Shin, Dongwoo;Kim, Min Sup;Yang, Chae Eun;Lee, Won Jai;Roh, Tai Suk;Baek, Wooyeol
Archives of Plastic Surgery
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제46권5호
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pp.399-404
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2019
Background The objectives of this study were to design polycaprolactone nanofibers with a radial pattern using a modified electrospinning method and to evaluate the effect of radial nanofiber deposition on mechanical and biological properties compared to non-patterned samples. Methods Radially patterned polycaprolactone nanofibers were prepared with a modified electrospinning method and compared with randomly deposited nanofibers. The surface morphology of samples was observed under scanning electron microscopy (SEM). The tensile properties of nanofibrous mats were measured using a tabletop uniaxial testing machine. Fluorescence-stained human bone marrow stem cells were placed along the perimeter of the radially patterned and randomly deposited. Their migration toward the center was observed on days 1, 4, and 7, and quantitatively measured using ImageJ software. Results Overall, there were no statistically significant differences in mechanical properties between the two types of polycaprolactone nanofibrous mats. SEM images of the obtained samples suggested that the directionality of the nanofibers was toward the central area, regardless of where the nanofibers were located throughout the entire sample. Florescence images showed stronger fluorescence inside the circle in radially aligned nanofibers, with significant differences on days 4 and 7, indicating that migration was quicker along radially aligned nanofibers than along randomly deposited nanofibers. Conclusions In this study, we successfully used modified electrospinning to fabricate radially aligned nanofibers with similar mechanical properties to those of conventional randomly aligned nanofibers. In addition, we observed faster migration along radially aligned nanofibers than along randomly deposited nanofibers. Collectively, the radially aligned nanofibers may have the potential for tissue regeneration in combination with stem cells.
The regeneration of lost periodontal tissue is a major goal of therapy. Periodontal ligament cell(PDL) is a specialized connective tissue that connects cementum and alveolar bone to maintain and support teeth in situ and preserve tissue homoeostasis. Bone morphogenetic proteins(BMPs) have shown much potential in the reconstruction of the periodontum by stimulate new bone and new cementum formation. Limitiations of BMP administration to periodontal lesions is high dose delivery, BMP transient biological activity, and low bioavailability of factors at the wound site. Gene delivery method can be alternative treatment strategy to deliver BMPs to periodontal tissue. The purpose of this study is to investigate efficiency of BMP-2 gene delivery with cell-based therapy using PDL cells. PDL cell were transduced with adenoviruses encoding either BMP-2 or Lac-Z gene. To evaluate osteogenic activity of expressed BMP-2 on PDL cells, we investigated secreted BMP-2, cellular activity, ALPase, produced mineralized nodules. To evaluate collagen scaffold as carrier for transduced cell delivery, we examined morphology and secreted BMP-2 of transducd PDL cells on it. BMP-2 transducd PDL cells produced higher levels of BMP-2, ALPase, mineralized nodules than non transduced cells. Cellular activity of transduced cells was showed similar activity to non transduced cells. Transduce cells attached on collagen scaffold secreted BMP-2 at 7day and was showed similar morphology to non transduced cells. These results demonstrated that transduced PDL cells produced biologically active BMP-2 and collagen scaffold could be carrier of transducd cells.
