Serum lipid (SL) is a commercially available cholesterol-rich, proteinaceous compound extracted from bovine serum. Here we investigated the adipogenic transdifferentiation potential of SL on bovine myogenic satellite cells. Exposure of satellite cells to SL could generate lipid droplets on day 2, and further exposure to SL increased cytoplasmic lipid accumulation giving adipocyte morphology. The expression analysis of PPAR gamma and GPDH adipocyte markers along with Oil-red-O staining results confirmed the transdifferentiation potential of SL. When cells were treated at different concentrations (5, 10, 20, $40{\mu}l$/ml) of SL, the results indicated that even levels as low as $5{\mu}l$ SL /ml could induce transdifferentiation, and maximum induction was obtained at $20{\mu}l$ SL/ml. After treatment with SL at different concentrations the expression levels of PPAR gamma varied significantly (p<0.05), whereas the expression of other adipogenic transcription factors showed no difference, indicating that SL acts through PPAR gamma. The combined effect of SL and troglitazone proved to be the best combination for induction of transdifferentiation compared to the individual effect of SL or troglitazone. Thus, overall results clearly show that SL induces transdifferentiation of bovine myogenic satellite cells to adipocytes.
Kim, Ji-Won;Sun, Cheng-Lin;Jeon, Sung-Yoon;You, Young-Hye;Shin, Ju-Young;Lee, Seung-Hwan;Cho, Jae-Hyoung;Park, Chung-Gyu;Yoon, Kun-Ho
BMB Reports
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제45권1호
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pp.51-56
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2012
The purpose of this study was to determine the effects of duration and timing of glucocorticoid treatment on the expansion and differentiation of porcine neonatal pancreas cell clusters (NPCCs) into ${\beta}$-cells. After transplantation of NPCCs, the ductal cyst area and ${\beta}$-cell mass in the grafts both showed positive and negative correlations with duration of dexamethasone (Dx) treatment. Pdx-1 and HNF-3${\beta}$ gene expression was significantly downregulated following Dx treatment, whereas PGC-1${\alpha}$ expression increased. Pancreatic duct cell apoptosis significantly increased following Dx treatment, whereas proliferation did not change. Altogether, transdifferentiation of porcine NPCCs into ${\beta}$-cells was influenced by the duration of Dx treatment, which might have been due to the suppression of key pancreatic transcription factors. PGC-1${\alpha}$ plays an important role in the expansion and transdifferentiation of porcine NPCCs, and the initial 2 weeks following transplantation of porcine NPCCs is a critical period in determining the final ${\beta}$-cell mass in grafts.
Embryonic stem cells have been a popular research topic in regenerative medicine owing to their pluripotency and applicability. However, due to the difficulty in harvesting them and their low yield efficiency, advanced cell reprogramming technology has been introduced as an alternative. Dental stem cells have entered the spotlight due to their regenerative potential and their ability to be obtained from biological waste generated after dental treatment. Cell reprogramming, a process of reverting mature somatic cells into stem cells, and transdifferentiation, a direct conversion between different cell types without induction of a pluripotent state, have helped overcome the shortcomings of stem cells and raised interest in their regenerative potential. Furthermore, the potential of these cells to return to their original cell types due to their epigenetic memory has reinforced the need to control the epigenetic background for successful management of cellular differentiation. Herein, we discuss all available sources of dental stem cells, the procedures used to obtain these cells, and their ability to differentiate into the desired cells. We also introduce the concepts of cell reprogramming and transdifferentiation in terms of genetics and epigenetics, including DNA methylation, histone modification, and non-coding RNA. Finally, we discuss a novel therapeutic avenue for using dental-derived cells as stem cells, and explain cell reprogramming and transdifferentiation, which are used in regenerative medicine and tissue engineering.
Despite the importance of cell fate decisions regulated by epigenetic programming, no experimental model has been available to study transdifferentiation from myoblasts to smooth muscle cells. In the present study, we show that myoblast cells can be induced to transdifferentiate into smooth muscle cells by modulating their epigenetic programming. The DNA methylation inhibitor, zubularine, induced the morphological transformation of C2C12 myoblasts into smooth muscle cells accompanied by de novo synthesis of smooth muscle markers such as smooth muscle ${\alpha}$-actin and transgelin. Furthermore, an increase of p21 and decrease of cyclinD1 mRNA were observed following zebularine treatment, pointing to inhibition of cell cycle progression. This system may provide a useful model for studying the early stages of smooth muscle cell differentiation.
