본 연구는 Pb의 농도와 노출 기간이 붕어(Carassius auratus) 조직의 미세구조와 생리적 변화에 미치는 영향을 조사하였다. 아가미, 뼈와 근육 조직에서 Pb의 축적 농도는 노출 40일에 증가하였다. 아가미 조직 내 Pb의 축적량은 다른 조직에 비하여 높았으며, 아가미, 뼈 및 근육 조직에서 노출기간이 길어질수록 증가하였다. Pb에 노출된 아가미, 뼈와 근육 조직의 항산화효소 활성은 아가미와 근육 조직에서 높았으며, 신장 조직에서 가장 낮은 활성을 보였다. 또한 항산화효소 중 superoxide dismutase의 활성은 대조군에 비해 2배 정도 증가하였으나, glutathion peroxidas의 활성은 매우 낮았다. Pb에 노출된 아가미 조직에서 점액세포는 수가 증가하였으며, 곤봉화와 부종이 이차새변에서 나타났다. 또한 40일간 Pb에 노출된 아가미 조직 내 미토콘드리아와 핵에서는 막의 손상이 관찰되었으며, 신장 조직 내 사구체는 수축되어 보우만 주머니의 공간이 넓게 관찰되었다. 이러한 결과로 보아 붕어 조직 이 장기간 고농도의 Pb에 노출이 되면 비정상적인 형태로 변형되며, 이에 따라 매우 유해한 영향을 받을 수 있을 것으로 생각된다.
For an exact comparison of mRNA transcription in different samples or tissues with real time quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (qRT-PCR), it is crucial to select a suitable internal reference gene. Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) and beta-actin (ACTB) have been frequently considered as house-keeping genes to normalize for changes in specific gene expression. However, it has been reported that these genes are unsuitable references in some cases, because their transcription is significantly variable under particular experimental conditions and among tissues. The present study was aimed to investigate which reference genes are most suitable for the study of gastric cancer tissues using qRT-PCR. 50 pairs of gastric cancer and corresponding peritumoral tissues were obtained from patients with gastric cancer. Absolute qRT-PCR was employed to detect the expression of GAPDH, ACTB, RPII and 18sRNA in the gastric cancer samples. Comparing gastric cancer with corresponding peritumoral tissues, GAPDH, ACTB and RPII were obviously upregulated 6.49, 5.0 and 3.68 fold, respectively. Yet 18sRNA had no obvious expression change in gastric cancer tissues and the corresponding peritumoral tissues. The expression of GAPDH, ${\beta}$-actin, RPII and 18sRNA showed no obvious changes in normal gastric epithelial cells compared with gastric cancer cell lines. The carcinoembryonic antigen (CEA), a widely used clinical tumor marker, was used as a validation gene. Only when 18sRNA was used as the normalizing gene was CEA obviously elevated in gastric cancer tissues compared with peritumoral tissues. Our data show that 18sRNA is stably expressed in gastric cancer samples and corresponding peritumoral tissues. These observations confirm that there is no universal reference gene and underline the importance of specific optimization of potential reference genes for any experimental condition.
