Song Hwi-June;Kim Ji-Young;Yoo Mi-Ae;Chung Hae-Young;Kim Jong-Min;Kim Byeong-Gee
Journal of Life Science
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v.16
no.3
s.76
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pp.433-441
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2006
Polyamines are essential for the normal cell growth and differentiation. They are also known to have paradoxical dual effects on cell proliferation. In this paper we show that the excess amount of polyamines induces apoptosis through the modulation of calcium signaling in LNCaP human prostate cancer cells. Polyamines, particularly spermidine and spermine, stimulated cell proliferation at a lower concentration (under 10 ${\mu}M$), but it inhibited cell viability at a higher concentration (40 ${\mu}M$). The levels of intracellular $Ca^{2+}$ concentration were increased only at a high concentration of polyamines treatment without any noticeable changes at lower concentrations. Nifedipine did not alter the increase of polyamine-induced $Ca^{2+}$ levels, but flufenamic acid totally abolished the increase of intracellular $Ca^{2+}$ levels. These results mean that polyamines induce $Ca^{2+}$ influx from the surroundings through nonselective cation channels on the cell membrane. The expression of Bcl-2 protein was almost completely blocked, but the level of Bax protein was increased dramatically in the cells treated with high concentration of polyamine. The present study shows that polyamines at a high concentration induce apoptosis through the modulation of intracellular calcium signaling. The increase of intracellular calcium level induced by polyamines, was possibly a result from the extracellular calcium influx through the nonselective cation channels.
In order to use a polysaccharide, curdlan, as a concrete admixture, we first developed a pilot-scale fermentation process for the mass production of curdlan. We also examined the rheological properties of curdlan, and tested how well the curdlan obtained in this work increased the segregational resistance of the cement slurry. Fermentation was performed in a 300-liter fermenter equipped with 3 disk-turbine impellers. Since curdlan production is stimulated under nitrogen-limiting conditions, the culture pH was shifted from the optimal pH for cell growth (pH 7.0) to the optimal pH for curdlan production (pH 5.5) at the onset of ammonium exhaustion. We obtained a curdlan production of 65 g/L in 120 hr batch cultivation of Agrobacterium species. The insoluble curdlan at the final stage of fermentation was readily harvested by centrifugation together with the cells. The freeze-dried sample contained 78% (w/w) of curdlan. The solubility and viscosity of the curdlan increased with the increase of the solution pH, which enhances the viscosity of concrete since the pH of concrete is extremely high (pH 13.0). Test results of the curdlan as a concrete admixture with cement slurry demonstrated that it prohibits the leakage of water. In conclusion, this work certifies and enlarges curdlan's industrial potential as a concrete admixture.
Wheat (Triticum aestivum L.) seeds were used to study a possible relationship between strontium and polyamines (PAs) in the coleoptile, root, and endosperm during germination. When $Sr^{2+}$ (0.001 mM + 10 mM) was applied to the incubation medium with $10\;{\mu}M$$GA_3$, great increases in putrescine (Put) were observed in root and spermidine (Spd) in the coleoptile, depending on the concentration. In germinating seeds, putrescine accumulation was induced even at a low concentration (0.01 mM Sr), whereas spermidine accumulation was stimulated considerably at a high concentration (10 mM Sr). The putrescine levels, on a gram fresh weight (g-fr-wt) basis, in the roots which were growth-inhibited by 1 and 10 mM $Sr^{2+}$ were 22.4 and 15.3 fold higher respectively than at the same concentrations of $Ca^{2+}$. The accumulation of total polyamine (TA), in particular Put and Spd, induced by Sr seemed to be an important physiological response not only on a g fr wt basis but also on an RNA basis. In contrast, the levels of agmatine (Agm) and cadaverine (Cad) were notably enhanced by 10 mM $Ca^{2+}$ in the coleoptile and root. Cadaverine was detected only in $Ca^{2+}-treated$ seedlings. However, $Ca^{2+}-treatment$ in the range of 0.001 mM to 1.0 mM resulted in reduction of TA content. The distinction of accumulated polyamines and the change in diamine (DA) / TA and tri- and tertiary (tPA) / TA ratios were likely to be a physiological difference between $Sr^{2+}$ and $Ca^{2+}$ during germination in wheat.
