Choi Dongsu;Kim Ho-Bang;Kim Jeong-Hoe;Shin Ju-Sik;Seok Yeong-Seon;Chung Chan-Moon;Lee Yi
Journal of the Korean Society of Tobacco Science
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v.27
no.2
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pp.153-162
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2005
Tobacco (Nicotiana tabacum L.) cells were transformed with rice expansin genes, OsEXPA4, OsEXPB3, OsEXPB4, and OsEXPB6, to elucidate the function of the genes in tobacco cells. The transformation increased the mass of the callus by $36\%-65 \%$, and the cell length by $12\%-28\%$. The cell width was decreased by $3\%$ for OsEXPB3, not changed for OsEXPB4, increased by $25\%\;and\;20\%$ for OsEXPA4 and OsEXPB6, respectively. From database search, seven expansin genes were found and six of them belong to EXPA group and one of them belongs to EXPB group. EXLA and EXLB were not found. All tobacco expansin genes were evenly distributed in the phylogenetic tree of rice and Arabidopsis expansin genes.
The mammalian adenosine deaminase(ADA) gene was stably expressed in transgenic tobacco plane. The chimeric ADA gene 35S/35S/AMV/ADA/Tnos, has been constructed. This chimeric gene was introduced into the binary vector pRD400, which was thereafter mobilized into Agrobacterium tumefaiens strain MP90 harboring disarmed Ti-plasmid. The resulting strains were used to transform Nicofiana tabacum L. using the leaf disc. Incorporation of the chimeric gene into plant were confirmed by PCR and Northern blot analyses. Immunoblot analysis showed that ADA protein was successfully synthesized in the transgenic tobacco plants.
Effect of the antibiotic carbenicillin on callus and shoot formation from the leaf disc culture of tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. BY-4) was examined. The number of shoot induced from the leaf explants was decreased as the amount of carbenicillin increased from 250 mg/L to 2,000 mg/L on MS medium containing 0.5 mg/L of BAP or kinetin. In addition, calli formation from the leaf explants was increased by the treatment of 250 mg/L ∼ 500 mg/L carbenicillin with or without 0.5 mg/L of 2,4-D or NAA. However, the fresh weight of 4-week-cultured explants was decreased with increasing carbenicillin from 250 mg/L to 2,000 mg/L on MS medium containing 0.5 mg/L of 2,4-D or NAA. These results indicate that carbenicillin has an auxin-like effect, such as promoting callus formation and inhibiting shoot induction. It leads to the conclusion that the auxin-like property should be taken into account for the production of transgenic plants via Agrobacterium-mediated transformation.
We evaluated a possibility of the use of chloroplast number per guard cell pairs as a measure for ploidy level in the different ploidy levels of tobacco plant (Nicotiana tabacum L. cv. BY-4) . The guard-cell chloroplast numbers of leaves of haploid plant were a half of wild-type plant. Furthermore, the number of chloroplast per guard cell pairs of the leaves of doubled-haploid plant increased in two times compared with that of haploid plant. In addition, the chloroplast number was not changed in the F$_1$ progenies. The change of the chloroplast number by leaf stage was not observed. The results indicate that there is a strong relationship between ploidy level (2x and 4x) and chloroplast number per guard cell pairs. This relationship was also, observed in both in vitro and pot cultured plants. It was determined that the measurement of chloroplast number in guard cells of leaf epidermis is simple to use and less labour intensive, and hence can be considered a practical alternative to the chromosome counting methods or flow cytometry in the tobacco plant.
Plantlets derived from leaf blade-segment culture of a variegated tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. BY-4) that was induced by a heavy-ion ($^{14}N$) beam irradiation to proembryos, were characterized. When explants from both white and green sections of leaves of the variegated plant were cultured on MS medium containing 0.1 mg/L NAA and 1.0 mg/L BAP, the white sections yielded only white shoots, whereas the green sections generated approximately 47.2% green, 37.4% white and 15.4% variegated shoots. In the F1 generation of a green tobacco derived from the leaf blade-segment culture, the segregation ratio of green to white was 1,651:54. Furthermore, reciprocal crosses showed that all of the progenies was green, indicating that the variegation is not maternally inherited. When the signal intensity of photosynthesis genes was determined by DNA gel blot analysis using the variegated leaves derived from green sections of variegated leaves, there were more of the rbcL, psbA, 16S rDNA and 23S rDNA chloroplast genes in the white sections than the chloroplast genes in wild type and green sections of the variegated plants.
