Ginsenoside Rp1 is one of ginseng saponins with chemotherapeutic activity. In this study, we investigated the effects of Rp1 on spleen cells. Spleen is a major immune organ consisted of crucial immune cells, such as T lymphocytes, B lymphocytes, natural killer cells, and some antigen-presenting cells. Although the anti-tumor potential of Rp1 was studied, the effects of Rp1 on immune cells have not investigated yet. A viability assay using 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), flow cytometric analysis, Western blot analysis were used to detect cellular changes on Rp1-treated spleen cells. MTT assay showed that Rp1 decreased the viability of spleen cells. To further investigate the effects of Rp1 on activated spleen cells, we treated lipopolysaccharide (LPS) as a representative inflammatory agent and Rp1 on spleen cells in a combination. The surface expression levels of activation markers for lymphocytes, CD25 and CD69 were measured. Apoptotic analysis revealed the cytotoxic effects of Rp1 on both na$\ddot{i}$ve and activated cells, and the expression pattern of some apoptosis-related proteins was correlated to apoptotic events of cells. Taken together, ginsenoside Rp1 increases the cellular death of spleen cells and also inhibits the LPS-induced activation of spleen cells.
Fenbendazole (FBZ) is a benzimidazole anthelmintic widely used to treat parasitic infections. The anticancer effect of FBZ has been recently highlighted leading to its consideration as a potential anticancer agent. Although previous studies have demonstrated the effect of FBZ on cancer cells, there is a paucity of studies on the effect of FBZ on lymphoma cells and normal immune cells. Herein, we investigated the effects of FBZ on a mouse lymphoma cell line, EL-4 cells, and spleen cells, using vincristine as a positive control. The cellular metabolic activity of EL-4 cells was decreased by FBZ, but that of the spleen cells was not decreased. Moreover, FBZ reduced the mitochondrial membrane potential and induced reactive oxygen species production in EL-4 cells, but not in spleen cells. FBZ induced G2/M phase arrest and increased the sub G0/G1 phase ratio, indicating apoptosis. Furthermore, compared to the control cells, the reactivity of spleen cells pretreated with FBZ to lipopolysaccharide was maintained. In summary, FBZ is cytotoxic to EL-4 cells, but not to spleen cells. This study provides experimental evidence that FBZ exerts an anticancer effect, and less cytotoxic effects and functional damage to normal spleen cells.
Disulfiram is a drug used to treat alcohol dependence. Recent studies have shown that disulfiram also has anti-cancer effects. Considering that many anti-cancer agents have side effects, including immunosuppression, it is important to check if disulfiram has some cytotoxicity to immune cells. In this study, mouse spleen cells were treated with disulfiram and the metabolic activity was measured. Disulfiram increased the cell death of spleen cells according to annexin V-FITC/PI staining analysis. In addition, disulfiram decreased the mitochondrial membrane potential of spleen cells. The toxicity of disulfiram was concentration dependent. Interestingly, disulfiram affected the population of lymphocytes and the subset of spleen cells was altered. This study provides clinicians and researchers with valuable information regarding the toxicity of disulfiram to mouse spleen cells, particularly lymphocytes.
Enrofloxacin, a fluoroquinolone, is a broad-spectrum antibiotic widely used in veterinary medicine that inhibits the action of bacterial DNA gyrase, resulting in anti-bacterial effects. This study was performed to examine whether enrofloxacin has modulatory and anti-inflammatory activity on immune cells. A few studies have reported the anti-inflammatory effects of enrofloxacin. In this study, we used mouse spleen cells treated with lipopolysaccharide (LPS) and examined the effects of enrofloxacin. Several assays were performed in LPS-treated spleen cells after the enrofloxacin treatment. Enrofloxacin inhibited the metabolic activity and mitochondrial membrane potential of LPS-treated spleen cells significantly. On the other hand, enrofloxacin did not alter the proportion of the subsets in spleen cells, and did not induce cell death. The production of tumor necrosis factor-alpha in LPS-treated spleen cells was inhibited by enrofloxacin. Overall, enrofloxacin had modulatory activity in spleen cells treated with LPS. These data may broaden the use of enrofloxacin as an antibiotic with anti-inflammatory activity in veterinary clinics.
4,4'-diaminodiphenyl sulfone (dapsone) is a sulfone drug that has antibacterial effects on a variety of bacteria, especially Mycobacterium leprae; thus, it has been used to treat leprosy. Previous studies demonstrated that dapsone inhibits integrin-mediated adherence of neutrophils and production of prostaglandin $E_2$ by polymorphonuclear leukocytes. Hence, dapsone may act in immune cells and regulate cell-mediated inflammation processes. However, its anti-inflammatory effects remain unclear. The present study demonstrated that dapsone modulates the production of inflammation-related cytokines in immune cells. We employed the spleen cells of mice, which are major immune cells, and lipopolysaccharide (LPS) as a causative agent of inflammation for experiments. Dapsone induced a proportional change in splenocyte subsets and the apoptosis of spleen cells. Interestingly, dapsone decreased the production of tumor necrosis factor-alpha and interleukin (IL)-10, but not IL-6, in LPS-treated spleen cells. In other assays, we measured the dapsone-induced production of nitric oxide (NO) and the expression of activation markers of spleen cells. Dapsone decreased NO production in LPS-treated spleen cells. Taken together, our results demonstrate that dapsone has anti-inflammatory effects in immune cells and provide new insight into the potential uses of this agent.
