본 실험에서는 microtiter plate를 이용하는 실내 검정법을 이용하여 고추 탄저병균의 기주체 침입 초기에 볼 수 있는 형태 변화인 포자 발아 및 부착과 균사 생장에 미치는 다양한 화합물의 활성을 대량으로 검정할 수 있는 방법을 확립하였고, 기존의 몇 가지 살균제가 가지는 고추 탄저병균의 초기 형태 분화 에 대한 억제 효과를 조사하였다. 본 실내 검정법을 표준화하기 위하여 MTT와 propanol 처리, 접종하는 포자의 농도, 배양 시간들이 병원균의 흡광도에 미치는 영향을 조사하였다. MTT를 12 시간, propanol을 1 시간 처리하였을 때, 그리고 JC24 의 포자를 $1\times10^5$개/mL의 농도로 접종하고 36 시간 배양하였을 때, 병원균의 흡광도가 일관성 있고 높게 나타났다. 살균제의 작용 특성을 알아보기 위해서 6종의 보호용 살균제, 6종의 스테롤 생합성 저해 살균제, 1종의 호흡저해제를 선발하여 microtiter plate 대량 검정 방법에서 효과를 조사하였다. 보호용 살균제 중에서 mancozeb, chlorothalonil, dithianone 등은 $6.25{\mu}g/mL$ 처리구에서도 포자의 발아, 부착과 균사의 생장을 모두 80% 이상 억제하였으나, propineb, iminoctadine, fluazinam 등은 $100{\mu}g/mL$의 처리를 2 시간만에 세척하였을 때 흡광도가 감소하는 것으로 보아 포자 부착 억제 효과는 적었다. 6종의 스테롤 생합성 저해제 중에서 hexaconazole, tebuconazole, myclobutanil 등은 포자의 발아와 균사 생육을 억제하고, 세척할 경우 JC24의 생육 억제 효과가 떨어지는 것을 보아 부착 억제 효과는 기대할 수 없었다. Nuarimol 은 $100{\mu}g/mL$로 처리한 고농도에서만 부착에 대한 억제 효과가 54.7%로 다른 억제 효과보다 우수하였으나, $6.25{\mu}g/mL$의 저농도로 처리하였을 때는 부착 억제 효과가 나타나지 않았다. Kresoxim-methyl은 6.25와 $100{\mu}g/mL$의 농도에서 포자 부착에 대한 억제율이 27.3%와 54.4%로 나타났는데, 처리하는 농도가 높아짐에 따라서 효과도 증가하였다. 이상의 결과와 같이 때 microtiter plate를 사용하여 병원균이 식물체를 침입하는 초기에 나타나는 포자 발아와 부착, 그리고 균사 생장을 검정할 수 있었으며, 본 실험 방법을 통하여 Kresoxim-methyl은 탄저병균의 포자 부착을 특이적으로 억제하는 효과가 있음을 알 수 있었다.
당근검은잎마름병을 일으키는 A. dauci의 포자 생장 시기에 따른 chlorothalonil, dithianon, folpet, iminoctadine trisalbesilate, fluazinam의 효과를 포자 생존 검정법과 한천희석법으로 검정하였다. 포자 생존 검정법과 한천희석법으로 조사한 A. dauci CDSGM2-5를 비롯한 7개 균주의 chlorothalonil 에 대한 평균 EC50값은 14.21 ㎍/ml와 100 ㎍/ml 이상이었다. Dithianon과 folpet 역시 포자 생존 검정법의 EC50값이 한천희석법보다 낮았지만, iminoctadine tris-albesilate는 한천희석법으로 조사한 EC50값이 더 낮았다. Fluazinam은 포자 생존 검정법과 한천희석법의 EC50값이 각각 1.63 ㎍/ml와 2.40 ㎍/ml로, 두 방법의 EC50값이 비슷하였다. A. dauci KACC 42997의 포자생장 단계에 따라 각 살균제를 처리한 결과, chlorothalonil, dithianon, folpet은 포자가 발아한 이후에 처리하면 발아하기 전에 처리하였을 때보다 효과가 감소하였으나, iminoctadine trisalbesilate는 포자 접종과 동시에 처리하였을 때 10.28 ㎍/ml였던 EC50값이 포자가 발아한 후에 처리하면 2.68 ㎍/ml에서 3.21㎍/ml까지 감소하여, 포자 발아 후에 처리하였을 때 효과가 우수하였다. Fluazinam은 접종하는 포자에서 발아관이 장경보다 길게 발아한 포자까지 처리하여도 포자의 생장을 크게 억제하였다. 하지만 iminoctadine tris-albesilate와 fluazinam을 12시간을 배양한 후에 처리하면 EC50값이 8.87 ㎍/ml와 20.65 ㎍/ml로 상승하면서 억제 효과가 감소하였다. 본 연구 결과는 살균제의 적합한 처리 시기는 병원균의 포자 생장 시기에 따라서 달라짐을 보여주고 있다. 따라서 살균제 처리 시기의 결정은 병원균의 생장 시기에 대한 살균제의 효과까지도 고려해야 할 것으로 생각되어진다.