Objective: Using domestic cats as a biomedical research model for fertility preservation, the present study aimed to characterize the influences of ovarian tissue encapsulation in biodegradable hydrogel matrix (fibrinogen/thrombin) on resilience to cryopreservation, and static versus non-static culture systems following ovarian tissue encapsulation and cryopreservation on follicle quality. Methods: In experiment I, ovarian tissues (n=21 animals; 567 ovarian fragments) were assigned to controls or hydrogel encapsulation with 5 or 10 mg/mL fibrinogen (5 or 10 FG). Following cryopreservation (slow freezing or vitrification), follicle viability, morphology, density, and key protein phosphorylation were assessed. In experiment II (based on the findings from experiment I), ovarian tissues (n=10 animals; 270 ovarian fragments) were encapsulated with 10 FG, cryopreserved, and in vitro cultured under static or non-static systems for 7 days followed by similar follicle quality assessments. Results: In experiment I, the combination of 10 FG encapsulation/slow freezing led to greater post-thawed follicle quality than in the control group, as shown by follicle viability (66.9%±2.2% vs. 61.5%±3.1%), normal follicle morphology (62.2% ±2.1% vs. 55.2%±3.5%), and the relative band intensity of vascular endothelial growth factor protein phosphorylation (0.58±0.06 vs. 0.42±0.09). Experiment II demonstrated that hydrogel encapsulation promoted follicle survival and maintenance of follicle development regardless of the culture system when compared to fresh controls. Conclusion: These results provide a better understanding of the role of hydrogel encapsulation and culture systems in ovarian tissue cryopreservation and follicle quality outcomes using an animal model, paving the way for optimized approaches to human fertility preservation.
Dietary fatty acids are under intense research to identify anti-atherogenic mechanisms, so we investigated green tea powder (GT) as a protector against atherogenesis originating from lipid peroxidation such as 4-hydroxynonemal (4-HNE) and malondialdehyde (MDA) in different dietary fatty acid-treated apo E KO mice. Growth rate and dietary efficiency were lower in apo E KO mice with or without LA compared to wild type. Plasma total cholesterol (TC) and triacylglycerol (TG) did not correspond to values in other tissues, but TG in heart tissue decreased significantly by GT after linoleic acid (LA) or docosahexaenoic acid (DHA) was administered. LA induced apoptosis as evidenced by changes in aorta morphology and immunohistochemistry. Lipid peroxides (LPO) was increased in apo E KO mice with or without LA corresponding to the accumulation of 4-HNE or MDA in the proximal aorta above the atria. GT consumption tended to reduce the primary causal mechanism of atherogenic phenomena such as oxidizability in both LA and DHA treated atherogenic mice. A high polyunsaturated fatty acids (PUFA) diet involved the changes on stress-induced apoptotic signaling by increasing caspase 3, cytochrome c, and nuclear factor-${\kappa}B$ in the heart tissue, but decreasing the bcl-2 protein. However, GT remarkably reduced the expression of apoptotic signaling, in contrast to the PUFA diet. Therefore, the potential of GT as an anti-atherosclerotic dietary antioxidant was tested in this study.
Orthodontic treatment of cleft patients is difficult as the growth is different from that of normal ones. So it is very important to know the characteristic features of the craniofacial morphology and growth pattern in unilateral cleft lip and palate patients. The materials for this study consisted of 55 normal males and 50 unilateral cleft lip and palate ones who received cheiloplasty and palatoplasty previously. The cleft subjects were divided into 4 groups according to their ages kto find out the growth pattern of hard and soft tissue, and to compare the features with those of normal ones. Each cephalogram analysed by McNamara method and others. The obtained results were as follows 1. In the unilateral cleft lip and palate subjects, forward growth of the maxilla was smaller than that of normal ones from 9 years old. So the maxilla was retruded. The maxillary incisors were severely retruded in all age groups. 2. The mandibular overall length and its anteroposterior position did not show any significant differences between two groups. But the height of ramus was very short and the mandible had vertical growth tendency to compensate for undergrowth of the maxilla in cleft subjects after 12 years of age. 3. Horizontal growth of the soft tissue in middle face was smaller than that of any other facial region from 9 years old. The vertical growth rate of upper lip was decreased as growing old. 4. In cleft subjects, the upper and lower facial component angle and the facial convexity angle were large. So their facial profile changed to straight or concave as growing old.
