• 대한한방내과학회지
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• 제26권2호
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• pp.320-332
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• 2005

Objectives: The aim of the experiment is to identify any anti-tumor effects of Duchesnea indica(Andr.) Focke on stomach, liver, urinary bladder, prostate and kidney cancer cells. Materials & Methods: For cancer cells, AGS stomach, Hep3B and Hep3G2 liver, HT-1197, HT-1376 urinary bladder, PC3 prostate, and A-704 kidney cancer cells, all obtained from Korean Ce 11 Line Bank, were used. The boiled extract of Duchesnea indica(Andr.) Focke (10 and 20 microliters) was injected into cultures, and the cultures were observed at 0, 6 and 12 hours, and from then on at 12 hours intervals up to 72 hours. The destruction of stomach, liver, urinary bladder, prostate and kidney cancer cells were measured through Trypan blue exclusion testing. The suppresion on viability of stomach, liver, urinary bladder, prostate and kidney cancer cells was measured via MTT assay. Anti-cancer mechanisms were assessed by analyzing the cell cycle. Results: In morphologic change, AGS, Hep3B, HepG2 showed the withdrawn and floating appearance that is typical in cellular impairment. The destruction of AGS, HT-1197, HT-1376, A-704, PC-3, Hep3B and HepG2 cancer cells in each test group was greater than that in the control group to a statistically significant degree. The suppression on viability of AGS, HT-1197 and Hep3G in each test group was greater than that in the control group to a statistically significant degree. Analysis of the cell cycle after injection of D... Focke showed inhibition of cell division in all test groups(AGS, Hep3B, HepG2, HT-1197, HT-1376, PC3, A-704). Conclusions: The results of this experiment suggest that Duchesnea indica(Andr.) Focke has statistically significant anti-tumor effects on stomach, urinary bladder, kidney, prostate and liver cancer, of which stomach and liver cancer are prominently significant. This in vitro experiment supports a role for Duchesnea indica(Andr.) Focke as a potential cancer treatment, but progressive research on Duchesnea indica(Andr.) Focke and its anti-tumor effects is needed to develop a practical application for it in cancer treatment.

• 대한한방종양학회지
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• 제9권1호
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• pp.15-37
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• 2003

Objective: We are aimed to identify anti-tumor effects of Curcuma longa L. on the stomach cancer cells through molecular biologic methods. Material & Methods: We used AGS as human stomach cancer cells obtained from American Type Culture Collection. The boiled extract of Curcuma longa L. $5{\mu}l$ (Sample I), $10{\mu}l$ (Sample II) was treated to cultural media(ml) for 0, 6, 12, 24, 48 hours. We measured the killing effect on stomach cancer cells through Trypan blue exclusion test and the suppressive effect on viability of stomach cancer cells via MTT assay. For identification of its anticancer mechanism, the revelation of Bcl-2, Bcl-XL, and Bax which are genes related to apoptosis using the quantitative RT-PCR, change of mitochondria membrane permeability and membrane potential via flow cytometry, the cycle of cell mitosis, caspase cleavage and annexin V staining were examined. Results: 1. showed significant killing effect on stomach cancer cell than the control group with a time(6 hours later) and density dependent manner, which was statistical significance. 2. Extract of Curcuma longa L. showed suppressive effect on viability of stomach cancer cells that each test groups had more suppressive effects on viability of stomach cancer cells than the control group with a time(6 hours later), which was statistical significance.(p<0.05) 3. In the test about the revelation of genes related to apoptosis, the revelation of Bcl-2 and Bcl-XL decreased with a density manner which was statistical significance. but the revelation of Bax was not changed with statistical significance. 4. Extract of Curcuma longa L. caused apoptosis by decreasing the absorbance of mitochondria with statistical significance, and also induced apoptosis by decreasing the membrane potential of mitochondria. 5. Extract of Curcuma longa L. destructed the cell cycle of cell mitosos. 6. Cell apoptosis was induced by extract of Curcuma longa L. certificated by method of caspase cleavage and annexin V staining. Conclusion: This experiment showed that Curcuma longa L. has anti-tumor effect with statistical significance. This is in vitro experiment and basic experiment on Curcuma longa L.. We hope more progressive research on Curcuma longa L. will go on and its anti-tumor effects will be more practically identified.