Genus Nicotiana has 76 species including N. tabacum. These plants are used not only as a material for cigarette manufacturing but also as ornamental plant, medicinal plant, poisonous substance plant, and bug repellent plant. N. tabacum is used as a main material for cigarette manufacturing with N. rustica. N. sylvestris and N. alata is used as ornamental plants because of their beautiful flowers and N. rustica is used for bug repellent or pesticide because of its high concentration of nicotine. N. glauca, a tree tobacco, is used for bio-fuel production. N. tabacum is used as a popular model plant system for degeneration, regeneration, and transformation. N. benthamiana is also used as a model system for foreign gene expression by agroinfiltration. The transformation ability of tobacco plant is a good target for molecular farming. Hepatitis B virus envelop protein, E. coli heat-labile enterotoxin, diabetes autoantigen, and cholera toxin B subunit were produced using tobacco plants. Secondary metabolites of tobacco include nicotine, anabasine, nornicotine, anatabine, cembranoid, solanesol, linoleic acid, rutin, lignin and sistosterol, and they are used for various medicine productions which cannot be produced by organic synthesis for their complicated structures. In conclusion, we have to understand the applicability of tobacco plant in detail and study to enlarge the usage of the plants.
A field experiment was conducted to study the effects of fertilizer application rate and number of harvested leaves per plant on selected agronomic, chemical and physical characteristics of burley tobacco(Nicotiana tabacum L. cv Burley 21) in 1988, 1989 and 1990 at Chonju Experiment Station, Korea Ginseng SE Tobacco Research Institute. 175.0 or 227.5 kilogram per 10a of compound fertilizer(N-P2O5-K2O= 10-10-20) were applied as main plot, and 2 or 4 of upper leaves was topped off with 0, 2 or 4 of the lower leaves removed as sub plot. Yield, total alkaloid and total nitrogen content of cured leaves were high in the higher level of compound fertilizer plot, and increasing the level of compound fertilizer had an adverse effect on physical characteristics. Reducing the number of harvested leaves had a negative effect on yield regardless of whether the leaf number was reduced by lower topping or removing the bottom leaves, but increased the rate of higher grades leaves. Differences in total alkaloid, total nitrogen and some physical properties among number of harvested leaf per plant were smaller than expected.
Potato Virus Y(PVY), vein necrosis strain, in Korea causes severe symptoms on burley tobacco(Nicotiana tabacum L.). As the results, programs to incorporate PVY resistance into commercial cultivars were initiatEd. But the development of the homozygous fertile line resistant to PVY is time consumming. This study was conducted whether the Fl hybrid could be used to reduce the yield losses caused by PVY. Four F1 hybrids were made between male - sterile(ms) NC 107 and KB 107 as maternal parent, and TC 612 and TC 613 as Pollen donor, respectively, and were evaluated for their PVY resistance and negatively associated traits. (ms NC 107 X TC 612) F1, named as KB 109, Ivas applied to yield trial and compared with commercial cultivars for the level of disease resistance, agronomic characteristics, chemical contents and physical properties. All Fl hybrid could be used commercially as the PVY resistant cultivar. Especially KB 109 have the resistance against PVY, tobacco mosaic virus and black shank(Phytophthora parasitica var. nicotianae). It had wider leaves, flowered one day later, and yield of acceptable quality was higher than that of Burley 21, standard cultivar in Korea.
These studies were conducted to investigate effects of phytohormone and activated carbon on the growth and rooting of teratoma shoots induced from Nicotiana tabacum cv. NC2326 transformed by Aerobacterium tumefaciens C58. GA was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoots from teratoma shoot, however, leaves of teratoma shoot cultured on the medium with GA were pointed. ABA was also effective in promoting shoot elongation, but was not for reduction of multiple shoots. Teratoma shoot cultured on the medium with 1 n activated carbon promoted shoot elongation and inhibited the number of shoots differentiated, but was grown as abnormal shoot. Addition of 1% activated carbon and 0.5mg/l BA to culture media was effective for shoot elongation and reduction of multiple shoot and for formation of round leaves as normal leaves. Though these shoots were inoculated on the rooting medium, they could not from roots but formed multiple shoots. Boric acid, myo-inositol and sucrose were also ineffective on the rooting of teratoma shoots.
This study was conducted to obtain the breeding information for the leaf breakdown, and correlation coefficients between leaf breakdown and some agronomic characters in flue-cured tobacco at Taegu Experiment Station, Korea Ginseng & Tobacco Research Institute. NC 95 and NC 2326 were used as parents. The bulk method procedure was used from the F2 to the F4 generations, 54 plants were selected among F4, and 11 lines were selected among 54 F5 which based on high resistance to bacterial wilt compared with NC2326. The entries were composed of parents and 11 F6 advanced lines, and designed in randomized block with 3 replications. Plant seedlings were transplanted in 16 April. The number of breakdown leaf were investigated at flowering stage, 18 June. There were significant difference between NC 95 and NC 2326 for the number of breakdown leaf, number and weight of ground suckers, days to flower, yield and resistance to bacterial wilt, and similar results were appeared among lines. Estimated heritability in the broad-sense ranged from 59.3% to 87.4% for all characters. Most of genetic correlations were higher than phenotypic coefficients between characters. Number of breakdown leaf was positively correlated with days to flower, the number and weight of ground suckers, while it was negative to yield. One line among 11 had few breakdown leaf, low producted ground suckers and high resistance to bacterial wilt. Above results suggest that the number and weight of ground suckers can be use as a selection criterion for leaf breakdown even under the condition without leaf breakdown.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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