Four root canal sealers, Apatite Root Sealer I and II composed mainly of hydroxyapatite/tricalciumphosphate, Sealapex containing calcium hydroxide, and Roth Sealer composed of zinc oxide - eugenol were compared on the culture of L929 fibroblasts. MIT (Methyl Thiazole Tetrazolium Bromide) colorimetric technique was used to measure the mitochondrial dehydrogenase activity. Results were as follows: 1. Hydroxyapatite/tricalcium phosphate mixed sealers were significantly less toxic compared with calcium hydroxide and zinc oxide - eugenol type sealers. High pH of the calcium hydroxide sealer and release of eugenol component from the zinc oxide - eugenol type sealer were presumed to be the cause of the toxicity of these two sealers. In no cases, there were more cytoblastic effects in hydroxyapatite/tricalcium phosphate mixed sealers compared to the control groups. 2. In all experimental groups, toxicity was decreased as dilutions were increased. However in zinc oxide-eugenol type sealer the cell activity was weakened for all dilution groups. 3. Regarding the effect of setting time, Apatite I and Sealapex were less toxic as the setting progressed. Apatite II kept constant regardless of the different time ellapsed after setting but Roth sealer revealed significantly higher toxicity for all experimental groups. 4. Comparing two different culture periods of 24 hours and 72 hours, Apatite I showed higher cell activities in longer period(72 hours) while Apatite II did not. Sealapex and Roth sealer, however, showed significantly lower cell activities in longer period.
Somatic cells such as oviduct epithelial cell, uterine epithelial cell, cumulus-granulosa cell and buffalo rat river cell has been used to establish an effective culture system for bovine embryos produced in in vitro. But nitric oxide (NO) metabolites secreted from somatic cells were largely arrested the development of bovine in vitro matured/ in vitro fertilized (IVM/IVF) embryos, suggesting that NO was induced the embryonic toxic substance into culture medium. The objective of this study was to investigate whether BOEC co-culture system can ameliorate the NO-mediated oxidative stress in the culture of bovine IVM/IVF embryos. Therefore, we evaluated the developmental rate of bovine IVM/IVF embryos under BOEC co-culture system in the presence or absence of sodium nitroprusside (SNP), as a NO donor, and also detected the expression of growth factor (TGF-$\beta$, EGF and IGFBP) and apoptosis (Caspase-3, Bax and Bcl-2) genes. The supplement of SNP over 5 uM was strongly inhibited blastocyst development of bovine IVM/IVF embryos than in control and 1 uM SNP group (Table 2). The developmental rates beyond morulae stages of bovine IVM/IVF embryos co-cultured with BOEC regardless of SNP supplement (40.4% in 5 uM SNP+ BOEC group and 65.1% in BOEC group) were significantly increased than those of control (35.0%) and SNP single treatment group (23.3%, p<0.05: Table 3). The transcripts of Bax and Caspase-3 genes were detected in all experiment groups (1:Isolated fresh cell (IFC), 2:Primary culture cell (PCC), 3:PCC after using the embryo culture, 4: PCC containing 5 uM SNP and 5: PCC containing 5 uM SNP after using the embryo culture), but Bcl-2 gene was not detected in IFC and PCC (Fig. 1). In the expression of growth factor genes, TGF-$\beta$ gene was found in all experimental groups, and EGF and IGFBP genes were not found in IFC and PCC (Fig. 2). These results indicate that BOEC co-culture system can increase the development beyond morula stages of bovine IVM/IVF embryos, possibly suggesting the alleviation of embryonic toxic substance like nitric oxide.
