Three Holstein steers, fitted with ruminal and duodenal cannulas, were used in a replicated $3{\times}3$ Latin square design to determine the digestibility of dietary nitrogen in total digestive tract by three methods, 1) mobile nylon bag (MNB); 2) total fecal collection (TFC); and 3) washed fecal sample after freezing and thawing through a sieve with a pore size of $45{\mu}m$ (WFS). A basal diet of oaten hay-barley was supplemented with one of the following protein sources; soybean meal, fish meal or blood meal. Steers were fed at a level of 2% of body weight. The experimental diets were contained approximately 1.85% nitrogen. There were no differences (p>0.05) among the diets on DM, NDF and nitrogen disappearances, and the diet results were pooled to assess the methods. Total tract disappearances of dry matter and neutral detergent fiber were 61.6, 71.1 and 78.9 and 25.3, 63.2 and 64.6 for MNB, TFC and WFS methods, respectively. The lower digestibility of DM and NDF in the MNB method could be a result of low ruminal incubation time. The TFC method had the lower (p<0.05) determination of nitrogen disappearance in the total digestive tract than the MNB and WFS methods. On the other hand, nitrogen disappearance in the total digestive tract determined by the WFS technique was comparable to that in MNB technique, as there was no significant difference (p>0.05) between the methods. It is shown that the disappearance of dietary nitrogen in the total digestive tract could be estimated in the intact animals by using washed fecal sample prior to freezing and thawing.
In order to study the frost heaving characteristics of soil stabilitized with a quick lime, a cement and a briquette ash, frost heaving tests were performed with 2 kinds of soil sampled at Chonbuk-Do area. Frost heaving of no-stabilizing soil compacted with water content greater than optimum water content was increased as the frost period was increased but in case of samples with water content smaller than optimum water content, the frost period gave no affect about increase and decrease of the frost heaving. Both frost heaving of stabilizing and no-stabilizing soil with water content greater than optimum water content was decreased with the increase of the repetition number of freezing and thawing. There was no increase or decrease of frost heaving in the frost heaving test after 5 times of freezing and thawing.
Solubilization pretreatments were conducted to enhance the anaerobic digestion of the waste activated sludge. Four pretreatment techniques including heating, sonication freezing and thawing, and enzyme addition were employed to solubilize the waste activated sludge under various conditions. Thermal pretreatment by heating showed the highest efficiency compared with other methods, and freezing and thawing was confirmed as a feasible alternative of solubilization as well as the pretreatment of dewatering. There is a clear correlation between the solubilization efficiency of the waste activated sludge and the gas production. Batch digestion results showed the cumulative gas production as much as four times after thermal pretreatment as compared with that by the control sludge without pretreatment. As a result, hydrolysis or solubilization pretreatment might play a significant role in the high rate digestion of the waste activated sludge.
In order to investigate the optimal factors for frozen dough production, the freezing and thawing condition such as temperature and time, storage period and the effect of ingredient addition were determined. A pre-fermentation of dough at 30℃ for 120 minutes was appeared to be the best for the production of frozen dough. The dough was frozen at -18℃ and then stored for 7 days. The quality of frozen dough was found to be optimal when thawed at 30℃ for 80 minutes. As ingredient of frozen dough, an addition of 3% of yeast and 4% of butter was good as well as the addition of skim milk and sugar in terms of fermentation capacity after thawing.