• 대한한방내과학회지
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• 제27권2호
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• pp.429-443
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• 2006

Objectives : The Purpose of this study was to identify anti-tumor effects of Curcuma longa L. on some kinds of cancer cells through molecular biologic methods. Materials & Methods : We used 4 kinds of cancer cell lines such as glioma cells(A172), cervical cancer cells(HeLa), Prostate cancer cells(PC3), lung cancer cells(A549). We injected the boiled extract of Curcuma longa L. $5{\mu}g,\;10{\mu}g$ to culture media(ml) for 24 hours. We measured the cytotoxic effect on 4 kinds of cancer cells through trypan blue exclusion test and the suppressive effect on viability of 4 kinds of cancer cells via MTT assay. We measured the change of mitochondria membrane potential via flow cytometry. The quantitative RT-PCR was used to examine the effect on the revelation of Bcl-2 and Bax which genes are related to apoptosis. We examined the effect on the revelation of Bcl-2 protein and Bax protein by western blot analysis. Results: 1. Extract of Curcuma longa L. showed significant cytotoxic effect on A172, HeLa, PC3 compared to the control group with density dependent manner. 2. Extract of Curcuma longs L. showed significant suppressive effect on viability of A172, HeLa, PC3 compared to the control group with density dependent manner. 3. Curcuma longs L. induced apoptosis by decreasing the membrane potential of mitochondria in A172, HeLa, PC3. 4. In the test about the revelation of genes related to apoptosis, the revelation of Bcl-2 decreased and the revelation of Bax increased in A172. HeLa, PC3 treated with Curcuma longa L. with density dependent manner. 5. In the test about the revelation of protein related to apoptosis, the protein levels of Bcl-2 decreased and the protein levels of Bax increased in A172, HeLa, PC3 treated with Curcuma longa L. Conclusions: This experiment shewed that Curcuma longs L. has anti-tumor effect on glioma, cervical, Prostate cancer cells except on lung cancer. We hope that anti-tumor effects of Curcuma longa L. will be more Practically identified.

• 대한약침학회지
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• 제20권2호
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• pp.127-131
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• 2017

Objectives: Polymorphonuclear neutrophils (PMNs) constitute the first line of defense against invading microbial pathogens. Early events in inflammation involve the recruitment of neutrophils to the site of injury or damage where changes in intracellular calcium can cause the activation of pro-inflammatory mediators from neutrophils including superoxide generation, degranulation and release of myeloperoxidase (MPO), productions of interleukin (IL)-8 and tumor necrosis factor ${\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), and adhesion to the vascular endothelium. To address the anti-inflammatory role of flavonoids, in the present study, we investigated the effects of the flavonoids quercetin and vitexin on the stimulus-induced nitric oxide (NO), $TNF-{\alpha}$, and MPO productions in human neutrophils. Methods: Human peripheral blood neutrophils were isolated, and their viabilities were determined by using the Trypan Blue exclusion test. The polymorphonuclear leukocyte (PMNL) preparations contained more than 98% neutrophils as determined by morphological examination with Giemsa staining. The viabilities of cultured neutrophils with various concentrations of quercetin and vitexin ($1-100{\mu}M$) were studied using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assays. Neutrophils were cultured in complete Roswell Park Memorial Institute (RPMI) medium, pre-incubated with or without quercetin and vitexin ($25{\mu}M$) for 45 min, and stimulated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) ($10^{-7}M$). NO production was carried out through nitrite determination by using the Griess method. Also, the $TNF-{\alpha}$ and the MPO productions were measured using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits and MPO assay kits. Results: Neutrophil viability was not affected up to a concentration of $100{\mu}M$ of quercetin or vitexin. Both quercetin and vitexin significantly inhibited $TNF-{\alpha}$, NO, and MPO productions in human neutrophils (P < 0.001). Conclusion:The present study showed that both quercetin and vitexin had significant anti-inflammatory effects. Thus, treatment with either quercetin or vitexin may be considered as a therapeutic strategy for treating patients with neutrophil-mediated inflammatory diseases.

• Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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• 제31권6호
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• pp.461-467
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• 2005

Background. 5-(and-6)-carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate, succinimidyl ester mixed (CFSE) is the fluorescent labelling agent of living cells and used to trace the cells in vivo after transplatnation of various cells. The CFSE labelled cells can maintain fluorescence for up to 7 days after labelling. The MC3T3-E1 cell line (MC3T3) has been used for many studies about osteoblast, which is well known as a mouse preosteoblast. So the CFSE would be used to trace the transplanted MC3T3. However there are few reports about CFSE labelling of MC3T3. This study is aimed to know about adequate concenturation and incubation time of CFSE to MC3T3. Materials and methods. The MC3T3 was incubated in a humidified atmosphere of 95% air with 5% $CO_2$ at $37^{\circ}C$ using ${\alpha}$-minimal essential medium (${alpha}$-MEM) containing10% FBS and gentamycin. Ten mM CFSE solution in dimethylsulphoxide (DMSO: 1%) was diluted with phosphate buffered saline (PBS) and final concentration of culture medium was, respectively, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 ${{\mu}M$. Then the MC3T3 was incubated with CFSE in a humidified atmosphere of 95% air with 5% $CO_2$ at $37^{\circ}C$ for 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 and 45 minutes in each concentration. The fluorescence of CFSE labelled cells was analysed with a inverted fluorescence microscope. The duration of cell labelling was also studied. Trypan blue dye exclusion test was done for cell viability. Results. For concentration between 5 and 10 ${\mu}M$, CFSE did not