, $\beta$-tubulin III, GFAP and nestin was markedly elevated during this acute differentiation. While the stem cell markers such as SCF, C-kit, and Stat-3 were not expressed after neural differentiation, we confirmed the differentiation of dopaminergic neurons by TH/$\beta$-tubulin III positive cells. In conclusion, HUC-MSCs can be differentiated into dopaminergic neurons and these findings suggest that HUC-MSCs are alternative cell source of therapeutic treatment for neurodegenerative diseases.
Tryptophan 또는 serotonin을 계란에 투여하고 배양하였을 때의 초기 계배의 뇌형성에 미치는 영향을 관찰한 결과, 뇌의 신경세포는 핵막의 불규칙하고 핵응축현상이 심하며 염색질이 핵막에 응집되고 인도 분해되었으며 핵막이 팽출되어 생긴 수포가 형성되었다. 그리고 조면소포체와 골지체는 심하게 확장되어 있었고, 미토콘드리아는 팽윤화된 것이 많았으며 신경세관의 발달이 매우 미비하였다. 즉 이와 같은 현상은 특히 초기 1-2일간 배양 계배에서 극심하였다. Tryptophan 또는 serotonin을 투여한 후 18시간 배양한 배반엽의 간충 세포는 대조군에 비하여 세포질이 미숙하였고, 세포내 소기관이 크게 손상되어 있었으며 난황과립의 분해가 대조군에 비하여 지연되고 있음을 알 수 있었으며, 24-72시간 배양한 배반엽의 암대의 미세융모는 대조군에 비하여 현저하게 길이가 짧고 발달이 미비하였다. 또한 Tryptophan 또는 serotonin을 투여한 계배의 경우 배반엽의 크기, 투명대 및 배의 크기가 대조군에 비하여 작았으며, serotonin 처리군의 경우가 더욱 작았다. 또한 단백질 및 핵산 함량이 대조군에 비하여 훨씬 낮았고 tubulin 합성량도 크게 저하되었음이 확인되었다. 위와 같은 실험결과는 과량의 tryptophan 또는 serotonin이 난황과립 분해를 지연시켜 결과적으로 단백질 합성을 억제함으로서 tubulin합성이 저하되고, 이로 인하여 미세소관의 형성과 미세융모의 발달과 기능이 부진하여 형태형성에 이상을 초래하는 것으로 사료된다.
In 2016, grape fruits showing ripe rot symptom were found in fields of Korea. The fungus was isolated and identified as Colletotrichum viniferum based on morphological characteristics and nucleotide sequence data of the internal transcribed spacer, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and ${\beta}$-tubulin. To our knowledge, this is the first report of C. viniferum causing grape ripe rot disease of grape fruits in Korea.
Li, Weilan;Back, Chang-Gi;Lee, Seung-Yeol;Ten, Leonid N.;Jung, Hee-Young
한국균학회지
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제46권4호
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pp.369-374
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2018
The fungal strain KNU16-004 was isolated from a field soil sample collected in Seoul. The isolate was identified as Leptosphaerulina australis based on morphological characterization and phylogenetic analysis using the internal transcribed spacer (ITS), large subunit (LSU) rDNA regions, and ${\beta}-tubulin$ (Tub2). This is the first report of Leptosphaerulina australis in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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