Durability of the polymer-modified mortars using the redispersible SBR and PAE powder-modified mortars were experimentally investigated. Results of a previous study were used to determine the mix proportion that optimized the strength, and the freezing-thawing resistence, the carbonation depth and the chloride intrusion depth of the mortar for various polymer-cement ratios were studied. After 300 freezing-thawing cycles, the rate of weight reduction decreased from 7 to below 2 $\%$ as the polymer-cement ratios increased from 0 to 15 $\%$, and, on the 150 cycle basis, durability index increased from 60 to 98. Carbonation depth decreased from initial value of 5.5 to about 2.5 mm and chloride intrusion depth did from 3.5 to 1.5 mm
본 연구는 도로 상의 눈이나 얼음의 제거에 사용되는 융빙제와 부식방지제 및 저부식성 제설제 그리고 이들의 조합에 대한 성능 및 구조물에 미치는 영향에 대하여 분석하였다. 동결융해 후 무게손실률은 저부식성 제설제가 융빙제와 부식방지제 및 이들의 조합보다 적게 나타났고, 상대동탄성계수 감소는 물, 저부식성 제설제 및 NaCl+JF-1004를 제외하고 융빙제와 부식방지제 및 이들의 조합물들은 동결융해 150사이클 이후에 급격히 떨어지는 것으로 나타났다. 또한 동결융해 후 콘크리트는 물을 제외하고 상당히 심한 표면 손상을 나타냈다. 융빙 효과는 융빙제와 저부식성 제설제 및 부식방지제의 조합하여 사용할 때가 이들 개별적으로 사용될 때보다 우수한 것으로 나타났고, 저부식성 제설제 및 부식방지제의 단독 사용은 초기 융빙 성능 뿐 아니라 지속성도 현저히 낮아 현장 적용에는 문제가 있는 것으로 판단된다. 강재부식시험의 pH는 저부식성 제설제와 NaCl+JF-1004의 pH는 알칼리성을 띠는 반면에 이외의 나머지에서는 중성에서 산성으로 변화해 가고 있는 것으로 나타났고, 염화나트륨의 조합물이 다른 수용액보다 상당히 빠르게 무게감량이 나타나 강재 부식속도가 빠르게 진행되는 것으로 나타났다. 이상으로부터 도로상의 눈이나 얼음의 제거를 위하여 융빙제의 조합물을 사용 시 최대한 도로 포장 및 교량에 손상이 적게 미치는 조성물에 대한 신중한 선택하여 사용해야 할 것이다.
This experiment was carried out to investigate the morphology of bovine embryos thawed after deep freezing at -196$^{\circ}C$ and the development of frozen-thawed embryos after in vitro culture in Ham's F-10 medium with 10% NBCS. The results obtained were summarized as follows: 1. The propotion of embryos which a, pp.ared mophologically normal was averaged 77.5% (79/102). 2. The morphologically normal rate of frozen-thawed blastocyst (78.6%) was higher than that of morula (76.7%), but there was no significant difference. 3. Normal development was observed in 20 of 68 embryos cultured for 24-72hr in medium and overall survival rate was 29.4%. 4. Survival rate fo blastocyst (33.3%) was higher than that of morula (25.7%).
This study was conducted to evaluate whether \"Royal jelly\" (RJ) added to Tris-buffer dilute contributed to supporting post-thaw viability and longevity of frozen canine spermatozoa. Two Japanese spitzs (2 to 4 years of age) were used as a semen donor. Semen was collected by manual masturbation and separated into 3 fractions. Only the sperm-rich fraction having sperm motility of more than 70%, containing sperm concentration of 2~4$\times$10$^{8}$ cells/ml and having dead or abnormal spermatozoa of less than 15% was used for the experiment. Each ejaculated semen was centrifuged at 400 $\times$ g for 5 min and then diluted in a Tris-buffer supplemented with 20 ml egg yolk (Ext I), 4% glycero1 and 1% Equex STM Paste (Ext II) or g1ycero1, Equex STM paste and RJ of various concentrations (Ext II-RJ). After freezing and thawing, viability of spermatozoa in Ext II -RJ containing 1% RJ immediately after thawing (67.5$\pm$9.6) was significantly lower than that of Ext II , Ext II -RJ containing 0.01 or 0.1% RJ (77.5$\pm$12.5, 78.7$\pm$8.2 and 80.0$\pm$6.3). However, Ext II-RJ containing 0.1% RJ yielded higher viability than Ext II, Ext II-RJ containing 0.01% at or 1% 1 h after thawing (69.5$\pm$8.1 vs. 55.0$\pm$12.9, 57.5$\pm$9.6 and 41.5$\pm$12.6; P<0.05). At 1 h after thawing, the viability of spermatozoa thawed in 7$0^{\circ}C$ (68.8$\pm$12.5) was significantly higher than that of spermatozoa thawed in 38$^{\circ}C$ (48.8$\pm$16.3), although there was no difference in the viability between both groups immediately after thawing (77.5$\pm$9.6 and 81.3$\pm$8.1). Post-thaw viability and longevity of post-thaw spermatozoa in Ext II-RJ containing 0.1% RJ was higher in those in Ext II at 1 h (65.0$\pm$12.9 vs. 42.5$\pm$12.6), 2 h (52.5$\pm$12.6 vs. 27.5$\pm$17.1) and 3 h (40.0$\pm$14.1 vs. 20.0$\pm$12.1) after thawing. These results indicated that addition of 0.1% af to Tris-buffer enhanced post-thaw viability and longevity of canine spermatozoa and this additive can be used for increasing the possibility of collision between spermatozoa and ova during insemination.emination.