Laminaria japonica polysaccharides (LP) were prepared from L. japonica through hot water extraction, ultrafiltration and gel chromatography. In this study, we investigated the immunomodulating activity of LP (0.25-1 mg/mL) on the mitogen/alloantigen reactive proliferation and killing activity of the Balb/c mouse splenocytes. The LP directly induced the proliferation of splenocytes that was stimulated with mitogen or alloantigen in a dose-dependent manner. The killing activity of cytotoxic T lymphocytes (CTLs) and lymphokine activated killer cells (LAKs) were enhanced significantly in the LP treated cells. Also, the treatment of splenocytes with LP increased production of interleukin-2 (IL-2). These results suggest that polysaccharides from L. japonica show a substantial immunomodulating activity in mouse immune cells.
In order to develop new physiologically active polysaccharides from persimmon leaves, two different crude polysaccharides were prepared using hot water (PLW-0) and pectinase digestion (PLE-0) and their immuno-stimulating activities were estimated. PLW-0 and PLE-0 showed similar sugar compositions with 15 different sugars, including rarely observed sugars in general polysaccharides such as 2-O-methyl-fucose, 2-O-methyl-xylose, apiose, aceric acid, 3-deoxy-D-manno-2-octulosonic acid, and 3-deoxy-D-lyxo-2-heptulosaric acid, but the uronic acid content of PLE-0 was lower than that of PLW-0 caused by pectinase treatment. Both PLW-0 and PLE-0 showed potent anti-complementary activity in a dose-dependent manner which was similar to a known immuno-stimulating polysaccharide, PSK, from Coriolus versicolor. The activity of PLE-0 at a low concentration ($100{\mu}g/m{\ell}$) was higher than that of PLW-0. In an in vitro cytotoxicity analysis, PLW-0 and PLE-0 (up to $1,000{\mu}g/m{\ell}$) did not affect the growth of peritoneal macrophages and Colon 26-M3.1 carcinoma cells. In contrast, they enhanced lymphocyte proliferation activity. Peritoneal macrophages stimulated with PLW-0 and PLE-0 produced various cytokines, such as IL-6 and IL-12. However, PLE-0 was more effective on the cytokine production. Intravenous administration of PLW-0 and PLE-0 significantly augmented natural killer (NK) cell cytotoxicity against Yac-1 tumor cells 3 days after the treatment of polysaccharide fractions. But NK cells obtained from the PLE-treated group showed higher tumoricidal activity even at a low dose of $40{\mu}g$/mouse. In experimental lung metastasis of Colon 26-M3.1 carcinoma cells, prophylactic administration of PLW-0 and PLE-0 significantly inhibited lung metastasis in a dose-dependent manner and PLE-0 was more effective on the inhibition of cancer metasasis. The results lead us to conclude that the pectinase-treated process is indispensable to preparing polysaccharides with higher immune-stimulating activity from persimmon leaves.
Rho Sam Woong;Lee Gi Seog;Choi Gi Soon;Na Young In;Hong Moo Chang;Shin Min Kyu;Min Byung il;Bae Hyun Su
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.18
no.4
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pp.1041-1054
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2004
Electroacupuncture (EA) has been reported to increase pain threshold, and to enhance the NK cell activity by up-regulation of IFN-γ and endogenous β-endolphin. For the purpose of understanding the molecular mechanism of EA stimulation, we analyzed the gene expression profile of rat hypothalamus, treated on Zusanli (ST36) with EA, in comparison with control group by oligonucleotide chip microarray (Affymetrix GeneChip Rat Neurobiology U34 Array) and real-time RT-PCR. Sprague-Dawley (S-D) male rats were stimulated at the Zusanli (ST36) acupoint in restriction holder. Simultaneously the control group was given only holder stress without EA stimulation. In order to prove the appropriateness of EA treatment, we measured spleen NK cell activity with standard 51Cr release assay. NK cell activity of EA group was significantly increased comparing to control group. The microarray and PCR results show that EA treatment up-regulates expression of genes associated with 1) nerve growth such as NGF induced factor A and VGF, 2) signal transduction such as 5HT3 receptor subunit, AMPA receptor binding protein and Na-dependent neurotransmitter transporter, and 3) anti-oxidation such as superoxide dismutase and glutathione S-transferase. In addition, the activity of the anti-oxidative enzyme, SOD of hypothalamus, liver and RBC was enhanced compared to that of control. The list of differentially expressed genes may implicate further insight on the mechanism of acupuncture effects.
