Lee, Hansol;Shin, Won-Sub;Kim, Young Uk;Jeon, Seungjib;Kim, Minsik;Kang, Nam Kyu;Chang, Yong Keun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제30권10호
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pp.1597-1606
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2020
Transcription factor engineering to regulate multiple genes has shown promise in the field of microalgae genetic engineering. Here, we report the first use of transcription factor engineering in Chlorella sp. HS2, thought to have potential for producing biofuels and bioproducts. We identified seven endogenous bZIP transcription factors in Chlorella sp. HS2 and named them HSbZIP1 through HSbZIP7. We overexpressed HSbZIP1, a C-type bZIP transcription factor, in Chlorella sp. HS2 with the goal of enhancing lipid production. Phenotype screening under heterotrophic conditions showed that all transformants exhibited increased fatty acid production. In particular, HSbZIP1 37 and 58 showed fatty acid methyl ester (FAME) yields of 859 and 1,052 mg/l, respectively, at day 10 of growth under heterotrophic conditions, and these yields were 74% and 113% higher, respectively, than that of WT. To elucidate the mechanism underlying the improved phenotypes, we identified candidate HSbZIP1-regulated genes via transcription factor binding site analysis. We then selected three genes involved in fatty acid synthesis and investigated mRNA expression levels of the genes by qRT-PCR. The result revealed that the possible HSbZIP1-regulated genes involved in fatty acid synthesis were upregulated in the HSbZIP1 transformants. Taken together, our results demonstrate that HSbZIP1 can be utilized to improve lipid production in Chlorella sp. HS2 under heterotrophic conditions.
Im, Kyung Hoan;Baek, Seung A;Choi, Jaehyuk;Lee, Tae Soo
Mycobiology
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제47권4호
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pp.494-505
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2019
In this study, the antioxidant, anti-xanthine oxidase, anti-melanogenic and anti-wrinkle effects of methanol (ME) and hot water (HE) extracts from the fruiting bodies of Phellinus vaninii were investigated. The 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl free radical scavenging activity of 2.0 mg/mL HE (95.38%) was comparable to that of butylated hydroxytoluene (96.97%), the reference standard. The hydroxyl radical scavenging activities of ME (98.19%) and HE (97.55%) were higher than that of butylated hydroxytoluene (92.66%) at 2.0 mg/mL. Neither ME nor HE was cytotoxic to murine melanoma B16-F10 cells at 25-750 ㎍/mL. Although the xanthine oxidase (XO) inhibitory effects of ME and HE were significantly lower than that of allopurinol, the values were higher than 84 percent. The in vitro tyrosinase inhibitory activities of ME and HE were comparable to kojic acid at 2.0 mg/mL. The cellular tyrosinase and melanin synthetic activities of ME and HE on B16-F10 melanoma cells at 500 ㎍/mL were higher than arbutin, indicating that the inhibitory effects of arbutin on the tyrosinase and melanin synthesis were higher than those of ME and HE. The collagenase inhibitory activity of HE was comparable to EGCG at 2.0 mg/mL, however, the elastase inhibitory activity of ME and HE was lower than EGCG at the concentration tested. The study results demonstrated that the fruiting bodies of Ph. vaninii possessed good antioxidant, anti-xanthine oxidase, cell-free anti-tyrosinase, cellular anti-tyrosinase, anti-collagenase, and moderate anti-elastase activities, which might be used for the development of novel anti-gout, skin-whitening, and skin anti-wrinkle agents.