significantly label the MC3T3 in vitro. The destruction of MC3T3 was observed at the concentration of 20 ${\mu}M$. In the concentration of 15 ${\mu}M$, the best labelling was obtained at an incubation period between 15 and 30 minutes. The MC3T3 labelled with an incubation period of 15 minutes at 15 ${\mu}M$ was still fluorescent 7 days after CFSE labelling. The mean cell viability was 95.93%. Conclusion. These results suggests an incubation period of 15 minutes at 15 ${\mu}M$ of CFSE provides best labelling of MC3T3 in vitro.

• 대한한방종양학회지
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• 제4권1호
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• pp.37-53
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• 1998

과학기술(科學技術)의 발전(發展)에 따른 생활(生活) 및 의료(醫療) 수준의 향상(向上)에도 불구하고 산업발전(産業發展)에 따른 환경오염(環境汚染), 스트레스 증가(增加) 등 그 역기능(逆機能) 때문에 발암물질(發癌物質) 또는 자극(刺戟)에의 노출(露出) 등으로 인해서 전세계적(全世界的)으로 암(癌)으로 인(因)한 사망율(死亡率)이 증가(增加)되고 있다. 암(癌)은 현재(現在) 인류(人類)의 건강(健康)을 위협하는 주요(主要)한 질환(疾患)의 하나로, 오늘날 우리 나라에서 질환(疾患)으로 인(因)한 사망원인중(死亡原因中) 수위(首位)를 차지하고 있다. 이러한 암(癌)의 발생(發生)은 80%-90%가 환경적(環境的) 인자(因子)에 기인(起因)한다고 보고(報告)되고 있는데 앞으로 환경성(環境性) 발암물질(發癌物質)이 점차 증가(增加)됨에 따라 암환자(癌患者)의 발생(發生)도 더욱 증가(增加)될 것으로 예상(豫想)된다. 암(癌)의 서의학적(西醫學的) 치료(治療)는 주로 수술요법(手術療法), 방사선요법(放射線療法), 화학요법(化學療法) 및 면역요법(免疫療法) 등이 활용(活用)되고 있다. 이중 수술요법(手術療法)과 방사선요법(放射線療法)은 암(癌)이 전신(全身)에 전이(轉移) 증식(增殖)되기 전에 실시(實施)함으로써 효과(效果)를 거둘 수는 있으나, 암(癌)이 원발병소(原發病巢) 이외(以外)에까지 전이(轉移) 증식(增殖)되었을 경우에는 이 두가지 방법(方法)의 국소요법(局所療法)만으로서는 좋은 치료효과(治療效果)를 거두기 어렵다. 따라서 최근 항암제(抗癌劑)에 의한 화학요법(化學療法)이 다른 방법(方法)보다 유효(有效)하다고 인정(認定)이 되어 가장 많이 활용(活用)되고 있으나, 암종(癌種)에 대한 감수성차이(感受性差異), 치료후(治療後)의 부작용(副作用), 재발(再發) 및 합병증(合倂症) 등의 문제점(問題點)때문에 부작용(副作用)을 감소(減少)시키면서 항암효과(抗癌效果)를 높이는 치료법(治療法)이 계속 연구(硏究)되고 있다. 이에 1972년(年) 미국(美國) 국립암연구소(國立癌硏究所)에서 실시(實施)한 항암제(抗癌劑) 개발연구(開發硏究)에 있어서 항종양성(抗腫瘍性) Screening test에 이용(利用)된 물질중(物質中) 약 47%가 천연물질(天然物質)이었다는 사실은 주목(注目)할만 하다. 