Nam, Ki Taek;Kim, Seok-Yun;Moon, Chang-Ho;Kim, Chang-Hoon;Oh, Seok Jin
Journal of the Korean Society of Marine Environment & Safety
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v.26
no.1
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pp.84-92
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2020
To supply a stable amount of standard material to detect paralytic shellfish toxin (PST), we examined possible increases in toxic content in Alexandrium catenella and A. pacificum using a light emitting diode (LED), which is one of the most eco-friendly and economical lighting method. When comparing the growth rates of organisms and wavelengths of light used, the half saturation constants (Ks) of red wavelength were higher than those of other wavelengths. In contrast, the Ks of blue wavelength were lower than those of other wavelengths. Moreover, when comparing the toxic contents and wavelengths of light used, red wavelength produced approximately 8 times more toxic content in A. catenella and approximately 3.2 times more toxic content in A. pacificum than other wavelengths. Thus, the toxic content present in the organism might be closely related to the Ks of light. The optimum light source to be used to ensure economically ef ective and productive growth in an Alexandrium culture system (photo-bioreactor) would likely consist of a two-phase culture, wherein a blue LED is used during the lag and exponential phases to increase growth rates, followed by the use of a red LED during late exponential and stationary phases to achieve increased PST yields.
BACKGROUND: The aim of this study was to isolate and identify algicidal bacterium that tends to kill the toxic dinoflagellate Alexandrium catenella, and to determine the algicidal activity. METHODS AND RESULTS: Among of four algicidal bacteria isolated in this study, NH-12 isolate was the strongest algicidal activity against A. catenella. NH-12 isolate was identified on the basis of biochemical characteristics and analysis of 16S rRNA gene sequences. The isolate showed 97.67% homology with Pseudoalteromonas prydzensis ACAM $620^T$ (U85855), and was designated Pseudoalteromonas sp. NH-12. The optimal culture conditions of this isolate were $25^{\circ}C$, initial pH 8.0, and 3.0% (w/v) NaCl concentration. The algicidal activity of NH-12 was significantly increased to maximum value in the late of logarithmic phase of bacterial culture. As a result of 'cell culture insert' experiment, NH-12 is assumed to produce secondary metabolites, as an indirect attacker. When 10% culture filtrate of NH-12 was applied to A. catenella, over 99% of algal cells were destroyed within 24 h. In addition, the killing effects were increased in dose and time dependent manners. CONCLUSION(S): Taken together, our results suggest that Pseudoalteromonas sp. NH-12 could be a candidate for controlling of toxic algal blooms.
So far, investigation of environmental pollution has been achieved in field study. This remains the most exhaustive approach, current dimensions of environmental researches and their inherent complexity require that relatively inexpensive and simple laboratory procedures are developed to make possible the screening of large numbers of sites and samples. At this point. microbioassay has been high-lighted. The purpose of this study is to evaluate the water pollution using microbioassay. Two microbioassay methods were optimized and validated for the sensitive and quantitative determination of total toxic effects in the water. EROD(Ethoxyresorufin-O-deethylase) microbioassay was focused to detect PARs, PCBs and dioxinlike components in the water and E-screen assay to xenoestrogens. The EROD microbioassay was executed in rat hepatoma cell line, H4IIE and E-screen assay in MCF7-BUS cell line. Kumho river was selected for this study. 5ι of river water was extracted using combined solid-phase extraction in static adsorption mode with soxhlet extraction. Pollutants adsorbed to the XAD-4 resin were recovered by elution with ethyl acetate and methylene chloride (1 : 9). Toxic effects of extracts were determined by EROD-microbioassay and E-screen assay. EROD activities of water samples were 7.24-72.24 ng/ι MEQ. The estrogenic effect of various water samples is quantitatively evaluated by EEQ. The EEQ of samples range from 0.05 to 6.07 ng-EEQ/ι. These results suggested that Kumho river was highly polluted with organic toxic chemicals.
Cyto-toxic effect of silver sulfadiazine (Ag-SD) on keratinocytes and its implication on wound healing process were investigated in $2^{nd}$ degree bum hairless mouse model. As a dermal model, HaCat (immortalized keratinocytes) monolayer culture in DMEM with 10% FBS was used. Cyto-toxicity of Ag-SD was estimated by measuring the cell viability using neutral red assay after adding the drug. The $2^{nd}$ degree bum was prepared on hairless mouse back skin (1 cm diameter) and dressings with Ag-SD were applied for 96 hr. The process of re-epithelialization and the presence of inflammatory cells were investigated and histology with Hematoxylin-Eosin staining was performed. Ag-SD displayed highly cyto-toxic effect on cultured HaCat cells in a concentration dependent manner $(1-100\;{\mu}g/mL)$. Topical application of Ag-SD (2%) could control the infection: no inflammatory cells were observed in histology. However the cyto-toxic effect of Ag-SD on skin cells induced the impairment in epidermal regeneration.
