A lactic acid bacterium showing antimicrobial activity against fish pathogen was isolated from gastrointestinal tract of flounder for the purpose of use as an aquaculture probiotics. From the analysis of morphological and physiological characteristics, the isolated strain was named as Lactococcus sp. HM58. Antimicrobial substance (AMS) from Lactococcus sp. HM58 showed strong growth inhibitory activity against Streptococcus sp., which is a fish pathogenic bacterium. AMS was presumed a proteinaceous compound with stability in heat and wide pH range from 2 to 10. It was started to produce in exponential growth phase and was not produced any more in stationary phase. It showed comparatively broad antimicrobial spectrum against most of gram positive bacteria used for this study. About $84\%$ of Lactococcus sp. HM58 was able to survive in the artificial gastric juice though it was low to the extent in the artificial bile juice. In the sensitivity test for various antibiotics, this strain was highly sensitive for doxycycline, erythromycin, amoxicillin clavu1anic acid and ampicillin.
Immune responses of periodontal tissue may be regulated by products of sensory afferent nerve endings such as neuropeptides. Substance P(SP), a tachykinin neuropeptide, has been previously reported to stimulate the activities of T lymphocyte. Therefore, I examined the role of SP in IL-2 production and cell proliferation by using a homogeneous line of T lymphocytes(Jurkat and HuT78). Cell proliferation rate was determined by [$^3H$]-thymidine incorporation test, and IL-2 was quantitated by the growth rate of CD4+ IL-2-dependent T lymphocyte line CTLL-2. SP stimulated cell proliferation of T lymphocytes at the concentration of $10^{-12}$ and $10^{-8}$M in a biphasic bell-shape dose-dependent manner. However, SP alone did not induce IL-2 release at the concentration range of $10^{-6}$ to $10^{-14}$M. The upregulation of IL-2 release was observed when $10^{-12}$M SP was applied together with mitogens such as Con A or PHA+PMA on T cell lines, especially on Jurkat. Con A or PHA+PMA demonstrated to increase the rate of cell proliferation of Jurkat, which had shown to produce much amount of IL-2 indicating that mitogen-induced cell proliferation might be partially influenced by released IL-2. It was concluded that regulatory effects of SP on the immune/inflammatory response could be mediated through the costimulatory upregulation of IL-2 production and increase of cell proliferation of T lymphocyte.
Excitatory amino acid (EAA) and substance P (SP) have been known to be primary candidates for nociceptive neurotransmitter in the spinal cord, and calcium ions are implicated in processing of the sensory informations mediated by EAA and SP in the spinal cord. In this study, we examined how $Ca^{2+}$ modified the responses of dorsal horn neurons to single or combined iontophoretical application of EAA and SP in the rat. All the LT cells tested responded to kainate, whereas about 55% of low threshold (LT) cells responded to iontophoretically applied NMDA. NMDA and kainate excited almost all wide dynamic range (WDR) cells. These NMDA- and kainate-induced WDR cell responses were augmented by iontophoretically applied EGTA, but suppressed by $Ca^{2+},\;Mn^{2+},$ verapamil and ${\omega}-conotoxin$ EVTA, effect of verapamil being more prominent and well sustained. $Ca^{2+}$ and $Mn^{2+}$ antagonized the augmenting effect of EGTA. On the other hand, prolonged spinal application of EGTA suppressed the response of WDR cell to NMDA. SP had triple effects on the spontaneous activity as well as NMDA-induced responses of WDR cells: excitation, inhibition and no change. EGTA augmented, but $Ca^{2+},\;Mn^{2+}$ and verapamil suppressed the increase in the NMDA-induced responses and spontaneous activities of WDR cells following iontophoretical application of SP. These results suggest that in the spinal cord, sensory informations mediated by single or combined action of EAA and SP can be modified by the change in calcium ion concentration.