한의학적(韓醫學的) 치료법(治療法)은 최근(最近)에 변증시치(辨證施治)를 근간(根幹)으로 하여 건비익기(健脾益氣)를 위주(爲主)로한 부정거사법(扶正祛邪法)과 부정배본법(扶正培本法)이 많이 활용(活用)되고 있으며 부정법(扶正法)으로는 익기건비(益氣健脾), 자음보혈(滋陰補血), 온보비신(溫補裨腎) 등이, 거사법(祛邪法)으로는 활혈거어법(活血祛瘀法), 청열해독법(淸熱解毒法), 연견화담법(軟堅化痰法) 등이 활용(活用)되고 있는데, 이를 근거(根據)로 하여 한약(韓藥)의 복방(複方).단미(單味).단미추출물(單味抽出物) 등의 투여(投與)와 침(鍼) 구(灸) 수침(水鍼) 전침(電鍼) laser침(鍼)등의 치료방법(治療方法)을 수술(手術) 후(後) 혹(或)은 화학요법(化學療法)이나 방사선요법(放射線療法)와 병행(幷行)하여 치료효과(治療效果)가 향상(向上)되었다고 보고(報告)하고 있다. 항암제(抗癌劑)의 항암효과(抗癌效果) 정도(程度)를 검사(檢査)하는 방법(方法)은 크게 5가지로 분류(分類)되는데, 하나는 세포(細胞)를 약제(藥劑)에 노출(露出)시킨 후 현미경(顯微鏡)을 통하여 나타난 형태학적(形態學的) 변화(變化)를 가지고 약제(藥劑)의 효과정도(效果程度)를 결정(決定)하는 방법(方法)이고, 둘째는 Dye exclusion assay방법(方法)으로 살아있는 세포(細胞)가 trypan blue, eosin, nigrosin과 같은 염색액(染色液)에 염색(染色)되지 않는 점을 이용(利用)한 것이며, 세번째는 항암제(抗癌劑)의 항암효과(抗癌效果)를 알아보는 지표(指標)로 사용(使用)되는 Crrelease assay가 있으나, 세가지 방법(方法) 모두 현재(現在) 사용(使用)되고 있지 않다. 넷째로는 세포(細胞) 대사(代謝)의 방해정도(妨害程度)를 측정(測定)하거나 세포내(細胞內) 방사성(放射性) 동위원소(同位元素)의 유입방해(流入妨害) 정도(程度)를 측정(測定)하는 방법(方法)이 있고, 다섯째로는 본(本) 실험(實驗)에서 사용(使用)한 방법(方法)으로 stem cell assay라고도 하는 clonogenetic assay가 있는데, 이는 세포(細胞)를 약제(藥劑)에 노출(露出) 시킨 후 soft agar에 single cell suspension으로 배양(培養)하여 그 세포(細胞)의 분열(分裂).증식능력(增殖能力)을 측정(測定)하는 방법(方法)이다. 이 방법(方法)은 특히 성장(成長) 특성(特性)이 다른 종양세포(腫瘍細胞)의 경우 개개(個個) 세포(細胞)에 대한 약제효과(藥劑效果)를 반영(反映)할 수 있어서 종양세포(腫瘍細胞)의 이질성(異質性)에 따른 차이점(差異點)을 보정(補整)할 수 있는 방법(方法)이며, 1971년(年) Park 등이 마우스 골수종(骨髓腫) 세포(細胞)에 대한 stem cell assay를 시행(施行)해 본 결과(結果) in vivo에서의 결과(結果)와 잘 일치(一致)하여 그 이후로는 종양세포(腫瘍細胞)에 대한 항암제(抗癌劑)의 약제(藥劑) 감수성검사(感受性檢査)에 많이 사용(使用)되고 있다. 진령탕가감방은 담습응결(痰濕凝結)을 치료(治療)하는 효능(效能)을 가진 처방(處方)으로 거담작용(祛痰作用)을 가진 반하(半夏), 패모(貝母), 거습작용(祛濕作用)을 가진 의이인(薏苡仁), 백복령, 이기(理氣) 하기작용(下氣作用)을 가진 진피(陳皮), 대자석, 정향(丁香), 비파엽(枇杷葉), 항암작용(抗癌作用)을 가진 용규(龍葵), 반지련(半枝蓮), 모려(牡蠣), 하고초(夏枯草), 저령 등(等)의 약물(藥物)로 구성되어 있다. 