Dioxins, especially 2, 3, 7, 8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD or dioxin), are ubiquitous environmental contaminants. TCDD is known that it has toxic effects in animals and humans, including chloracne, immune, reproductive and developmental toxicities, carcinogenicity, wasting syndrome and death. TCDD induces a broad spectrum of biological responses, including disruption of normal hormone signaling pathways, reproductive and developmental defects, immunotoxicity, liver damage, wasting syndrome and cancer. Many researches showed that TCDD induces gene expression of transcriptional factors related cell proliferation, signal transduction, immune system and cell cycle arrest at molecular and cellular levels. These toxic actions of TCDD are usually mediated with AhR (receptor, resulted from cell culture, animal and clinical studies). cDNA microarray can be used as a highly sensitive and informative marker for toxicity. Additionally, microarray analysis of dioxin-toxicity is able to provide an opportunity for the development of candidate bridging biomarkers of dioxin-toxicity. Through microarray technology, it is possible to understand the therapeutic effects of agonists within the context of toxic effects, classify new chemicals as to their complete effects on biological systems, and identify environmental factors that may influence safety.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.22
no.5
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pp.1304-1308
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2008
This study was performed to evaluate the effect of persimmon leaves extract on the reactive oxygen species (ROS) in cultured melanoma cells. The B16/F10 melanoma cells were treated with various concentrations of t-butyl hydroperoxide (t-BHP). And also, the effect of persimmon leaves (PL) extract on the cytotoxicity mediated by t-BHP was done on the cell viability, tyrosinase activity and melanogenesis by colorimetric assays. In this study, t-BHP decreased cell viability in dose-dependent manner and XTT90 and XTT50 values were measured at 10 and 35 uM of PL, respectively in these culture. And also, XTT50 value was assessed as a highly toxic effect on cultured melanoma cells by the toxic criteria. In the effect of PL extract on the t-BHP-mediated cytotoxicity, PL extract significantly increased the cell viability injured by t-BHP in cultured B16/F10 melanoma cells. PL also showed the decreased tyrosinase activity and melanogenesis. From these results, it is suggested that ROS such as t-BHP showed highly toxic effect on cultured melanoma cells, and also, PL extract inhibited the tyrosinase activity and melanogenesis in cultured melanoma cells injured by ROS.
The production of interleukin-1(IL-1)and nitric oxide(NO) by cultured fibroblast cells of human nasal turbinate was revealed by biological assay respectively. The cells were incubated for various periods of time in the presence of staphyloccocal toxic shock syndrome toxin-1(TSST-1) and house dust mite(Dermatophagoides farinae, HDM), and the culture supernatants were harvested. There was a little difference in the activities of IL-1beta and the amount of NO produced by the cells when stimulated with 0.002-0.1$\mu$g/ml of TSSTO-1 and 0.02-1$\mu$g/ml of HDM. The shapes of the time course curves for the production of IL-1beta and NO by the cells were different. Groups stimulated with TSST-1 or HDM produced more IL-beta in 2 h than no exposure group(Control). A certain mixed group(TSST-1, 10ng+mite, 100 ng) continued to produce IL-1beta highly throughout the entire incubation period. The cells stimulated with TSST-1 or HDM produced more NO in 2 h and 6 h than that produced in the end of incubation(48 h). Also, the mixed groups were generally similar. There results suggest that induction of IL-1beta by a certain mixed condition(TSST-1+mite) in fibroblast cell in vivo may play a role in inflammation.
We investigated the growth and phosphate uptake of a toxic dinoflagellate, Gymnodinium catenatum, isolated from Yeosuhae Bay, South Korea. A short-term phosphate uptake experiment revealed that its maximum uptake and the half-saturation constant were 1.39 pmol/cell/hr and $2.65{\mu}M$, respectively. In a semicontinuous culture, the maximum specific growth rate and minimum phosphorus cell quota of G. catenatum were 0.39/day and 1.27 pmol/cell, respectively. Thus, G. catenatum is a poor competitor in terms of inorganic nutrient use and is unlikely to form blooms in Yeosuhae Bay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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