We determined whether the ultrarapid freezing method is applicable to micromanipulated mouse embryos. One-cell mouse embryos were microinjected with MThGH gene. Nuclei from one-cell embryos of F1(C57BL$\times$CBA) mice were transplanted into enucleated one-cell embryos of ICR mice. The injected and nucleated embryos that developed to 2-cell stage were cryopreserved by ultrarapidfreezing. The embryos equilibrated in freezing medium(3 M DMSO+0.25 M sucrose+2% FBS in PBS) were directly immersed into liquid nitrogen and then thawed in 37$^{\circ}C$ water. Development rates of the microinjected and nuclear-transplanted embryos to blastocyst stage after ultrarapidly freezing and thawing were 31% and 55%, respectively. The frozen-thawed embryos were transferred to pseudopregnant recipient, which then gave birth to 17 offsprings. Twelve(14% of the transferred embryos) and five(20%) offsprings were derived from microinjected and nuclear-transplanted embryos, respectively. The results indicate that the DNA injected and nuclear-transplanted mouse embryos are cryopreservable at 2-cell stage by ultrarapid freezing method.
본 연구는 미세조작된 수정란의 초급속 재동결 후 발생능을 조사하기 위해서 수행하였다. 먼저 4세포기 생쥐 수정란으로부터 할구세포 한 개를 떼어내고 이들 수정란을 동결액에 넣어 상온에서 2.5분간 평형시킨 다음, 0.25ml straws에 넣어 곧바로 액체질소에 침지시켰다. 4세포기 수정란의 동결액으로는 4.0M(ethylene glycol 및 0.25M sucrose가 함유된 dPBS를 사용하였따. 상실배기 수정란의 동결을 위해서는 항동해제로 4.0M ethylene glycol 대신에 5.0M glycerol을 사용하였다. 융해후 biopsied 4세포기 수정란을 M16 배양액에서 상실배기까지 발달시킨 다음 상실배기용 동결액을 이용하여 초급속 재동결을 실시하였다. 재동결융해 후 발달한 biopsied 배반포기 수정란을 대리모에 이식하여 이들 수정란의 생존성을 검토하였다. 제1차 동결후 biopsied 수정란의 체외발달률은 78%로서 정상적인 수정란의 발달율(91%) 보다 낮은 성적으로 보여주었으나 (P<0.01), 이들 수정란의 이식 후 임신률은 각각 25 및 30%로서 두 실험군간에 차이가 인정되지 않았다. 그리고 biopside 상실배기 수정란의 초급속 재동결후 체외 발달률 및 임신률은 각각 89와 27%로서 biopsied 되지 않은 수정란의 성적 (각각 95 및 28%)과 유사하였다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때, 본 연구에서 사용된 초급된 재동결 과정이 미세조작된 생쥐수정란의 생존성에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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