'망종화'에서 콜히친 처리에 의한 효율적인 4배체 식물을 유도하고자 적정 식물체 부위, 적정농도 및 침지시간을 검토하였다. 종자의 발아율은 콜히친의 농도가 높을수록 또한 침지시간이 길수록 저하되었다. 대조구를 제외한 16개의 처리구에서 총 453개체가 발아된 반면 4배체는 유도되지 않았다. 기내 배양 중인 줄기 절편체의 식물체 재생율은 콜히친 처리농도 0.01%에서 최고를 나타내다가 0.1% 농도 이상으로 높아질수록 낮았다. 적정식물체 부위는 줄기 절편체로 나타났다. 4배체 식물은 콜히친을 0.05% 이상으로 6시간 침지처리 하였을 때 얻을 수 있었고, 특히 0.05%, 12시간 침지처리에서 식물체의 재생수 대비 약 42%의 높은 획득율을 보였다. Flowcytometry에 의해 DNA함량의 배가여부를 확인한 결과, G1 phase의 DNA 함량 peak가 2배체에서 94.5, 4배체는 192.5로, DNA가 배가됨을 확인할 수 있었다. 또한 공변세포 당 엽록체 수는 2배체가 약 10개인 것에 비해 4배체는 17~19개로 2배체보다 약 1.7~1.9배 정도 많았다.
Soo-Jeong Kwon;Young-Ho Choi;Hee-Ock Boo;Sun-Hee Woo;Hag-Hyun Kim
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2022년도 추계학술대회
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pp.161-161
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2022
This study aimed to investigate the effect of growth regulators on the formation of the organ in the in vitro propagation of diploid and tetraploid Codonopsis lanceolata, and gain the basic data for in vitro propagation of superior C. lanceolata. In the case of diploid C. lanceolata, the highestshoot formation (3.0) was observed at 0.5 mg·L-1 addition medium with low IBA concentration. The shoot formation of tetraploid C. lanceolata was suppressed by addition of IBA. In the addition of lAA, the shoot formation of diploid C. lanceolata was slightly higher at 1.0 mg·-L-1 addition medium than that of control group, whereas tetraploid C. lanceolata showed the highest number (5.4) from control group. In the case of NAA, the shoot formation of diploid and tetra C. lanceolata tended to decrease at higher concentration. In terms of BA addition, the shoot formation of diploid C. lanceolata was increased by the addition of BA, whereaswhile the growth of shoot was decreased by the addition of BA. In the case of tetraploid C. lanceolata, shoot was found to be formed by the addition of low concentration of BA, and the growth of shoot was inhibited with the higher addition concentration of BA. With the addition of kinetin, the shoot formation of diploid C. lanceolata was slightly higher than that of control group, and the formation of adventitious root was highest (5.3) in the control group. In the case of tetraploid C. lanceolata, the shoot formation was similar in all treatment groups, but the formation and growth of adventitious root were significantly lower than that of diploid C. lanceolata. In the case of TDZ addition, the shoot formation of diploid C. lanceolata showed the pronounced results at 5.0 mg·L-1 addition medium, and the growth of shoot was inhibited by the addition of TDZ. The formation of adventitious root was 5.3 and 4.9 in the control group and 0.1 mg·L-1 addition medium respectively. The formation of the shoot of tetraploid C. lanceolata showed better results with the higher concentration of TDZ, and the growth was better with the lower concentration of TDZ. The formation and growth of adventitious root were significantly slower than that of diploid C. lanceolata.
용천뽕에 개량뽕을 교배하여 채종한 종자가 발아하는 생장점에 0.2% colchicine용액을 적하처리하여 4배성인 4원뽕 11호, 12호, 13호 및 14호를 창성하였으며 그 주요특성은 다음과 같다. 1. 이른봄의 발아개엽기는 개량뽕과 비슷한 중뽕이다. 2. 잎은 대형 또는 중형의 심장형이며 표면은 강강감이 있으며, 잎두께, 잎면적중, 수분율이 2배체에 비하여 증가 되었다. 3. 2배체인 교배모품종에 비하여 평균가지길이는 짧고 마디사이길이와 측지수는 두 모품종의 중간정도이었다. 4. 가지끝마름율은 1.6~2.5%로서 강한 내동성(cold hardiness)을 나타내고 있으므로 내동성이 강한 3배체 육성소재로 유망하다.
