박하(Mentha piperita) 세포현탁배양에(-)-menthol 생합성 중간체를 투여하여 배양된 세포의 대사경로를 연구하였다. (-)-Limonene을 투여 하였을 때 이는 다른 대사물로 변환되지 않는 것으로 관찰 되었다. (+)-Pulegone은 (+)-isomenthone 및 (-)-menthone으로 변환되었으며, (-)-menthone은 (-)-menthol로 변환되었다. 이 실험은 현탁배양세포가 대부분의 생합성 활성을 유지하고 있으며 (-)-limonene hydroxylase의 활성이 제한적임을 보여 주었다. (-)-Isopiperitenone을 투여하였을 때는 (+)-pulegone, piperitenone, (-)-7-hydroxyisopiperitenone, (R)- 및 (S)-6-hydroxyisopiperitenone이 생성되었다.
Park, Eun-Jung;Roh, Jin-Kyu;Kim, Young-Hun;Park, Kwang-Sik
Toxicological Research
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제26권4호
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pp.267-273
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2010
As the use of carbon fullerene increases in the chemical industry, the concern over its biological and toxicological effects is also increasing. In this study, the suspension of carbon fullerene (C60) in phosphate buffered saline was prepared and toxicity was investigated using cultured RAW 264.7 and in intraperitoneally injected mice, respectively. The average size of carbon fullerene in the suspension was $53.7{\pm}26.5nm$ when determined by particle size analyzer. Cell viability was significantly decreased by the exposure of carbon fullerene ($0.25\sim2.00\;{\mu}g/ml$) for 96 hrs in the cultured RAW 264.7 cells. Intracellular reduced glutathione (GSH) level was also decreased compared to the level of the non-treated control group during the exposure period, while the level of nitric oxide was increased. When mice were intraperitoneally injected with carbon fullerene, serum cytokine levels of IL-1 and IL-6 were increased with the increased expression of inflammatory genes in peritoneal macrophage and T cell distribution in blood lymphocytes. The results suggested inflammatory responses were induced by carbon fullerene.
Streptanthus 조직 배양 세포를 사용하여 사부를 순수분리 시키고, 분리된 사부에서 사부 하적에 대한 기작을 규명하기 위해 다음 연구를 하였다. 유조직 세포는 0.2% macerase 와 0.03% cellulase의 가수분해 효소로 처리하여 원형질체를 얻었고, 분화된 세포에서는 0.03% cellulase + 0.02% pectinase + 0.2% macerase + 0.025% rohamet PC로 가수분해시켜서 순수한 사부 세포와 사부 원형질체와 반세포의 원형질체를 분리하였다. 분리된 유조직 세포와 반세포의 원형질체에서는 단당류인 포도당을 수송시키나, 설탕은 수송시키지 못했다. 반면 분리된 사부 세포는 설탕을 능동수송 시키나 포도당은 수송시키지 못했다. 이는 설탕의 사부 하적은 반세포 없이도 가능하며, 반세포는 설탕 운반체가 없어서 설탕을 직접 수송할 수 있는 능력이 없다는 것을 보여주는 것이다. 그리고 사부 세포에서 설탕의 수송은 에너지대사에 의존하는 능동수송으로 나타났다.
Heteroplasmic rice plastid transformant was generated using suspension cells as bombardment materials. PCR analyses confirmed incorporation of aadA and cp4-epsps genes into the rice plastid genome by homologous recombination events via the flanking sequences of the trnI and trnA. Transplastomic calli were actively proliferated when cultured on AAM2 medium supplemented with various concentrations (500-3000 mg/L) of streptomycin in dark condition, and transplastomic suspension cells showed resistance to nonselective herbicide, glyphosate. Through 'agarose pie selection' method, heteroplastomic calli, containing considerably high level of transplastome and expressing the CP4 EPSPS protein, were obtained. They were further regenerated to green shoots with healthy roots.
For the production of digoxin by using biotransformation in suspension-cultured Digita- lis lanata cells, a two-stage culture process was optimized. Modified Murashige and Skoog medium was used for growth in the first stage and the cells were transferred to glucose solution for the production of digoxin from digitoxin via biotransformation in the second stage. When the cells were cultivated for 10 days in the growth period, 12$\beta$-hydroxylation capacity was the best. It was found that the optimum amount of digitoxin as substrate was 400 mg/l with initial cell density of 21%. Maximum productivity was achieved 5 days after transfer of cells to production medium. Sucrose and fructose provided similar digoxin yield as that in glucose, and 6% was proved to be the best glucose solution. Most of the components of modified MS medium except phosphate reduced the efficiency of digoxin formation. Besides, peptone and beef extracts inhibited 12$\beta$-hydroxylation, while promoting glucosylation. Finally, it was apparent that light enhanced the formation of digoxin significantly.
쑥의 어린 잎은 민간요법에서 복통이나 구토, 월경불순 등의 치료에 사용되어 온 귀중한 약재로 최근에는 항 말라리아 효과를 나타내는 artemisinin 성분이 주목을 받고 있다. 국내에 자생하는 야생 쑥에 대한 자원식물로써의 가능성을 제시하기 위하여 야생쑥과 이로부터 유도한 기내배양세포로부터 artemisinin의 생합성 여부를 조사하였다 그 결과 그 동안 개똥쑥에서만 존재하는 것으로 알려진 artemisinin이 국내 야생 쑥에서도 생합성되는 것을 확인하였다. Artemisinin 및 유용한 이차대사산물의 기내 배양을 통한 대량생산의 가능성을 조사하기 위해 쑥의 어린 식물체로부터 조직 및 현탁 세포배양계를 확립하였다. Callus와 현탁배양 세포의 유도 및 성장은 $0,2\;mg/{\ell}$ 2,4-Df와 $0.1\;mg/{\ell}$ BAP가 처리되고 2% sucrose를 첨가한 MS배지에서 가장 좋게 나타났다. 이들 callus와 현탁배양세포 그리고 식물체에 존재하는 다양한 대사물질들을 비교하기 위해 TLC분석을 실시한 결과, 기내배양세포에서 특이적인 페놀 화합물, 터펜화합물, 아미노산 등이 존재하고 있는 것을 확인하였다. 이러한 결과는 쪽의 기내 배양계를 통해 다양한 유용물질의 대량생산에 대한 가능성을 제시하고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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