Kim, Jinse;Park, Jong Woo;Park, Seokho;Choi, Dong Soo;Choi, Seung Ryul;Kim, Yong Hoon;Lee, Soo Jang;Park, Chun Wan;Han, Gui Jeung;Cho, Byoung-Kwan
Journal of Biosystems Engineering
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제41권2호
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pp.108-115
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2016
Purpose: Radio frequency (RF) heating is a promising thawing method, but it frequently causes undesirable problems such as non-uniform heating. This can occur because of the food shape, component distribution, and initial temperature differences between food parts. In this study, RF heating was applied to the thawing of cylindrically shaped pork sirloin by changing the shape of electrodes and the surrounding temperature. Methods: Curved electrodes were utilized to increase the thawing uniformity of cylindrically shaped frozen meat. Pork sirloin in the shape of a half-circle column was frozen in a deep freezer at $-70^{\circ}C$ and then thawed by RF heating with flat and curved electrodes. In order to prevent fast defrosting of the food surface by heat transfer from air to the food, the temperature of the thawing chamber was varied by -5, -10, and $-20^{\circ}C$. The temperature values of the frozen pork sirloin during RF thawing were measured using fiber-optic thermo sensors. Results: After multiple applications of curved electrodes resembling the food shape, and a cooled chamber at $-20^{\circ}C$ the half-cylindrically shaped meat was thawed without surface burning, and the temperature values of each point were similarly increased. However, with the parallel electrode, the frozen meat was partially burned by RF heating and the temperature values of center were overheated. The uniform heating rate and heat transfer prevention from air to the food were crucial factors for RF thawing. In this study, these crucial factors were accomplished by using a curved electrode and lowering the chamber temperature. Conclusions: The curved shape of the electrode and the equipotential surface calculated from the modeling of the parallel capacitor showed the effect of uniform heating of cylindrically shaped frozen food. Moreover, the low chamber temperature was effective on the prevention of the surface burning during RF thawing.
본 실험은 초고압 동결 및 해동기법이 돈육의 이화학적 특성에 미치는 효과를 규명하고자 시도하였다. 동결 및 해동처리 과정에서 가압에 따른 pH 증가 및 단백질 변성에 따른 보수력의 저하로 관찰되었지만, 초고압 동결 기법을 이용함으로써 효과적으로 해동 및 가열감량을 최소화할 수 있었다. 반면에 초고압 해동기법은 느린 해동속도에 기인한 얼음 재결정화로 해동육의 수율 측면에 영향을 미칠것으로 판단되었다. 따라서 초고압 동결처리에 의한 빠른 동결 및 빠른 해동처리를 통하여 돈육의 물리적 특성 저하를 최소화할 수 있을 것으로 간주되었다. 반면에 250 MPa의 압력은 돈육의 색도에 부정적인 영향을 미치는 것으로 나타났다.
A series of experiments were conducted to determine the suitable freezing and thawing temperatures for the freezing of boar semen in 5 ml maxi-straws. The ultrastructure, in vitro fertilization (IVF) and artificial insemination (AI) of frozen-thawed semen were also be evaluated. The 5 cm freezing height gave the best results not only in post-thaw motility rate (54.00%), but also in normal acrosome morphology rate (NAR) (80.23%). There was no significant difference in the post-thaw motility between different thawing temperatures and corresponding thawing times (p>0.05); the group of $52^{\circ}C$ and 25 s gave the highest motility rate (45.00%). As a whole, not only from the motility but also the NAR, thawing at $42^{\circ}C$ was better than the other two treatments. In the freezing packages, 5 ml maxi-straw gave a little lower mobility (40%), viability rate (49.58%), plasma membrane integrity rate (53.91%) and NAR (52.65%) than the 0.25 ml straw, but there was no significant difference between the two straw volumes (p>0.05). The IVF capacity of frozen-thawed semen in this experiment was similar to fresh semen. From ultrastructure observation, the main damage to boar spermatozoa after freezing was seen in the acrosome, such as swelling and formation of vesicles. After AI in recipient Shanghai White sows, frozen-thawed semen from 5 ml maxi-straws and pellets produced 72.2% and 80% conception rate and 7.8 and 8 litter sizes, respectively, and there was no significant difference between the 5 ml maxi-straw and the pellet (p>0.05).
개의 인공수정에 사용할 정자의 보존방법을 확립하기 위하여, 동결속도와 응해 온도를 설정하여 적절한 동결방법을 정립하고자 본 실험을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 동결의 방법에 있어서는 액체질소의 표면으로부터 17 cm 높이에서 동결하는 -3$^{\circ}C$/min의 동결속도로 실시하여 37$^{\circ}C$에서 2분간 응해하는 방법이 가장 좋은 결과를 보였다. 생존성과 운동성에 있어서의 차이는 없지만 첨체의 intact한 비율은 약간 낮은 결과를 보였으며, 이의 보완을 위해, 액체질소 표면으로부터 10cm와 17cm의 높이를 세분화하여 동결속도를 설정한 후보다 나은 정액동결방범을 찾는다면 동결정액을 이용한 인공수정의 수태율은 더욱 향상될 수 있을 것으로 사료된다.