Quercus acutissima seedlings were grown for two years in fumigated or non-fumigated in nursery soil in a medium with and without vegetative inoculum of the ectomycorrhizal fungi, Pisolitlius tinctorius (Pt) and Rhizopogon rubescens (Rr). Mycorrhizal formation were 42% in fumigated Pt inoculation and 36% in fumigated Rr inoculation. $2.16{\ell}\;per\;m^2$ of Pt vegetative inoculum in fumigated soil stimulated the seedling height (98%), root collar diameter (132%) and weight (420%). And Rr inoculation in fumigated soil increased the seedling height (44%), root collar diameter (23%) and weight (157%) compared with non-treated plot. There was no effect of Pt and Rr inoculation on the growth in non-fumigated soil. Nitrogen and $P_2O_5$ contents in foliage were not different by the treatment but $K_2O$ and Ca in fumigated soil were higher than non-fumigated soil.
Park, Hyun;Lee, Bong-Hun;Ka, Kang-Hyeon;Bak, Won-Chull;Oh, Deuk-Sil;Park, Jun-Mo;Chun, Woo-Jae
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.34
no.3
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pp.84-89
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2006
Cultivation of cauliflower mushroom (Sparassis crispa) became a good way of consumption for coniferous sawdust. However, conventional method for the cultivation demanded ready-decomposed sawdust in field more than 6 months, which resulted in the spatial and temporal problems. This study was conducted to develop an efficient cultivation method to minimize the problem with steam-treated sawdust media of Larix leptolepis, Pinus densiflora and Pinus koraiensis. By the treatment, mycelial growth was stimulated by 10% compared to that of untreated sawdust with the sawdust media of L. leptoiepis and P. koraiensis, and the mushroom productivity was improved from 12.5% (50.1 g/400 g) to 16.7% (66.7 g/400 g) with the sawdust medium of P. densiflora from first harvest in case of KFRI644. Steam treatment is thought to be a good method for cultivation of cauliflower mushroom by minimizing culturing period and increasing productivity, which is an effective way of utilization for coniferous sawdusts.
To optimize the expression and secretion of ferritin protein associated with ion storage in the mushroom, Pleurotus eryngii, a recombinant secretion vector, harboring the ferritin gene, was constructed using a pPEVPR1b vector under the control of the CaMV 35S promoter and signal sequence of pathogen related protein (PR1b). The ferritin gene was isolated from the T-Fer vector following digestion with EcoRI and HindIII. The gene was then introduced into the pPEVPR1b secretion vector, and it was then named pPEVPR1b-Fer. The recombinant vector was transferred into P. eryngii via Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation. The transformants were selected on MCM medium supplemented with kanamycin and its expression was confirmed by SDS-PAGE and western blotting. Expression of ferritin protein was optimized by modifying the culture conditions such as incubation time and temperature in batch and 20 L airlift type fermenter. The optimal conditions for ferritin production were achieved at 25℃ and after incubating for 8 days on MCM medium. The amount of ferritin protein was 2.4 mg/g mycelia, as measured by a quantitative protein assay. However, the signal sequence of PR1b (32 amino acids) seems to be correctly processed by peptidase and ferritin protein may be targeted in the apoplast region of mycelia, and it might not be secreted in the culture medium. The iron binding activity was confirmed by Perls' staining in a 7.5% non-denaturing gel, indicating that the multimeric ferritin (composed of 24 subunits) was formed in P. eryngii mycelia. Mycelium powder containing ferritin was tested as a feed additive in broilers. The addition of ferritin powder stimulated the growth of young broilers and improved their feed efficiency and production index.
In the traditional Chinese medicine, Drynariae Rhizoma (DR) has been reported as a good enhancer for bone healing. DR, a plant widely used in the traditional medicinal systems of Korea, has been reported to possess antiviral, antibacterial and anti-inflammatory activities. Modulation of immune response to alleviate disease has been of interest for a long time. Plant extracts have been widely investigated for possible immunomodulatory properties. Thus, I have evaluated the anticellular and immunomodulatory properties of ethanolic extract of DR. DR extract inhibited proliferation of mitogen (phytohaemagglutinin; PHA) and antigen (purified protein derivative; PPD)-stimulated human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs). In addition, DR inhibited growth of several cell lines of mouse and human origin. It also inhibited production of nitric oxide (NO), interleukin-2 (IL-2) and tumor necrosis $factor-{\alpha}\;(TNF-{\alpha})$. Intracytoplasmic $interferon-{\gamma}\;(IFN-{\gamma})$ and expression of cell surface markers, CD16 and HLA-DR, on human PBMC, were not affected on treatment with DR but CD25 expression was down regulated. This study demonstrates the antiproliferative and immunosuppressive potential of ethanolic extract of DR in vitro.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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