The experiments were conducted to establish the in vitro culture system of apple rootstock M.9. The meristem tissue of M.9 were pre-treated in antiox: dant solution containing 100 mgL$^{-1}$ ascorbic acid and 150 mgL$^{-1}$ citric acid for 30 minutes, transferred to the MS liquid medium added with 0.1 mgL$^{-1}$ IBA, 0.5 mgL$^{-1}$ GA, and 30 gL$^{-1}$ sucrose, which shaked by 50 rpm for 2 weeks, and then, cultured in same composition of MS agar medium. This treatment stimulated shooting from the tissue, the most favorably, compared with other treatments. All young shoots produced normal roots when they were shake-cultured on the 1/2MS liquid medium added with 0.5 mgL$^{-1}$ IBA, 30 gL$^{-1}$ sucrose and 1,000 times diluted solution of Hormex by 50 rpm for one week, and subsequently transferred to the 8 gL$^{-1}$ agar medium of the same composition as pre-culture medium minus Hormex.
The disc plate and frame type modules for reverse osmosis were developed using three different types of baffles: linear (Type 1), curved (Type 2) and parallel shapes (Type 3). Separation performance tests were carried out for the modules using NaCl and sucrose solutions under the various concentrations and operating pressures. The permeation flux and solute rejection ratio for Type 3 module were the highest within operating pressure (35bar) and flow rate (6 l/min). The flux improvement ratio of Type 2 or 3 to Type 1 for NaCl solution decreased as operating pressure increased: flux improvement ratios of Type 3 for 1wt% of NaCl solution were about 100 and 10% at 10 and 35bar, respectively. However, the flux improvement ratio for sucrose solutions varied with the operating pressure and concentration. The permeation flux for Type 3 depended on the flow rate linearly, which is higher than that of turbulent flow region in the smooth channel.
This study describes the successful establishment of a cryopreservation protocol for Citrus limon cultivars: 'Frost Eureka limon' and 'Cook Eureka limon', using a droplet-vitrification method. The shoot tips that were excised from in vitro grown seedlings of the two cultivars were preserved in liquid nitrogen (LN) and successfully regenerated into whole plants. Excised shoot tips were pre-cultured for 1 or 2 days in 0.3 M and 0.5 M sucrose solutions at $25^{\circ}C$ and incubated in a loading solution (LS) composed of 17.5% glycerol + 17.5% sucrose in Murashige and Skoog (MS) medium for 40 min at $25^{\circ}C$. Prior to direct immersion in LN for 1 h, the shoot tips were dehydrated with plant vitrification solution 2 (PVS2) at $0^{\circ}C$ or PVS3 at $25^{\circ}C$. The frozen shoot tips were re-warmed and unloaded with 1.2 M sucrose in $\text\tiny{^1/_2}$ MS for 30 min at $25^{\circ}C$. Shoot tips were post-cultured overnight on survival medium and then micrografted onto 'trifoliate orange' (Poncirus trifoliate (L.) Raf. seedling rootstocks for recovery and to produce whole plants. The highest regrowth rates were 53.5% and 50.3% for cryopreserved shoot tips of 'Frost Eureka limon' and 'Cook Eureka limon', respectively, when pre-cultured in 0.3 M and 0.5 M sucrose concentrations in a sequencing manner, with LS and treated with PVS2 for 60 min at $0^{\circ}C$. We also investigated whether the ammonium ion concentration on post-culture medium affected the viability of the cryopreserved Citrus shoot tips. The viability of cooled samples, following culturing on woody plant media (WPM) containing $\text\tiny{^1/_4}$ ammonium nitrate overnight before micrografting, was the highest (70.3%) in 'Frost Eureka limon'. The study described here is a cost-effective and safe method to conserve Citrus fruit cultivars, for the improvement and large-scale multiplication of fruit plants and for breeding disease resistance.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2021.04a
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pp.36-36
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2021
Cryopreservation has been broadly used as an efficient method for a long-term conservation for many types of plants especially vegetatively propagated plants. Among several cryopreservation methods, a droplet-vitrification was the most widely applicable and efficient method. Studies have developed protocols for strawberry using droplet-vitrification method and suggested the practical use of the protocol for large number of germplasm with a little modification. In this study, the droplet vitrification method of shoot tip has been tested on 31 accessions provided around the world. Shoot tips were precultured on Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with 0.3~0.5M sucrose. Precultured explants were osmoprotected with loading solution, 35% of PVS3 (C4, 17.5% glycerol and 17.5% sucrose) for 40 min and exposed to dehydration solution, PVS3 (B1, 50% glycerol and 50% sucrose) for 60 min. Then, the explants were transferred onto droplets containing 2.5 uL PVS3 on sterilized aluminum foils prior to direct immersion in liquid nitrogen (LN) for 1hr. The cryopreserved shoot tips were rapidly warmed in a water bath at 40C and then unloaded in MS with 0.8M sucrose for 40 min. The shoot tips were cultured in NH4NO3-free MS post culture medium for 2 weeks. Subsequently, the explants were moved to the MS medium for 6 weeks and evaluated the regrowth rate. By this droplet-vitrification protocol, twenty-four accessions showed at least 40% regrowth rate. Out of 24 accessions, 'Nonsan1ho' had the highest regeneration rate of 85.8% and 'Jumbo pureberry' had the lowest with 42.1%.
Agrobacterium sp. ATCC 31750( formerly Alcaligenes faecalis subsp myxogenes) was used to produce curdlan. Since the curdlan is secondary metabolite, it is important for curdlan production to increase cell concentration. The fedbatch operation was used to increase cell concentration with addition of carbon and nitrogen sources. When the initial sucrose concentration was 20g/L, it was consumed in 24 hrs and the cell concentration was 6g/L in a batch culture. The sucrose solution(200g/L) was fed to control the sucrose concentration above 10g/L.