Objective: Orchastric changes in the mammary glands are vital, especially during lactation. The secretary epithelial cells together with the supporting myoepithelial and stromal cells function cordially to secrete milk. Increase in the number of luminal epithelial cells and a decrease in adipocytes are visible during lactation, whereas the reverse happens in the involution. However, an early involution occurs if the epithelial cells transdifferentiate towards adipocytes during the lactation period. We aimed to inhibit the adipocyte transdifferentiation of luminal cells by restraining the peroxisomal proliferator-activated receptor γ (PPARγ) pathway. Methods: Linolenic acid (LA) and thiazolidinediones (TZDs) induced adipogenesis in mammary epithelial cells were conducted in monolayer, mixed culture as well as in transwell plate co-culture with mammary myoepithelial cells. Results: Co-culture with myoepithelial cells showed higher adipogenic gene expression in epithelial cells under LA+TZDs treatment. Increase in the expressions of PPARγ, CCAAT/enhancer-binding protein α and vimentin in both mRNA as well as protein levels were observed. Whereas, bisphenol A diglycidyl ether treatment blocked LA+TZDs induced adipogenesis, as it could not show a significant rise in adipose related markers. Although comparative results were found in both mixed culture and monolayer conditions, co-culture technic was found to work better than the others. Conclusion: Antagonizing PPARγ pathway in the presence of myoepithelial cells can significantly reduce the adipogenisis in epithelial cells, suggesting therapeutic inhibition of PPARγ can be considered to counter early involution or excessive adipogenesis in mammary epithelium in animals.
Background: In tumor cells, aberrant differentiation programs have been described. Several neuronal proteins have been found associated with morphological neuronal-glial changes in breast cancer (BCa). These neuronal proteins have been related to mechanisms that are involved in carcinogenesis; however, this regulation is not well understood. Microtubule-associated protein-tau (MAP-Tau) has been describing in BCa but not its variants. This finding could partly explain the neuronal-glial morphology of BCa cells. Our aim was to determine mRNA expression of MAP-tau variants 2, 4 and 6 in breast cancer cell lines. Materials and Methods: Cultured cell lines MCF-10A, MDA-MB-231, SKBR3 and T47D were observed under phase-contrast microscopy for neural morphology and analyzed for gene expression of MAP-Tau transcript variants 2, 4 and 6 by real-time PCR. Results: Regarding morphology like neural/glial cells, T47D line shown more cells with these features than MDA-MB-231 and SKBR. In another hand, we found much greater mRNA expression of MAP-Tau transcript variants 2, and to a lesser extent 4 and 6, in T47D cells than the other lines. In conclusion, regulation of MAP-Tau could bring about changes in cytoskeleton, cell morphology and motility; these findings cast further light on neuronal transdifferentiation in BCa.
본 연구는 한우유래 myoblast에서 지방세포분화 유도 전사인자들을 과발현시켜 지방세포로의 교차분화를 유도하기 위하여 실시하였다. 한우 유래 satellite cell을 배양한 후 adipogenic transcription factor인 $PPAR{\gamma}$, C/$EBP{\alpha}$, SREBP1c, KLF5등을 단독 또는 co-transfection을 실시하여 세포에 과발현을 유도하였다. 이들 세포들은 adipogenic differentiation medium에서 2일간 배양한 후growth medium에서 8일간 추가로 배양하였다. 지방세포로의 교차분화 유무는 Oil-red O염색과 지방세포 마커 유전자들의 발현으로 확인하였다. $PPAR{\gamma}$과 C/$EBP{\alpha}$를 각각 단독으로 과발현을 유도한 경우myoblast에서 지방세포로의 교차분화를 유도하기에는 충분하지 못하였다. 그러나 $PPAR{\gamma}$와 C/$EBP{\alpha}$을 co-transfection을 실시한 경우 지방세포로의 교차분화가 유도되었고, 세포내지방구형성, 지방세포 마커유전자의 발현, 근세포 마커유전자의 발현 감소 등이 확인되었다. KLF5 와 $PPAR{\gamma}$를 동시에 과발현할 경우 지방세포로의 교차분화를 볼 수 있었지만 KLF단독의 경우는 교차분화를 유도하지 못하였다. 할성형SREBP1c (tSREBP1c)의 경우, 단독으로 myoblast에 과발현을 처리한 경우만으로 지방세포로의 교차분화를 유도할 수 있었다. 이들 결과는 한우유래 satellite cell을 이용하여 지방세포분화 전사인자를 단독 혹은 조합하여 이들 세포에 과발현 시킬 경우 지방세포로의 교차분화를 유도할 수 있음을 보여 주었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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