Purpose: Accessory tragus is a fairly common congenital malformation and usually located at pretragal area. Surgical removal is a common treatment of accessory tragus irrespective of location and morphology. Most accessory tragi do not have depression site around them, but some do. So in those cases, simple surgical excision was not enough to promote the aesthetic facial appearance. For depression site remodeling, the excess amount of skin and cartilage need to be remained partially instead of total excision. This method can achieve the symmetric contour of pretragal area. The authors excised the epidermis and cartilaginous tissue totally and remained the dermis for reconstruction of the depression site around accessory tragus. The depression site is filled with dermal turnover flap. The purpose of this report is to present new idea to promote cosmetic result in treatment of accessory tragus containing the depression site. Methods: Two patients had a pair of accessory tragi at pretragal area. One was a common featured accessory tragus, but the other was different. Depression site was found around accessory tragus. After epidermis and cartilaginous tissue were removed from it, dermis component was used as turnover flap for reconstruction of depression site. Results: After accessory tragus was removed and depression site was reconstructed, facial contour and cosmetic result was achieved. Complication such as flap necrosis and wound dehiscence was not observed. Conclusion: The accessory tragus has variant morphology and degree of invasive depth. And some has a depression site around them. In those cases, simple surgical removal results in morphological distorsion and do not promote facial symmetry. The authors suggest dermal turnover flap as reconstruction method of the depression site. This method improves both surgical outcome and cosmetic result.
The purpose of this study was to compare the inhibitory effect of bevacizumab on human Tenon's fibroblasts (HTFs) cultured from primary and recurrent pterygium. Cultured HTFs were exposed to 2.0, 5.0, 7.5, and 15.0 mg/mL concentration of bevacizumab for 24 hours. The 3-[4,5-dimethylthiazol- 2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide and lactate dehydrogenase leakage assays were then performed to assess fibroblast metabolism and viability. The matrix metalloproteinase (MMP), procollagen type I C terminal propeptide (PIP), and laminin immunoassays were performed to examine extracellular matrix production. Changes in cellular morphology were examined by phase-contrast and transmission electron microscopy. Both metabolic activity and viability of primary and recurrent pterygium HTFs were inhibited by bevacizumab in a dose-dependent manner, especially at concentrations greater than 7.5 mg/mL. Both types of HTFs had significant decreases in MMP-1, PIP, and laminin levels. Distinctly, the inhibitory effect of bevacizumab on MMP-1 level related with collagenase in primary pterygium HTFs was significantly higher than that of recurrent pterygium. Significant changes in cellular density and morphology both occurred at bevacizumab concentrations greater than 7.5 mg/mL. Only primary pterygium HTFs had a reduction in cellular density at a bevacizumab concentration of 5.0 mg/mL. Bevacizumab inhibits primary and recurrent pterygium HTFs in a dose-dependent manner, especially at concentrations greater than 7.5 mg/mL. As the primary HTFs produces larger amounts of MMP-1 compared to recurrent HTFs, significant reduction in MMP-1 level in primary pterygium HTFs after exposure to bevacizumab is likely to be related to the faster cellular density changes in primary pterygium HTFs.
Purpose: To investigate the effect of deacetylase inhibitory trichostatin A (TSA) on anti HepG2 liver carcinoma cells and explore the underlying mechanisms. Materials and Methods: HepG2 cells exposed to different concentrations of TSA for 24, 48, or 72h were examined for cell growth inhibition using CCK8, changes in cell cycle distribution with flow cytometry, cell apoptosis with annexin V-FTIC/PI double staining, and cell morphology changes under an inverted microscope. Expression of ${\beta}$-catenin, HDAC1, HDAC3, H3K9, CyclinD1 and Bax proteins was tested by Western blotting. Gene expression for ${\beta}$-catenin, HDAC1and HDAC3 was tested by q-PCR. ${\beta}$-catenin and H3K9 proteins were also tested by immunofluorescence. Activity of Renilla luciferase (pTCF/LEF-luc) was assessed using the Luciferase Reporter Assay system reagent. The activity of total HDACs was detected with a HDACs colorimetric kit. Results: Exposure to TSA caused significant dose-and time-dependent inhibition of HepG2 cell proliferation (p<0.05) and resulted in increased cell percentages in G0/G1 and G2/M phases and decrease in the S phase. The apoptotic index in the control group was $6.22{\pm}0.25%$, which increased to $7.17{\pm}0.20%$ and $18.1{\pm}0.42%$ in the treatment group. Exposure to 250 and 500nmol/L TSA also caused cell morphology changes with numerous floating cells. Expression of ${\beta}$-catenin, H3K9and Bax proteins was significantly increased, expression levels of CyclinD1, HDAC1, HDAC3 were decreased. Expression of ${\beta}$-catenin at the genetic level was significantly increased, with no significant difference in HDAC1and HDAC3 genes. In the cytoplasm, expression of ${\beta}$-catenin fluorescence protein was not obvious changed and in the nucleus, small amounts of green fluorescence were observed. H3K9 fluorescence protein were increased. Expression levels of the transcription factor TCF werealso increased in HepG2 cells following induction by TSA, whikle the activity of total HDACs was decreased. Conclusions: TSA inhibits HDAC activity, promotes histone acetylation, and activates Wnt/${\beta}$-catenin signaling to inhibit proliferation of HepG2 cell, arrest cell cycling and induce apoptosis.