The purpose of this study was to investigate a fragment of possibility of pulpotomy with the Nd-YAG laser by the observation of pulpal healing process and the fine structural changes of the fibroblasts of the remaining pulpal tissues. Class V cavities on !55 teeth from 4 adult dogs were prepared and the pulp chambers were opened with a sterilized round bur. In the control group(19 teeth), the exposed coronal pulps were excised by a sharp excarvator. After bleeding was controlled with the sterilized cotton pellets, calcium hydroxide powder was applied on the remaining pulpal tissues and the cavities were sealed with Z.O.E. In the experimental group 1 : the pulpotomy with laser-calcium hydroxide powder application group(l9 teeth), the exposed coronal pulps were excised by Nd-YAG laser(10 watts power, 2 psi water, 20 psi air) for 2 or 3 seconds and calcium hydroxide powder was applied on the remaining pulpal tissues and the cavities were sealed with Z.O.E. In the experimental group 2 : the pulpotomy with laser-no calcium hydroxide powder application group(17 teeth), after amputating the coronal pulps with Nd-YAG laser as the experimental group 1, the remaining pulpal tissues were covered with stenilized aluminum foil and the cavities were filled with Z.O.E. The animals were sacrificed at the intervals of 1, 2, 3 and 4 weeks. All the teeth were rouutinely processed and the remaining pulpal tissues were observed by the light microscope and electron microscope. The results were as follows : 1. In light microscopic findings, there was no significant difference of the inflammatory response in the remaining pulpal tissues between the control group and the experimental groups. In both of the experimental group 1 : pulpotomy with laser-calcium hydroxide powder application group and the control group, the dentin bridges were observed after 2 weeks and the structure of the dentin bridge was almost same. In the experimental group 2 : pulpotomy with laser-no calcium hydroxide powder application group, the fibrous layers instead of dentin bridge were observed on the superficial portion of the remaining pulpal tissues after 2 weeks and they were consisted with densely crowded active fibroblasts. 2. In the electronmicroscopic findings, the active fibroblasts in the experimental groups were more frequently observed than in the control group at 1 week. But active fibroblasts were found with same frequency after 2 weeks in all of the control group and the experimental groups. 3. General distortions of the cell such as loss of the cell membrane, vaculoization of the cell etc. were observed at the suberficial layer of the remaining pulpal tissues and the carbonization was found in the dentinal wall in 1 week of the experimental groups. 4. In the experimental group 2 : pulpotomy with laser-no calcium hydroxide powder application group, the activity and the density of the fibroblasts in the fibrous layer were more than those in the deep portion of the remaining pulpal tissues after 2 weeks. 5. In the control group, bacteria such as cocci and bacilli were observed frequently, but in the experimntal groups, they could not be observed.
포르말린을 사용한 조직 고정 방식은 우수한 세포 형태를 유지하며 장기간 조직을 보관할 수 있는 장점이 있으나, 느린 고정 시간, 유해 화학물질에 노출 및 단백질 변형 등의 단점이 있다. 본 연구에서는 마우스의 간과 신장 조직을 이용하여 포르말린 고정과 마이크로파 조사에 의한 빠른 고정을 각각 실시한 후 조직학적 검사와 단백질의 보존 상태를 측정하여 그 결과를 비교하였다. 동일 조직을 절단하여 포르말린 고정과 인산염 완충 식염수에서 마이크로파 조사에 의한 고정 과정을 동시에 실시하였으며, 파라핀 포매 조직에서 제조한 슬라이드에서 H & E와 면역화학염색을 시행하여 조직 고정의 적정성과 항원성을 검사하였다. 또한 고정 조직에서 단백질 추출 양과 질을 각각 BCA법 및 Western blotting법으로 평가하였다. H & E 염색과 면역화학염색을 수행한 결과, 적혈구의 부분적 소실을 제외하고는 마이크로파 고정 조직과 포르말린 고정 조직 간에 대등한 결과를 보였다. 특히, 마이크로파 고정 조직에서 단백질은 잘 보존된 상태로 추출되었다. 결론적으로, 마이크로파 조사를 통한 조직 고정은 포르말린 고정과 비교하여 빠른 고정시간과 우수한 단백질 회수율을 보였으며, 조직 고정의 적정성과 항원성에서도 포르말린 고정과 대등한 결과를 보여, 신속한 조직 고정이 필요한 환경에서 적용이 가능함을 제시하고 있다.