기존의 문헌에서는 poly(3-hexylthiophene)(P3HT) 기반의 블록공중합체를 합성하기 위해서 최소 4-5단계 이상의 복잡한 공정을 거쳐야 했고, 일반적으로 분자량, 분자량 분포 및 블록의 비를 조절하기 위해서 단량체 전환율 및 반응 시간을 계속해서 모니터링 해야 한다. 또한, 여러 가지 이유에서 합성 스케일이 수 mg에서 수 g으로 제한되었다. 본 연구에서는 음이온 중합법을 이용해서 P3HT-b-poly(4-vinylprydine) (P4VP)를 오직 2단계로 중합할 수 있었으며, 중합 스케일은 수십 g 정도가 가능하였다. 반응 도중 단량체 전환율 및 농도를 계속 모니터링 해야 하는 번거로움 없이 초기 단량체 당량비만으로 블록 비율과 분자량 분포를 정밀 조절할 수 있었다. 만들어진 P3HT-b-P4VP를 친수성 및 소수성 용매에 녹여 분자 거동을 살펴보았다. 용액의 특성이 용액 속 미셸 구조와 필름 코팅 후 모포로지에 영향을 미친다는 것을 확인했다. P3HT-b-P4VP의 물리적 특성은 적외선-자외선 분광분석법, 원자힘현미경 및 자외선 광전자 분광분석법을 이용하여 평가하였다.
Objective: Methionine (Met) is involved in methyl group transfer besides protein synthesis. As the availability is limited and cost is high for synthetic Met, reductions in its inclusion in broiler diet may be possible by supplementing the low Met diets with methyl donors (MD) like betaine (Bet), folic acid (FA), vitamin B12 (B12), and biotin (Bio). An experiment was conducted to study the effects of supplementing the MD on performance (average daily gain [ADG], daily feed intake, feed efficiency [FE]), anti-oxidant variables, immune responses and serum protein concentration in broilers fed sub-optimal concentrations of dietary Met. Methods: Maize-soybean meal diet was used as control (CD). Different MD like Bet (0.2%), B12 (0.1 mg), FA (4 mg), or Bio (1.5 mg/kg) were supplemented to basal diet (BD) having no supplemental Met. The BD without MD was kept for comparison. Each diet was fed ad libitum to 10 replicates of 25 chicks in each from 1 to 42 d of age. Results: At the end of experiment, the ADG in MD group was higher than BD and lower than CD. The FE improved with FA or Bet compared to the BD. Breast meat weight was higher in Bet compared to the BD, while it was intermediate between BD and CD in other groups. The lipid peroxidation reduced with Bio, B12, or Bet, while the glutathione peroxidase activity improved with Bio or B12 compared to the BD. Lymphocyte proliferation improved with Bet compared to the BD. The serum protein concentrations increased with FA, Bio, or Bet compared to those fed BD. Conclusion: It can be concluded that the ADG can be improved partially with supplementation of MD while the FE improved with FA or Bet. Some MD also reduced the stress indices and improved immune responses compared to the BD fed broilers.
본 연구는 그라비올라 잎 조다당 분획물(ALP)의 멜라닌 저해활성에 관하여 알아보기 위하여 B16F10 melanoma 세포의 세포 생존율, tyrosinase 저해활성, 멜라닌 함량, 멜라닌 생합성에 관여하는 단백질(TRP-1, TRP-2, tyrosinase, MITF 및 p-CREB)의 발현을 관찰하였다. ALP의 tyrosinase 활성 저해능을 측정하였을 때, 농도 의존적으로 감소하는 것을 알 수 있었다. 또한 B16F10 세포에 ALP를 처리하여 멜라닌 활성 저해능에 관하여 알아봤을 때, tyrosinase, 멜라닌 함량이 농도 의존적으로 줄어드는 것을 확인하였다. 또한 ALP가 미백과 관련된 TRP-1, TRP-2, tyrosinase, MITF 및 p-CREB의 단백질 발현양이 농도의존적으로 감소되는 것으로 관찰되었다. 따라서 ALP는 멜라닌 저해 활성을 효과적으로 나타낸 것으로 보아 기능성 미백 화장품 소재로서의 활용 가능성을 확인할 수 있었다.
This research is to investigate the reaction kinetics by air-lift bioreactor using calcium hydroxide, the neutralization agent and immobilization media, for removing ethylene glycol remained after chemical pretreatment. It was found that the optimum hydraulic retention time was obtained as 24.2hours at the optimum F/M ratio of 1.32kg-$TCOD_{Mn}$/day.kg-MLVSS, and then, infiuent $TCOD_{Mn}$ and MLVSS concentration were 3,290mg/l and 2,472mg/l, respectively. During the steady state, the kinetics constants such as maximum specific substrate removal rate, half saturation velocity coefficient, yield coefficient and endogenous respiration coefficient were estimated in the base of $TCOD_{Mn}$ as substrate concentration. And they were 1.47day$^{-1}$, 3.95mg/l, 0.391 and 0.092day$^{-1}$, respectively. And also, the oxgen use coefficients for cell synthesis, a', and energy of maintenance, b', were obtained as 0.4kg-O$_{2}$/kg-$TCOD_{Mn}$ and 0.056day$^{-1}$, at the steady state by the experimental result of oxygen uptake rate.