Chaerophylline and berberine hydroxide, both being alkaloids, isolated from Corydalis chaerophylla and C. longipes respectively were assayed against spore germination of some fungi, e.g. Alternaria solani, A. brassicola, A. brassicicola, Helminthosporium penniseti, Helminthosporium sp., Heterosporium sp., Curvularia penniseti, C. maculens and C. palliscens. While chaerophylline inhibited spore germination of most of the fungi at 1000 ppm, being also effective at 50, 100, 200 and 500 ppm, berberine hydroxide was significantly effective at much lower concentration, i.e., 400 ppm against several fungi. This compound was also effective against some fungi at 50, 100, 150, 200 ppm. There was 100% inhibition of spore germination in several fungi at highest concentration of both the compounds. Some of the fungi showed similar results even at lower concentrations.
Withametelin, a steroidal compound isolated from leaves of Datura metel L.(Solanaceae), showed antifungal activity against some plant pathogenic as well as saprophytic fungi tested in vitro. Except Curvularia maculans and Colletotrichum sp., spore germination of all the other 23 fungi was inhibited significantly at 125 to 1000 ppm. Out of the 25 fungi tested, Curvularia sp., Cercospora abelmoschi, Heterosporium sp., Erysiphe cichoracearum and Ustilago cynodontis were most sensitive as there was complete inhibition of germination at 1000 ppm. Similarly, spores of Alternaria brassicae, Curvularia lunata and Helminthosporium pennisetti showed less than 3% germination at the same concentration. Rest of the fungi showed more than 15% spore germination at the same concentration.
The filamentous bacterium Leucothrix mucor, an epiphyte of seaweed, showed antifouling activity against Ulva pertusa spore settlement and germling development. The chemical constituents representing the antifouling activity were identified as giffinisterone B and oleamide based on nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy and mass spectroscopy (MS). Approximately 3.6 mg of giffinisterone B and 2.8 mg of oleamide were isolated from 1.6 g of Leucothrix mucor crude extract. Giffinisterone B fully inhibited spore settlement and germling development at $100{\mu}g/mL$. Oleamide inhibited spore settlement at $10{\mu}g/mL$ and germling development at $100{\mu}g/mL$.
Glycerol-spore formation of wild myxobacteria isolated in Korea has been tested. One third of the wild myxobacterial isolates belonged to the genus Myxococcus and Corallococcus produced a large number of glycerol-spores in the presence of glycerol or dimethyl sulfoxide. However, two third of the other wild myxobacterial isolates belonged to the genus Myxococcus and Corallococcus produced a negligible number of spores under the same condition. In addition, the myxobacteral isolates belonged to the other genus, such as Stigmatella, Archangium, and Cystobacter, failed to produce a noticeable number of glycerol-spores.
Antimutagenic activity of the enzymatic browning reaction products (EBRPs) was investigated by using the spore rec-assay with Bacillus subtilis strains H17 $(rec^+)\;and\;M45 (rec^-)$. The EBRPs tested were prepared from the reactions of five different kinds of polyphenols with polyphenol oxidase isolated from the leaves Perilla frutescens. In the spore rec-assay, most of the polyphenolic compounds tested showed positive, whereas only their tested compound showed negative respectively. In addition of polyphenol oxidase inhibitors such as cysteine, glutathione and ascorbic acid to the reaction mixtures consisted with the polyphenol oxidase and polyphenols, the mutagenic effects were increased in the spore recassay. These results show that the activity of polyphenol oxidase may play an important role in the reduction of mutagenicity of polyphenols.
대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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pp.335.3-336
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2002
To find ${\alpha}$-Glucosidase Inhibitors produced by Actinomycetes, 20 soil samples were tested and 53 Actimycetes were isolated. One of 53 Actinomycetes (strain PM718) showed very potent inhibitory activity in vitro. The morphological and physiological characteristics of strain PM 718 were investigated. The spore morphology. spore chain morphology and spore surface were observed by scanning electron microscope. The inhibitory activity of strain PM718 in vivo has been studied in mice made hyperglycemia by Streptozotocin treatment. The strain PM718 showed signficant reduction of blood glucose level(more than 30%) in mice loaded with maltose.
Basidia of Entoloma squamiferrum are developed from hymenium layer of cartor-shaped parabasidium. Apex of basidium is flat or depressed in the center. Although four sterigmata are developed, only two sterigmata are symmetrically swollen to two spores im certain basidia. It means that two sterigmata among four sterigmata are imfertil. A spore is formed by inflation of the apex of the sterigma. The apex of the sterigma is swollen into a paillaform and then turned into a penisform. It is swollen from a clubform into a globefrom. Six spots of the surfaces of globose spore are depressed with hilum axes. Finally the spore is cuboid, and then it is released from hilum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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