A strain of Streptomyces sp. (YS-221-B) extracellularly produced an inhibitory substance for $\alpha$-D-Glucosidase. The substance was purified 96-fold from culture filtrate by dialysis, heat treatment, adsorption on active carbon, Bio-Gel P-10 and Sephadex G-75 column chromatography with yield of 9.2%. The substance was stable in pH range from 7.0 to 11.0 at 37$^{\circ}C$, and a treatment at 10$0^{\circ}C$ for 20 min diminished only 15% of the original activity. The inhibitor was not inactivated by the treatment of $\alpha$-, $\beta$-amylases, glucoamylases, trypsin and chymotrypsin but inactivated by pyoteases from Streptomyces griseus and Tritirachium album.
To better understand the ecology of tetrade forming organisms (TFOs) floating in a large amount of dairy wastewater treatment plant (WWTP) effluent (sequencing batch reactor [SBR]) during the inefficient phosphorus (P) removal process of an enhanced biological P removal system, the TFOs from the effluent of a full scale WWTP were separated and attempts made to culture the TFOs in presence/absence of oxygen. The intact TFOs only grew aerobically in the form of unicellular short-rods. Furthermore, to identify the intact TFOs and unicellular short-rods the DNAs of both were extracted, analyzed using their denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE)-profiles and then sequenced. The TFOs and unicellular short-rods exhibited the same banding pattern in their DGGE-profiles, and those sequencing data resulted in their identification as Acinetobacter sp. The intact TFOs appeared in clumps and packages of tetrade cells, and were identified as Acinetobacter sp., which are known as strict aerobes and efficient P-removers. The thick layer of extracellular polymeric substance surrounding Acinetobacter sp. may inhibit phosphate uptake, and the cell morphology of TFOs might subsequently be connected with their survival strategy under the anaerobic regime of the SBR system.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.23
no.1
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pp.104-109
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1994
For Selection of powerful antagonistic bacteria for biological control of soil borne Erwinia rhapontici causing rot of the vegetables and fruit, excellent straints (S43, S62) were selected from rhizopere in vegetables root rot suppressive soil. Selected strains were identified to be Pseudomonas sp. with Apl 20NE kit tests. Optimum culture condition for the maximum production of antagonistic substance was determined , when isolate was cultured in 523 synthetic broth media at pH 7.0 and 30 during 3 days. Antagonistic substance productivity of isolated Pseudomonas sp. (S43, S62) in the fertilizer soil were increased to about 40-50% compared to that in the non fertilizer soil.
Kim, Kyung-Jun;Park, Sang-Hyuk;Choi, Kyoung-Kyu;Park, Sang-Jin
Restorative Dentistry and Endodontics
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v.31
no.3
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pp.153-160
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2006
We investigated the secretion of Interleukin-8 (IL-8) from ginviva and periodontal ligament stimulated with Substance P (SP) and Calcitonin Gene-related Peptide (CGRP). Gingiva (GF), periodontal ligament (PDLF) and pu)p (PF) tissues were collected from extracted intact 3rd molars. Cultured cells were stimulated with different concentrations of SP for 4 hrs, and stimulated with SP, CGRP and Tumor Necrosis Factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$) for 8 hrs. Then RNase Protection Assay was carried out. ELISA was performed using supernatants of stimulated cells for quantitative analysis of IL-8. Results were assessed using student t-test with significance of P<0.05. According to this study, the results were as follows: 1. IL-8 mRNA was detected in all type of cells studied (PF, GF and PDLF) 2. IL-8 mRNA expression was not increased after stimulating 4 hrs with SP ($10^{-5}M$) and SP ($10^{-8}M$) compared with Mock stimulation in all type of cells studied. 3. IL-8 mRNA expression was not increased after stimulating 8 hrs with SP ($10^{-4}M$) and CGRP ($10^{-6}M$) compared with Mock stimulation in all type or cells studied. 4. TNF-$\alpha$ (2 ng/ml) increased the expression of IL-8 mRNA in all kind of cells studied. 5. The secretion of IL-8 from GF was increased 8 hrs after the stimulation with CGRP ($10^{-6}M$)(p<0.05). 6. The secretion of IL-8 from PDLF was. increased 8 hrs after the stimulation with SP ($10^{-4}M$)(p<0.05). Calcitonin Gene-related Peptide (CGRP) increased Interleukin-8 (IL-8) which plays an important role in chemotaxis of neutrophil in Calcitonin Gene-related Peptide (CGRP) gingival tissue , whereas Substance P increased the secretion of IL-8 from periodontal ligament.