근래(近來) 단일약물(單一藥物)의 항암효과(抗癌效果)에 대한 실험적(實驗的) 연구(硏究)로는 금(金) 등에 의한 인삼(人蔘), 녹용(鹿茸)의 항체생산(抗體生産) 억제(抑制) 완화효과(緩和效果) 및 임(任)에 의한 어성초(魚腥草), 녹혈(鹿血), 저령, 천산갑(穿山甲) 등이 정상(正常) 면역세포(免役細胞)에는 거의 독작용(毒作用)을 일으키지 않으면서 강력(强力)한 항암효과(抗癌效果)가 있다는 보고(報告), 금(金) 등에 의한 자완, 동풍채(東風菜), 영지(靈芝), 선학초(仙鶴草), 파두(巴豆) 등이 항암작용(抗癌作用) 및 면역반응(免疫反應)에 효과(效果)를 미친다는 보고(報告) 등이 있고, 복합제제(複合製劑) 약물(藥物)의 항암효과(抗癌效果)에 대한 연구(硏究)로는 강(姜) 등에 의한 식분환(息賁丸), 비기환(肥氣丸) 및 비기환이 백혈병(白血病)과 임파종환자(淋巴腫患者)에서 추출(抽出)한 암세포(癌細胞)에 항암효과(抗癌效果)가 있다는 보고(報告) 및 금(金) 등에 의한 복량환(伏梁丸), 비기환 및 소적정원산(消積正元散)이 각종(各種) 암세포주(癌細胞柱)이 성장저애(成長沮碍) 효과(效果), 윤(尹) 등에 의한 육군자탕(六君子湯), 소시호탕(小柴胡湯), 사묘탕(四妙湯), 대시호탕(大柴胡湯), 방독탕(防毒湯), 반하백출천마탕(半夏白朮天麻湯), 파두(巴豆)를 가미(加味)한 사군자탕(四君子湯) 및 사물탕(四物湯) 등이 항암작용(抗癌作用) 및 면역반응(免疫反應)에 효과(效果)를 보인다는 보고(報告) 등이 있었으나, 아직까지 진령탕가감방의 항암효과(抗癌效果)에 대한 실험연구(實驗硏究)는 없었다. 이에 저자(著者)는 항암효과(抗癌效果)가 있을 것으로 추정(推定)되는 진령탕가감방의 항종양효과(抗種瘍效果)를 알아보기 위하여, 수용성(水溶性) 추출액(抽出液)을 얻은 후 현대(現代) 병리학적(病理學的)으로 다용(多用)하는 colony형성억제실험(形成抑制實驗), SRB assay에 의한 항종양효과(抗種瘍效果), 생명연장율(生命延長率), 화학적(化學的)인 방법(方法)과 암종세포(癌腫細胞) 이식(移植)에 의한 종양(腫瘍) 유발(誘發)을 통하여 암(癌) 발생(發生) 및 그 경과(經過)에 미치는 영향(影響) 및 NK세포활성(細胞活性)에 미치는 영향(影響) 등을 관찰(觀察)하였다. 본(本) 실험(實驗)에서는 진령탕가감방의 종양세포(腫瘍細胞)에 대한 증식억제작용(增殖抑制作用)을 관찰(觀察)하고자 in vitro test인 colony형성억제실험(形成抑制實驗)과 SRB assay를 이용(利用)하였는데, 진령탕가감방의 추출액(抽出液)이 종양세포(腫瘍細胞)의 성장(成長)을 억제(抑制)하는 효과(效果)가 농도의존적(濃度依存的)으로 증가(增加)하는 결과(結果)를 보여 항종양(抗腫瘍)의 효과(效果)가 있음을 나타냈고(Table 3, 4), in vivo assay로서 sarcoma 180 복수암세포를 이식(移植)한 마우스의 평균생존일수(平均生存日數)를 관찰(觀察)하여 NCI protocol에 의하여 검정(檢定)한 결과(結果), 진령탕가감방 추출액(抽出液)을 투여(投與)한 마우스의 평균생존기간(平均生存期間) 및 생명연장율(生命延長率)이 뚜렷하게 증가(增加)되었다(Table 5). 또한 진령탕가감방 추출액(抽出液)을 마우스에 투여(投與)하면 MCA로 유도(誘導)한 종양(腫瘍) 및 3LL 세포(細胞) 이식(移植)에 의한 종양(腫瘍)의 발생율(發生率) 및 발생(發生)된 종양(腫瘍)의 크기가 현저히 감소(減少)되었다(Table 6, 7). 이러한 효과(效果)는 진령탕가감방이 감수성(感受性) 암종세포(癌腫細胞)에 직접적으로 영향(影響)을 미쳐 그 증식(增殖)이 억제(抑制)되었을 가능성(可能性)을 생각할 수 있다. 그렇지만 본(本) 연구(硏究)에서는 암종특이성(癌腫特異性)에 관한 결론(結論)을 내릴 수는 없으므로 암종특이성(癌腫特異性)에 관한 연구(硏究)는 진행(進行)해야 할 것으로 생각된다. 