본 연구는 초음파를 이용한 해동기의 이용 가능성을 확인 하고자 수행되었다. 초음파 해동기는 132, 580 및 1,000 kHz의 공진주파수를 가지는 진동자를 이용하여 각 주파수로 제작하고 돈육을 일정한 크기로 정형하여 $-80^{\circ}C$에서 냉동한 후 제작된 해동기를 이용하여 해동 성능을 분석하였다. 해동속도 비교에서는 초음파를 가하지 않은 접촉식해동의 경우 일반적으로 가정에서 행해지는 유수식 해동과 유사하게 20분가량이 소요되었으나, 초음파를 가했을 경우 주파수가 증가할수록 해동시간이 단축되어 1,000 kHz에서는 6분 만에 해동이 완료되었다. 초음파를 이용한 해동 후 품질변화에 대한 분석에서는 재작된 초음파 해동기를 이용하였을 경우 유수해동에 비하여 드립으로 인한 해동감량이 0.5%가량 증가하였지만 pH, VBN 및 TBA 값과 같은 화학적 특성에서는 차이를 나타내지 않았다. 총 호기성 미생물에 또한 냉 해동에 따라 큰 차이를 나타내지 않았다. 초음파 해동기를 이용한 해동에서 냉동 전후의 육색을 비교 분석한 결과 명도는 변화는 거의 나타나지 않았지만 유수해동에 비하여 580 kHz를 이용한 초음파 해동에서 적색도 및 전체 색변화가 유의적의로 개선되었다. 해동육의 조직감 분석에서는 초음파 해동에서 경도가 감소하고 저작성이 증가하는 경향을 나타내었다. 이러한 결과를 종합해볼 때 접촉식 초음파 해동기는 해동시간 단축에 매우 효율적이나 해동육의 품질개선에는 뚜렷한 효과를 나타내지 못하여 경제성을 고려했을 때 성능 개선 및 연육 효과가 나타나는 580 kHz 해동기의 개선 및 이용방안에 대한 추가적인 연구가 필요할 것으로 판단된다.
This stduy was carried out in order to investigate the effects of concentration and equilibration time of cryoprotective agents on survival rate of slow and ultrarapidly frozen in vitro fertilized bovine embryos. In vitro fertilized bovine embryos, following dehydration by cryoprotective agents and sucrose, were slowly freezed(from 2$0^{\circ}C$ to -7$^{\circ}C$/-1$^{\circ}C$/min., from -7$^{\circ}C$ -35$^{\circ}C$/-0.2$^{\circ}C$/min. from -35$^{\circ}C$ to -38$^{\circ}C$/-0.3$^{\circ}C$/min.) by cell freezer and directly plunged into liquid nitrogen and thawed in 38$^{\circ}C$ water. Survival rate was defined by development rate to the morula and blastocyst stage after in vitro cultured and FDA test. The results are summarized as follows : 1. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after slow frozen-thawing in the freezing medium of 0.25M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol+2.0M propanediol were 84.3%, 85.9%, 77.8%, 74.3%, respectively. 2. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after slow frozen-thawing in the freezing of 0.50M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol+2.0M propanediol were 83.8%, 85.1%, 71.4%, 74.6%, respectively. 3. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing of 0.25M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol+3.0M propanediol were 69.3%, 70.8%, 63.2%, 67.1%, respectively. 4. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after ultrarapid frozen-thawing in the freezing of 0.25M sucrose added 2.5M glycerol, 3.0M DMSO, 2.0M propanediol and 2.5M glycerol+2.0M propanediol were 69.4%, 70.1%, 62.3%, 63.5%, respectively. 5. The survival rates of in vitro fertilized bovine embryos after slow and ultrarapid fromthawing in the freezing medium of sucrose added cryoprotective agents were not significant difference between 5min. and 10min. of equilibration time.
The present study was conducted to observe the effect of osmolality of glycerolated TEST-yolk glycerol extenders on post-thawing sperm kinematics of ram spermatozoa of the native Malpura breed maintained in a semi-arid tropical environment. Good quality semen obtained from adult rams was pooled, split and diluted to 1,000 million spermatozoa per ml in complete TEST-yolk-glycerol extenders of 900, 1,200, 1,500 and 1,800 mOsm/kg osmolality. Diluted semen samples were loaded in 0.25 ml straws and cooled down to $-125^{\circ}C$ freezing temperature at the rate of $-25^{\circ}C$ per minute under controlled conditions before plunging into liquid nitrogen for storage. The thawing of straws was performed at $50^{\circ}C$ in a water bath for 10 seconds and sperm kinematics of the frozen-thawed spermatozoa were assessed by a computer-assisted sperm analysis technique. Osmolality of diluent had no significant effect on post-thawing % motility, % rapid, % medium and % slow moving frozen-thawed spermatozoa but significantly (p< 0.05) affected the % linearity and % straightness. The post-thawing % motility and % rapid motile spermatozoa were highest in samples extended in diluent of 1,500 mOsm/kg osmolality and lowest in 900 mOsm/kg. The curvilinear velocity of spermatozoa was significantly (p<0.05) higher for samples extended in 1,800 mOsm/kg, compared to those in 900 and 1,200 mOsm/kg, but the effect was not significantly different to those extended in diluent of 1,500 mOsm/kg osmolality. The study indicated that ram spermatozoa could tolerate a wide osmolality range for dilution in the complete TEST-yolk-glycerol extender for their cryosurvival. The highest recovery of motile spermatozoa following thawing was achieved in samples extended in the TEST-yolk-glycerol diluent of 1,500 mOsm/kg osmolality.