Royal jelly composes of many components, especially protein. Protein is a major factor which cause allergy. We focused on water soluble royal jelly (WSRJ) that was removed allergy - inducing protein. 10-hyroxy-2-decenoic acid content of WSRJ is 2.42 g/100 g, which is double compared to that of lypophilized RJ. To further access WSRJ as a cosmetic ingredient and potential external treatment for topical use, we investigated its ability to inhibit tyrosinase activity and melanin biosynthesis on melanogenesis in B16F1 melanoma cells. We found that WSRJ increased the cell viability in B16F1 melanoma cell and WSRJ (1~10 mg/ml) inhibited melanin synthesis in with 10 nM ${\alpha}$-melanocyte-stimulating hormone (${\alpha}$-MSH) for 48 h. WSRJ inhibited direct tyrosinase activity, which decreased melanin synthesis in ${\alpha}$-MSH stimulated B16F1 melanoma cells. Thease findings suggest that WSRJ induces the down regulation of melanogenesis by inhibiting tyrosinase activation.
The present study was performed to evaluate the relationship between the neurotoxicity of acrylamide and the differential gene expression pattern in mice. Both locomotor test and rota-rod test showed that the group treated with higher than 30 mg/kg/day of acrylamide caused impaired motor activity in mice. Based on cDNA microarray analysis of mouse brain, myelin basic protein gene, kinesin family member 5B gene, and fibroblast growth factor (FGF) 1 and its receptor genes were down-regulated by acrylamide. The genes are known to be essential for neurofilament synthesis, axonal transport, and neuroprotection, respectively. Interestingly, both FGF 1 and its receptor genes were down-regulated. Genes involved in nucleic acid binding such as AU RNA binding protein/enoyl-coA hydratase, translation initiation factor (TIF) 2 alpha kinase 4, activating transcription factor 2, and U2AF 1 related sequence 1 genes were down-regulated. More interesting finding was that genes of both catalytic and regulatory subunit of protein phosphatases which are important for signal transduction pathways were down-regulated. Here, we propose that acrylamide induces neurotoxicity by regulation of genes associated with neurofilament synthesis, axonal transport, neuro-protection, and signal transduction pathways.
Tolerance to toxic effects of cadmium (Cd), including lethality has been shown following pretreatment with cadmium and zinc. This study was designed to determine if tolerance also develops to Cd-induced hepatotoxicity and renal toxicity. Three groups of rats (A, B, C), each consisting of 108 rats, were studied and each group was divided into three subgroups (1, 2, 3), 12 rats for each subgroup. Rats were subcutaneously pretreated with saline (A), CdCl$_2$ (0.5 mg/kg, B), and ZnCl$_2$ (13.0 mg/kg, C) during time periods of 5 days. At the end of the period, rats were challenged with CdCIa (3.0 and 6.0 mg/kg) by intraperitoneal injection. As for the cadmium levels in rat tissues after pretreatments, it was highest in the liver. Then kidney, heart, blood and muscle followed it in that order. After 24, 48 and 96 hours of intraperitoneal injection by challenge doses the concentration of cadmium in liver and kidney increased proportionally to the increase of challenge dosage. However metallothioneins in liver and kidney were increased by the pretreatment of cadmium and zinc. These data indicate the liver is a major target organ of acute Cd poisoning, and suggest that cadmium induced hepatic injury, via release of Cd-MT, may play and important role in the nephrotoxicity observed in response to short-term exposure to cadmium. This result suggests that increasing cadmium concentrations, gradually accumulating in liver and kidney as the result of the pretteatmerit, served to induced the synthesis of metallothionein, thus making them resistant to the challenge from cadmium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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