또 다른 가능(可能)한 진령탕가감방 추출액(抽出液)의 항종양(抗腫瘍) 작용기전(作用機轉)은 진령탕가감방 추출액(抽出液)이 NK세포(細胞)의 활성(活性)을 항진(亢進)시킨 실험결과(實驗結果)로 유추(類推)하여, 진령탕가감방 추출액(抽出液)이 종양(腫瘍)마우스에 비특이적(非特異的)인 면역활성(免疫活性)을 촉진(促進)시킴으로써 진령탕가감방 추출액(抽出液)의 항종양작용(抗腫瘍作用)이 발현될 가능성(可能性)도 생각할 수 있다. 따라서 앞으로 여러 암종세포(癌腫細胞)에 대한 진령탕가감방 추출액(抽出液)의 항종양작용(抗腫瘍作用)과 종양동물(腫瘍動物)에서의 진령탕가감방 추출액(抽出液) 투여(投與)에 의한 생체생리현상(生體生理現象)의 변화(變化), 생리활성물질(生理活性物質)의 본능(本能) 등을 밝히기 위한 보다 구체적(具體的)이고 광범위(廣範圍)한 연구(硏究)가 수행(隨行)되어져야 되리라고 사료(思料)된다. 세포성(細胞性) 면역반응중(免疫反應中) 중요(重要)한 역할(役割)을 하는 작동세포중 NK세포(細胞)는 여러 종양(腫瘍)에 대해 자연살해능(自然殺害能)을 보여 소위 T비의존성(非依存性) 면역감시기전(免疫監視機轉)에 관하여는 바이러스 및 세균(細菌)에 감염(感染)된 세포(細胞)를 파괴(破壞)하는 활성(活性)을 가지며, IL-2 및 Interferon 등에 의하여 활성(活性)이 증가(增加)된다. NK세포(細胞)가 표적세포를 파괴(破壞)하는 기전(機轉)에 관해서는 아직 확실히 알려져 있지 않으나, 첫째로 표적세포를 인식(認識)하는 시기(時期), 둘째로 융해기전(融解機轉)을 활성화(活性化)시키는 시기(時期), 셋째로 NK lymphotoxin이 유리(遊離)되는 시기(時期), 넷째로 표적세포의 사멸기(死滅期)로 나눌 수 있다. 본(本) 실험(實驗)에서 진령탕가감방 추출액(抽出液)으로 전처리(前處理)시 NK세포(細胞)의 표적세포와의 결합능(結合能)은 물론 결합(結合)된 표적세포의 융해능(融解能)이 촉진(促進)된 결과(結果)를 보이는데(Table 8), 이와 같은 결과(結果)는 진령탕가감방 추출액(抽出液)이 NK세포(細胞)의 표적세포 파괴 4단계 전체를 항진(亢進)시킨 결과(結果)로 인정(認定)된다. 이상에서 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 진령탕가감방 추출액(抽出液)을 폐암세포주인 A549와 간암세포주인 hep3B 및 신장암 유래의 종양세포주인 Caki-1 cell에 투여(投與)한 결과, in vitro test인 colony형성억제실험(形成抑制實驗)과 SRB assay에서 모두 농도의존적(濃度依存的)으로 암세포주 성장(成長)을 억제(抑制)하였다. 2. Strcoma 180세포(細胞)를 마우스에 이식(移植)하여 평균생존기간(平均生存期間) 및 생명연장율(生命延長率)을 측정(測定)하는 in vivo test에서는 진령탕가감방 추출액(抽出液)이 마우스의 평균생존기간(平均生存期間) 및 생명연장율(生命延長率)을 증가(增加)시키는 결과(結果)를 보였다. 3. 진령탕가감방 추출액(抽出液)은 MCA로 유도(誘導)한 종양(腫瘍)의 발생율(發生率) 및 발생종양(發生腫瘍)의 크기를 현저히 감소(減少)시켰으며, 3LL세포(細胞) 이식(移植)에 의한 종양발생(腫瘍發生) 또한 현저히 감소(減少)시켰다. 4. 진령탕가감방 추출액(抽出液)은 NK세포(細胞)의 활성도(活性度)를 증가(增加)시켰다. 특히 $10{\mu}g/ml$ 농도 에서 NK세포(細胞) 활성도(活性度)가 가장 현저히 증가(增加)되었다. 이상(以上)의 결과(結果)로 보아 진령탕가감방은 암종세포(癌腫細胞)에 대한 직접적(直接的)인 성장억제(成長抑制) 및 세포(細胞)의 활성(活性)을 통한 면역증진(免疫增進)에 의해 다양(多樣)한 항종양효과(抗腫瘍效果)를 보인 것으로 사료(思料)된다.