Juniperus chinensis 7변종(變種)의 세포학적(細胞學的) 특성(特性)을 조사한 결과 J. chinensis var. procumbens, J. chinensis var. kaizuka와 J. chinensis var. aureo-variegate는 2n=44인 tetraploid이고, 여타 4개변종(個變種)은 2n=22인 diploid이다. 이들 tetraploid 변종(變種)들은 기공(氣孔)이 2n에 비하여 18.4% 크고, meiosis시(時)의 염색체(染色體) 행동(行動)이 불규칙(不規則)한 핵판(核板)이 관찰되었다.
This experiment was done to determine the optimum conditions for the induction of tetraploidy in Panax ginseng C. A. Meyer using bud length, temperature and plant growth regulator pretreatments. Highest callus formation was obtained when the medium was inoculated with flower bud in the size of 2-3 mm in length. The optimum temperature for the callus formation was high when treated at $4^{\circ}C$ for 4-5 days. Among the treatments of growth regulators and different concentration, highest callus formation was observed in combination of 5 mg/L 2,4-D and 1 mg/L kinetin for P. ginseng. As a result of flow cytometer analysis, all 7 adventitious roots were confirmed as tetraploidys. Cytological analysis revealed that the chromosome number of tetraploid roots was 96, while that of diploid roots was 48. Tetraploid ginseng roots were inoculated to flower bud size of 2-3 mm in length. The callus formation was optimum when treated with 1 mg/L 2,4-D at $4^{\circ}C$ for 5 days. Compared with control roots, tetraploid roots were thicker and longer and had few lateral branches. Fresh weight of tetraploid roots was relatively higher than the control roots.
Kwon, Soo Jeong;Roy, Swapan Kumar;Cho, Seong-Woo;Kim, Hag Hyun;Boo, Hee Ock;Song, Beom-Heon;Woo, Sun-Hee
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.132-132
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2017
Plants, including Platycodon grandiflorum have been used globally across varied cultures as a safe natural source of medicines. From time immemorial, humans have relied on plants that could meet their basic necessities such as food, shelter, fuel and health. This study was executed to profile proteins from the hormone induced diploid and tetraploid roots using high throughput proteome approach. Two dimensional gels stained with CBB, a total of 64 differential expressed proteins were identified from the diploid root using image analysis by Progenesis SameSpot software. Out of total differential expressed spots, 20 differential expressed protein spots ( ${\geq}1.5-fold$) were analyzed using LTQ-FTICR MS whereas a total of 13 protein spots were up regulated and 7 protein spots were down-regulated. However, in the case of tetraploid root, a total of 78 differential expressed proteins were identified from tetraploid root of which a total of 28 differential expressed protein spots (${\geq}1.5-fold$) were analyzed by mass spectrometry whereas a total of 16 protein spots were up regulated and a total of 12 protein spots were down-regulated. However, proteins identified using iProClass databases revealed that the identified proteins from the explants were mainly associated with the nucleic acid binding, oxidoreductase activity, transporter activity and isomers activity. The exclusive protein profile may provide insight clues for better understanding the characteristics of protein function and its metabolic activity that can help for the development of the nutritional and breeding aspects of this economically important medicinal plant.
Kwon, Soo Jeong;Roy, Swapan Kumar;Yoo, Jang-Hawan;Cho, Seong-Woo;Kim, Hag Hyun;Boo, Hee Ock;Woo, Sun-Hee
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.123-123
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2017
In spite of the potential medicinal significance and a wide range of pharmacologic properties of Platycodon grandiflorum, the molecular mechanism of its roots is still unknown. The present study was conducted to profile proteins from 3, 4 and 5 months aged diploid and tetraploid roots of Platycodon grandiflorum using high throughput proteome approach. Two-dimensional gels stained with CBB, a total of 68 differential expressed proteins were identified from the diploid root out of 767 protein spots using image analysis by Progenesis SameSpot software. Out of total differential expressed spots, 29 differential expressed protein spots (${\geq}2-fold$) were analyzed using LTQ-FTICR MS whereas a total of 24 protein spots were up-regulated and 5 protein spots were down-regulated. On the contrary, in the case of tetraploid root, a total of 86 differential expressed proteins were identified from tetraploid root out of 1033 protein spots of which a total of 39 differential expressed protein spots (${\geq}2-fold$) were analyzed using LTQ-FTICR MS whereas a total of 21 protein spots were up-regulated and a total of 18 protein spots were down-regulated. It was revealed that the identified proteins from the explants were mainly associated with the nucleotide binding, oxidoreductase activity, transferase activity. Taken together, the identified proteins may be helpful to identify key candidate proteins for genetic improvement of plants.