The esthetics of chin contour is very important in facial deformities, and the quantity of soft tissue overlying the symphysis can be helpful to the correct diagnosis and surgical treatment for optimal facial harmony. The objectives of this study is to measure the different thicknesses of skeletal and soft tissues of chin on lateral cephalometric radiographs, to obtain the mean values of normal Korean adults, and to investigate the relative proportions of skeletal and soft tissues of chin. The results were as follows ; 1. In normal Korean adults, the relative proportions of the distances of soft tissue toward skeletal tissue were 1.5 in B point and 0.95 in Pg, and there were significant difference between male and female in the relative proportion of Pg (p<0.05). The relative proportion of the distances of vertical soft tissue toward horizontal soft tissue of Me was 1.91, and there were not significant difference between male and female. 2. In normal Korean adults, the distances of skeletal and soft tissues of chin showed no correlation, but the distances of vertical and horizontal soft tissues of Me showed high correlation (p<0.01). 3. In normal Korean adults, the correlations among the distances of each skeletal and soft tissues of chin were significantly high in both of male and female (p<0.01). Among the relative proportions of the distances of skeletal and soft tissues, the correlations of the proportions of B point and Mp and the proportions of Mp and Pg were significantly high (p<0.01).
Objectives : Primo vascular system is known to new circulatory system and suggested as a anatomical structure of meridian system. Primo-vessels are present throughout the whole body. The purpose of this study is to identify primo tissues taken from falciform ligament and to compare with organ surface primo tissue, blood vessel and lymph vessel. Methods : Male Sprague-Dawley rats (8weeks old, 250~320g) used for this study. The medial line of the abdomen was dissected and searched for primo tissues in falciform ligament and on the internal organs using stereomicroscope. We performed serial cross section and histological investigations. The tissues were stained with hematoxylin-eosin and Masson's trichrome. Results : 1. The primo tissues attached on the falciform ligament had white color and length of 5~8mm. 2. We could observe primo tissues are classified with ligament tissues. 3. Histologically, primo tissue on falciform ligament and organ surface primo tissue could be considered same tissue. Conclusions : In this study, we observed primo tissue discovered on the falciform ligament. And we also histologically compared such discovered primo tissue with organ surface primo tissue. Consequently, we could consider that two tissues have histological similarity and possibility of connection in one network system.
Leptin has a major role in the regulation of food intake and energy homeostasis. In addition, leptin participates in many physiological functions including regulation of lipid metabolism. Bovine recombinant leptin protein was produced in E. coli cells in order to understand function of leptin in the regulation of lipid metabolism. The leptin expression vector was constructed in pGEX-4T-3 vector and transformed into E. coli BL21 cells. Expression of the GST-leptin fusion protein was induced with IPTG. The fusion protein was purified using glutathione sepharose 4B batch method, and the recombinant leptin was eluted after thrombin protease digestion. The effect of leptin on glucose transport was examined in the differentiated adipocytes of 3T3-L1 cells. Leptin had no effect on basal and insulin-stimulated glucose transport in 3T3-L1 cells (p>0.05). Effect of recombinant leptin on glucose and acetate transport was examined in adipose tissues of Korean cattle (Hanwoo). Insulin stimulated glucose transport in both intramuscular and subcutaneous adipose tissues (p<0.05), but leptin did not affect glucose transport in both adipose tissues (p>0.05). Insulin stimulated acetate transport in bovine adipose tissues (p<0.05), but leptin did not affect acetate transport (p>0.05). Northern and RT-PCR analyses showed that mRNA levels of uncoupling protein-2 were increased by leptin treatment in 3T3-L1 cells without statistical difference (p>0.05). In conclusion, bovine recombinant leptin did not affect glucose and acetate transport in both 3T3-L1 adipocytes and bovine adipose tissues, while it stimulates UCP-2 mRNA expression in 3T3-L1 cells.