The in vitro culture of rice panicles is a culturing technique only panicle without other organs in culture solution containing organic substance, so that would be useful to study how assimilate supply affects grain development and maturation. To find the optimum stage for in vitro culture, rice panicles grown in greenhouse were sampled periodically after anthesis and cultured in nutrient medium. The panicles older than 1 weeks after anthesis had produced normal grains. Grain-filling was apparently dependent upon sucrose concentration (8-12 %) in medium, but not affected by nitrogen concentration supplied with glutamine. As far as rice panicle was supplied with sucrose and N in nutrient medium, grains continued accumulation of dry matter and maturation regardless to light condition. Considerably, grain-filling was improved when panicles were positioned horizontally inside flask, so that each grain was partially submerged to nutrient medium.
This study was performed to evaluate the effects of Quibitang in the chronic mild stress(CMS) model of depression in rats. Chronic exposure to mild unpredictable stress was found to depress the consumption of sucrose solution in rats for 8 weeks. These CMS-treated rats were stratified into Quibitang gruop and saline group. And control rats were also stratified into Quibitang group and saline group. The change of the consumption of sucrose solution and the body weight were measured, and open field test, elevated startle response and plus maze test were performed, to investigate the anti-depression effect of Quibitang. The results were as follows: 1. The consumption of sucrose solution was significantly reversed in Quibitang-treated group at 9th, 11th, 12th week, but there was no significant change at 10th week 2. CMS schedule decreased body weight. CMS-treated groups showed decrease of body weight after 5 weeks. After 10 weeks, Quibitang group showed lower body weight than saline group in CMS-treated groups 3. In open field test, Quibitang group showed significant difference of locomotion, latency. 4. In elevated startIe test, Quibitang group showed no significant change of startle response. 5. In plus maze test, Quibitang group showed no significant change of plus maze-time and plus maze-error.
This study was performed to aid the development of a reduced-calorie ssanghwa beverage, by using substitutes for high fructose com syrup(HFCS). The relative sweetness levels of HFCS, aspartame, acesulfame-K, and glucosyl stevia solutions were examined in comparison to a 10% sucrose solution in a binary solution model. And the sensory properties of ssanghwa beverages containing aspartame, acesulfame-K, and glucosyl stevia were evaluated at the equi-sweetness to HFCS. In the binary solution model, the relative sweetness of HFCS to sucrose was 0.8, while the values for aspartame, acesulfame-K, and glucosyl stevia were 140, 170, and 100, respectively. Sweet taste and sweet after taste were not significantly different between the HFCS, aspartame, acesulfame-K, and glucosyl stevia solutions. On the other hand, bitter taste, first taste, and overall eating quality were significantly different between the HFCS and aspartame solutions and between the acesulfame-K and glucosyl stevia solutions. Finally, the ssanghwa beverages sweetened with HFCS, acesulfame-K, and aspartame only had slight differences in sensory properties. However, the sensory properties of the beverages sweetened with HFCS and glucosyl stevia, respectively, were significantly different.
This study was conducted to improve and supplement the system of cryopreservation for adventitious bulbs induced by tissue cultured bulb-scales of lily (Lilium spp.) cvs. 'Milky way'. The explants, bulblets and bulb-scale-bulblets, were treated to low temperature (4℃) for 7 days prior to the pre-culture. The adventitious bulbs were pre-cultured in Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with sucrose (0.3 and 0.7M). The pre-cultured adventitious bulbs were treated to loading solution (LS1 or LS2, C4 or C6) containing 35% of PVS3 (LS1, C4) or 40% of PVS3 (LS2, C6) for 40 min and exposed to dehydration solution (PVS3, B1) containing 50% glycerol and 50% sucrose for 60 min at 25℃. The adventitious bulbs were moved onto droplets containing 3 µl PVS3 on sterilized aluminum foils, and then soaked into liquid nitrogen (LN) for 60 min. The result of highest regrowth rate as 65.7% was obtained in cold treatment (4℃), osmoprotected with LS1 solution, and cultured in PCM3 medium by using bulb-scale-bulblet for cryopreservation. This result shows that droplet-vitrification could be used as a promising method for long-term storage of lily genetic resource.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2021.04a
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pp.35-35
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2021
This study was conducted to improve and supplement the system of cryopreservation for adventitious bulbs induced by tissue cultured bulb-scales of lily (Lilium spp.) cvs. 'MilkyWay'. The explants, bulblets and bulb-scale-bulblets, were treated to low temperature (4℃) for 7 days prior to the pre-culture. The adventitious bulbs were pre-cultured in Murashige and Skoog (MS) liquid medium supplemented with sucrose (0.3 and 0.7M). The pre-cultured adventitious bulbs were treated to loading solution (LS1 or LS2, C4 or C6) containing 35% of PVS3 (LS1, C4) or 40% of PVS3 (LS2, C6) for 40 min and exposed to dehydration solution (PVS3, B1) containing 50% glycerol and 50% sucrose for 60 min at 25℃. The adventitious bulbs were moved onto droplets containing 3 ㎕ PVS3 on sterilized aluminum foils, and then soaked into liquid nitrogen (LN) for 60 min. The result of highest regrowth rate as 65.7% was obtained in cold treatment (4℃), osmoprotected with LS1 solution, and cultured in PCM3 medium by using bulb-scale-bulblet for cryopreservation. This result shows that droplet-vitrification could be used as a promising method for long-term storage of lily genetic resource.
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