Park, S.M.;Song, S.J.;Uhm, S.J.;Cho, S.G.;Park, S.P.;Lim, J.H.;Lee, H.T.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권12호
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pp.1641-1646
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2004
The objective of this study was to generate transgenic mice expressing human resistin gene by using the tetraploidembryonic stem (ES) cell complementation method. Human resistin gene was amplified from human fetal liver cDNA library by PCR, cloned into $pCR^{(R)}$ 2.1 $TOPO^{(R)}$ vector and constructed in pCMV-Tag4C vector. Mammalian expression plasmid containing human resistin was transfected into D3-GL ES cells by Lipofectamine 2,000, and then after 10-12 days of transfection, the human resistin-expressing cells were selected with G418. In order to produce tetraploid embryos, blastomeres of diploid embryos at the two-cell stage were fused with two times of electric pulse using 60 V 30 $\mu$sec (fusion rate: 2,114/2,256, 93.5%) and cultured up to the blastocyst stage (development rate: 1,862/2,114, 94.6%). The selected 15-20 ES cells were injected into tetraploid blastocysts, and then transferred into the uteri of E 2.5 d pseudopregnant recipient mice. To investigate the gestation progress, two E 19.5 mused fetuses were recovered by Cesarean section of which one fetus was confirmed to contain human resistin gene by genomic DNA-PCR. Therefore, our findings demonstrate that tetraploid-ES mouse technology can be considered as a useful tool to produce transgenic mice for the rapid analysis of gene function in vivo.
This study was conducted to find out the effective induction method of tetraploid plants to obtain potential data for cultivating superior varieties by colchicine treatment. The seed germination were decreased by the higher concentration of colchicine treatment and longer soaking time. A total of 907 individuals were germinated in 16 treated plots except control (untreated plot) and 28 tetraploids were induced which was about 3.1% of the number of seed germinated. The plant regeneration rate by colchicine treatment on explant of Prunella vulgaris for. albiflora Nakai under in vitro culture was decreased with the higher concentration of colchicine. While a total of 312 individuals were regenerated in all treatments, the explant was soaked in more than 0.05% for over 1 hour, tetraploid could be obtained. In particular, for the soaking treatment in 0.05% for 6 hours and 12 hours, 37 tetraploids were induced, which was about 57.8% of the number of plant regenerated. In accordance with the observation on doubling of DNA contents in leaf in order to identify polyploid, the peak DNA content of G1 phase was 101.3 for diploid and 197.2 for tetraploid. The result confirmed the doubling of DNA content. Furthermore, the number of chloroplasts per guard cell depending on polyploid was around 10 in diploid and 19.3 in tetraploid, which was around 1.9 times as much as diploid.
배수성에 따른 심비디움 꽃 향기의 변화를 알아보기 위해 전자코를 이용하여 C. Golden Elf 'Sundust'의 2배체와 4배체 꽃을 PCA(주성분분석)와 DFA(판별함수분석)로 분석한 결과, 꽃 한 송이의 향기는 2배체에 비해 4배체에서 강하게 나타났고, 화기 조직별 향기는 예주가 가장 강하게 나타났으며 꽃잎과 설판은 근접한 패턴을 보였다. 배수성에 따른 심비디움의 분화수명의 차이를 알아보기 위해 C. Golden Elf 'Sundust'와 C. Elma 'Orient Toyo' 분화의 화경을 조사한 결과 개화기간뿐 만 아니라 화경당 화수, 화경장에서 모두 차이가 나타나지 않았다. 본 연구는 심비디움을 비롯한 다른 종류의 난과식물 배수체 육종에 있어 기초자료로 유용하게 활용 될 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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