The mechanism of the contractile response of longitudial muscle of rabbit ileum to substance P (SP) has been investigated. The contractions in rabbit ileum under various conditions were recorded isometrically The following results were obtained. 1) The contractions by SP increased according to concentrations. SP·induced contraction was not sustained but faded rapidly at $10^{-7}M$. The response to the commutative addition of SP was decreased in comparison to the response to separate administration of each concentration . 2) The response to $10^{-8}M$ SP after 5 min application cf $10^{-7}M$ SP was increased with increasing the time interval between the administration of $10^{-7}$ and $10^{-8}M$ SP. 3) The treatment of rabbit ileum by $10^{-7}M$ SP for 5 min didn't decrease the response to $10^{-6}M$ acetylcholine. 4) $10^{-6}M$ atropine had no effect of the contractile response to $10^{-7}M$ SP. The response to $10^{-7}M$ SP was normal or subnormal in the presence of 3 mM tetraethylammonium(TEA). 5) 100k solution, $10^{-4}M$ ouabain, and Na-free solution inhibited the response to $10^{-8}M$ SP and 3 mM TEA completely, and to $10^{-7}M$ SP incompletely. 3 mM TEA induced a considerable contraction in K-free solution, but $10^{-8}M$ SP didn't induce the contraction. $10^{-6}M$ norepinephrine decreased the contractile responses to SP and TEA. 6) The contractile response to $10^{-7}M$ SP was dependent on the extracellular $Ca^{2+}$ concentrations to 1.8 mM. 7) The contractile response to $10^{-7}M$ SP remained 15% of the maximal response after bathing the ileum in a Ca-free solution for 2.5 min. 8) The responsiveness to SP was completely lost within 10 min of bathing in Ca-free solution, but was restored by the exposure to $Ca^{2+}$. The restorative effect of $Ca^{2+}$ depended on the concentration of $Ca^{2+}$, and on time for which the tissue exposed to this $Ca^{2+}$ concentration. These results suggest that there are two mechanisms of the action by which the low concentrations of substance P causes the contraction of intestinal smooth muscle: the reduction of K conductance and a mechanism dependent on the extracellular $Ca^{2+}$, and that high concentration of SP may elicit a contraction by releasing $Ca^{2+}$ from an intracellular store, which is not as sensitive to removal of extracellular $Ca^{2+}$ or as easily accessible to EGTA as the extracellular space of the muscle. The location of this store is not known; it may be associated with the internal side of the cell membrane.
For the selection of powerful antagonistic bacterium for biological control of soil borne Eminia carotovora subsp. carotovora causing rot of vegetable, excellent strains (S4, S14, 565) were selected from 1,196 strains of bacteria which were isolated from rhizosphere in vegetable root rot-suppresive soil. Strains were identified to be Pseudomonas species with Api 20NE kit. Antagonistic substance was produced in 523 synthetic broth medium at pH 7~8 and $30^{\circ}C$ during 3 days culture. The substance was stable in the pH range of 6 to 9. When the basal medium was supplemented with mannitol and sorbitol as carbon source and calcium chloride as metal salt, the production of the inhibitory substance was increased. The inhibitory acitivity was increased by the addition of fertilizer in soil. The isolated strains were resistant to the agricultural chemical such as benomyl and fosethyl-Al-folpet, and the antibiotics such as penicillin and lincomycin. We had found that Pseudomonas sp. S14 strain had a single plasmid. After treated with acridin orange for curing, we confirmed the existence of antagonistic gene in the chromosomal DNA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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