조직공학은 손상된 골 조직 및 장기를 복원, 재생, 그리고 복구할 수 있는 잠재력을 가진 새로운 학문 분야이다. 인산칼슘계 세라믹스인 삼인산칼슘과 수산회인회석은 골 조직 재생을 위해 골전도성과 생체적합성의 특성을 가진 우수한 재료로 알려져 있다. 본 연구에서, 혼합 용액 구조물은 적층 및 히터장치를 기반으로 한 압출 적층 조형 시스템을 이용하여 제작되었다. 바이오 세라믹 인공지지체는 $1,300^{\circ}C$의 고온에서 소결되었고, 또한 형태학적인 특성은 주사전자현미경을 통해 분석되었다. 게다가, TCP/HA 의 혼합비율에 따른 미세구조물과 수축률에 대한 효과는 연구되었다. 인공지지체의 기계적 특성은 1 mm/min 의 크로스헤드 속도로 압축 시험기를 통해 측정되었고, 인공지지체의 세포 증식평가를 위해 MG-63 세포를 이용하였다. 본 연구의 결과는 혼합된 TCP(75 wt%)/HA(25 wt%) 인공지지체가 골 조직 재생을 위해 적합한 인공지지체라는 것을 제안한다.
Purpose: Peri-implantitis, a clinical term describing the inflammatory process that affects the soft and hard tissues around an osseointegrated implant, may lead to peri-implant pocket formation and loss of supporting bone. However, this imprecise definition has resulted in a wide variation of the reported prevalence; ${\geq}10%$ of implants and 20% of patients over a 5- to 10-year period after implantation has been reported. The individual reporting of bone loss, bleeding on probing, pocket probing depth and inconsistent recording of results has led to this variation in the prevalence. Thus, a specific definition of peri-implantitis is needed. This paper describes the vast variation existing in the definition of peri-implantitis and suggests a logical way to record the degree and prevalence of the condition. The evaluation of bone loss must be made within the concept of natural physiological bony remodelling according to the initial peri-implant hard and soft tissue damage and actual definitive load of the implant. Therefore, the reason for bone loss must be determined as either a result of the individual osseous remodelling process or a response to infection. Methods: The most current Papers and Consensus of Opinion describing peri-implantitis are presented to illustrate the dilemma that periodontologists and implant surgeons are faced with when diagnosing the degree of the disease process and the necessary treatment regime that will be required. Results: The treatment of peri-implantitis should be determined by its severity. A case of advanced peri-implantitis is at risk of extreme implant exposure that results in a loss of soft tissue morphology and keratinized gingival tissue. Conclusions: Loss of bone at the implant surface may lead to loss of bone at any adjacent natural teeth or implants. Thus, if early detection of peri-implantitis has not occurred and the disease process progresses to advanced peri-implantitis, the compromised hard and soft tissues will require extensive, skill-sensitive regenerative procedures, including implantotomy, established periodontal regenerative techniques and alternative osteotomy sites.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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