Polyvinyl alcohol/sodium carboxymethyl cellulose (PVA/NaCMC) hydrogels were prepared by physical crosslinking (cyclic freezing/thawing) and gamma (${\gamma}$)-ray irradiation to evaluate the effect of NaCMC concentration (2~8 wt%) on the mechanical properties and the biocompatibility of the PVA/NaCMC hydrogels. The swelling rate of PVA/NaCMC hydrogels regardless of irradiation rose with increasing NaCMC content from 2 wt% to 8 wt%, while the gelation rate was the reverse. As the NaCMC content increased from 2 wt% to 6 wt%, the compressive strength of the hydrogels increased dramatically from $8.5{\pm}2.0kPa$ to $52.7{\pm}2.5kPa$ before irradiation and from $13.5{\pm}2.9kPa$ to $65.5{\pm}8.7kPa$ after irradiation. When 8 wt% NaCMC was added afterwards, the compressive strength decreased however. The irradiated PVA/NaCMC hydrogels containing 6 wt% NaCMC exhibited the tailored properties of the swelling rate of $118{\pm}3.7%$, the gelation rate of $71.4{\pm}1.3%$, the strength of $65.5{\pm}8.7kPa$, respectively, and no cytotoxicity was observed.
Background: In the present study, various freezing containers were tested for mouse embryos of respective developmental stages; embryos were vitrified and then their survival rate and developmental rate were monitored. Mouse two cell, 8 cell, and blastula stage embryos underwent vitrification freezing-thawing and then their recovery rate, survival rate, development rate, and hatching rate were investigated. Methods: EM-grid, OPS, and cryo-loop were utilized for vitrification freezing-thawing of mouse embryos. Results: It was found that recovery rate and survival rate were higher in the group of cryo-loop compared to those of EM-grid (p < 0.05). Embryonic development rate, two cell embryos to blastocyst, as well as hatching rate were higher in the control group compared to the EM-grid group and OPS group (p < 0.05), yet no difference was noted between the control group and cryo-loop group. Development rate and hatching rate of eight cell morulae and blastocysts were all lower in the treatment groups than the control group whilst hatching rate of blastocysts was higher in the control group compared to the groups of EM-grid and OPS (p < 0.05); although the cryo-loop group was shown to be slightly higher than other groups, it was not statistically significant. Conclusions: In the study, we investigate effects of freezing containers on vitrified embryos of respective developmental stages; it was demonstrated that higher developmental rate was shown in more progressed (or developed) embryos with more blastomeres. There was however, no difference in embryonic development rate was shown amongst containers. Taken together, further additional studies are warranted with regards to 1) manipulation techniques of embryos for various vitrification freezing containers and 2) preventive measures against contamination via liquid nitrogen.
These experiments were carried out to examine the effect of rapid thawing (500$^{\circ}C$/min) on the survival of 8-cell mouse embryos cooled slowly (0.5-1$^{\circ}C$/min) to precooling temperatures between -10 and 070$^{\circ}C$ before direct transfer ofembryos to -196$^{\circ}C$, and to compare the survival of embroys thawed slowly (20$^{\circ}C$/min) and rapidly (500$^{\circ}C$/min) after in vitro culture. In addition, the sensitivity of 8-cell mouse embroys to the rate of addition and removal of cryoprotectant at room temperauture, and the effect of developing stages on the survival of embryos frozen-thawed slowly were investigated. The results obtained were summarized as follows: 1. Embryos were survived in rapid thawing (500$^{\circ}C$/min) only when slow cooling was terminated at relatively high subzero teperaure (-20 to -60$^{\circ}C$). The highest survival rate(77.0%) in in vitro culture of embryos thawed rapidly was obtaeined after transfer to -196$^{\circ}C$ from -40$^{\circ}C$. 2. For the survival of embryos in slow thawing (20$^{\circ}C$/min.), slow cooling to lower subzero temperature (-50$^{\circ}C$ and below) was required before transfer of embryos to -196$^{\circ}C$. These results indicate that embryos transferred to -196$^{\circ}C$ from high subzero temprature contain much interacellular ice to damage them during slow warming but to permit survival of embryos after rapid warming. 3. The Survival rate (72.7%) of 8-cell mouse embryos after rapid addition and removal of cryoprotectant, DMSO at room temperature was similar to that (83.9%) after slow addition and removal of cryoprotectant at same temperature. 4. The survival rates of 1-, 2-, 4- and 8-cell embryos frozen-thawed slowly were 26.7, 76.4, 70.0 and 83.9%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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