Background: Colorectal cancer is one of the most common cancers worldwide. Viruses including human papillomavirus (HPV) have been reported to be associated with different cancers but any association with colorectal cancers remains controversial. Aim: To evaluate any association between HPV infection and adenocarcinoma of the colon and adenomatous polyps. Materials and Methods: Paraffin-embedded tissue specimens of 70 colorectal adenocarcinomas, 70 colorectal adenomatous polyps, and 70 colorectal normal tissues were subjected to DNA extraction. The quality of the extracted DNA was confirmed by amplification of a ${\beta}$-globin fragment using polymerase chain reaction (PCR). PCR using specific primers were performed to detect HPV DNA. Specific primers targeting the E6 region of the HPVs 16 and 18 were used for genotyping. Results: HPV DNA was detected in 2 (2.85%) out of 70 adenocarcinoma colorectal tissues and 4 (5.71 %) out of 70 adenomatous colorectal tissues. All normal colorectal tissues were negative for HPV DNA. HPV-16 was the most predominant genotype (5 sample) followed by HPV-18 (4 sample). Despite the above observations, statistical analyses indicated no significant differences in the frequencies of HPV positive subjects between the cancerous and normal samples. Conclusions: Although the differences observed in the frequencies of HPV positive cases in our study was not significant relative to those of control subjects, the fact of 6 positive samples among cancerous tissues, may still suggest a role of HPV in colorectal carcinogenesis. The study collectively indicated that some colorectal cancerous tissues are infected with high risk HPV genotype. The findings merit more investigation.
S-Adenosyl-L-methionine synthetase (ATP: methionine S-Adenosyltransferase, EC 2.5.1.6; AdoMet synthetase) catalyzes the biosynthesis of S-Adenosyl-L-methionine(AdoMet) from methionine in the presence of ATP. To elucidate the role of transmethylation reaction in the pancreatic tissues, we examined AdoMet synthetase and isozyme activities, and AdoMet contents in the various tissues. The activities of AdoMet synthetase marked the highest in the kidney, and the lowest in the testis among the various tissues of rat. Considerable amounts of AdoMet synthetase activities were detected in the pancreatic tissues of various animals except for those of frog. The level of ${\alpha}$ and ${\gamma}$ isozyme activities were present in the pancreatic tissues of various animals, while ${\beta}$ isozyme activities were detected as trace. AdoMet synthetase activities of rat brain, liver, testis were decreased with growth. In the rat pancreatic tissues, AdoMet synthetase activities were increased during 16 days after birth and then decreased between 16 and 47 days of age. Levels of AdoMet contents of rat brain and testis were decreased with growth. However, AdoMet contents of rat pancreas were decreased until 26 days of age, and then increased thereafter. AdoMet synthetase isozyme patterns did not vary with growth in the pancreas and testis. But, in the liver, ${\beta}$ form is strikingly increased with growth.
Hosseini, Arezoo;Gopalan, Vinod;Nassiri, Mohammadreza;Ghaffarzadehgan, Kamran;Aslaminejad, Ali;Ghovvati, Shahrokh;Smith, Robert A.;Lam, Alfred K.Y.
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권20호
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pp.8789-8791
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2014
Estrogen receptor alpha ($ER{\alpha}$) is one of the major sub-types of estrogen receptors. $ER{\alpha}$ plays an important role in cellular proliferation and differentiation, chiefly in mammary tissues. In the present study we aimed to quantify of $ER{\alpha}$ mRNA and protein expression in breast tissues from the Iranian population using a real-time PCR assay. Twenty nine breast tissues including 19 adenocarcinomas and 10 normal controls were recruited from the Iranian population. mRNA extraction and cDNA synthesis were performed from these tissues using commercial kits. $ER{\alpha}$ mRNA and protein expression was quantified using real-time PCR and immunohistochemistry respectively. The results showed high expression of $ER{\alpha}$ mRNA (68%) and protein (53%) in the majority of breast cancer tissues compared to normal breast tissues (p= 0.035). Also, high $ER{\alpha}$ mRNA was associated with tumour size of breast carcinomas. In this study, we first reported the expression of $ER{\alpha}$ in Iranian patients with breast cancers and demonstrated prevalence of the expression to be similar to breast cancers noted in other populations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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