Objectives The purpose of this study was to investigate the effect of Yongyukjowitang(YJT) distillate on the immune activity of spleen cells of aged SD rats. Methods Spleen cells from 10w, 52w, 72w old rats were stimulated with Concanavalin A(Con A) and treated with Vitamin C(Vit.C) or Yongyukjowitang distillate(YJT). After 24 hours, levels of IL-2, IL-4, IL-10, IFN-${\gamma}$ were measured using ELISA in spleen cells. Results and Conclusions 1. The concentration of IL-2, IL-4 in spleen cells of 52 weeks old SD rats(YJT group) significantly decreased in comparison with ConA group. 2. The concentration of IFN-${\gamma}$ in spleen cells of 72 weeks old SD rats significantly increased in comparison with 10 weeks old SD rats(NT group), but decreased in comparison with 10 weeks old SD rats(YJT group). These results suggest that Yongyukjowitang distillate has an effect on the immune activity of spleen cells of aged SD rats.
5-Fluorouracil, doxorubicin, and vincristine are chemotherapy agents used to treat various cancers, such as breast cancer and lymphoma for decades, and their effects on cancer have been proven. On the other hand, these anti-cancer drugs cause fatal side effects, including immunosuppression. This study investigated whether sonicated Bordetella bronchiseptica bacterin (B. bronchiseptica) can attenuate the immunosuppression of spleen cells induced by these chemotherapy agents and which subsets of spleen cells were affected. B. bronchiseptica increased the metabolic activity of spleen cells treated with 3 anti-cancer drugs. Cell death analysis using Annexin V/propidium iodide showed that B. bronchiseptica markedly decreased the death of spleen cells. The subsets of spleen cells were analyzed by flow cytometry using a surface marker-specific antibody. B. bronchiseptica increased nitric oxide production in the spleen cells treated with anti-cancer drugs (p < 0.0001). Despite the pharmacological effects of anti-cancer drugs, many patients suffer from the fatal side effects of immunosuppression. This study provides valuable information on how to overcome chemotherapy-induced immunosuppression.
Ginsan is an acidic polysaccharide purified from Panax ginseng, a famous oriental herb. Although a variety of biological activities of ginsan have been studied, the effects of ginsan on spleen cells are not fully elucidated. We investigated the effect of ginsan on the viability and proliferation of spleen cells. Using Cell Counting $Kit-8^{(R)}$ solution and trypan blue solution, we found that ginsan significantly enhanced viability and proliferation. Multiple clusters, indicating proliferation, were observed in ginsan-treated spleen cells and, carboxyfluorescein succinimidyl ester and surface marker staining assay revealed that ginsan promoted proliferation from $CD19^+$ B cells rather than $CD4^+$ or $CD8^+$ T cells. In addition, ginsan decreased the percentage of late apoptotic cells. Ginsan increased the surface expression of CD25 and CD69 as well as production of interleukin-2 from spleen cells, suggesting increased activation. Taken together, these results demonstrate that ginsan increases the viability and proliferation of spleen cells via multiple mechanisms, valuable information for broadening the use of ginsan in clinical and research settings.
Jeon, Jong Ik;Lee, Hyun Jin;Kim, Il Gu;Yim, Yun Kyoung
Journal of Acupuncture Research
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v.32
no.4
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pp.109-118
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2015
Objectives : The purpose of this study was to investigate the anti-oxidative effect of Suhwagije-decoction (SGT) pharmacopuncture solution on the liver and spleen cells of aged rats. Methods : The liver and spleen cells of 10, 52, and 72 week old Sprague Dawley (SD) rats were divided into three groups: distilled water (DW), Vit.C, and SGT groups, which were treated with DW, Vit.C and SGT pharmacopuncture solution respectively. The levels of superoxide dismutase (SOD), glutathione (GSH) and nitric oxide (NO) were then measured. Results : 1. Treatment of SGT pharmacopuncture solution significantly decreased NO concentration in spleen cells of 52 week old rats as compared with that of other groups. 2. Treatment of SGT pharmacopuncture solution significantly increased SOD activity in spleen cells of 72 week old rats as compared with that of other groups. Conclusions : Suhwagije-decoction (SGT) pharmacopuncture solution may have an anti-oxidative effect in the spleen cells of aged rats.
Objective : The purpose of this study is to investigate the anti-oxidative effect of Jeokbaekhaogwanjoong-tang (JGT) distillate in spleen cells of aged rats.Methods : This experiment was performed using spleen cells of 10w, 52w, 72w old sprague dawley (SD) rats. The spleen cells of 10, 52, 72 weeks old rats were divided into three groups; DW group, Vit. C group, and JGT group. The cells of DW group were treated with distilled water. The cells of Vit.C group were treated with Vitamin C. And the cells of JGT group were treated with JGT distillate. After the treatment of DW, Vit.C, and JGT, the levels of superoxide dismutase (SOD), glutathione (GSH), nitric oxide (NO) and lipid peroxidation (MDA) were measured.Results : In the spleen cells of 72 weeks old rats, SOD activity was significantly increased in the JGT group compared to those in the DW group and the Vit.C group. In the spleen cells of 52 weeks old rats, GSH activity was significantly increased in the JGT group compared to the Vit.C group, and NO concentration was significantly decreased in the JGT group compared to the DW group and the Vit.C group. MDA concentration was not changed significantly in any cell groups by the treatment of JGT distillate.Conclusions : Jeokbaekhaogwanjoong-tang (JGT) distillate may have an anti-oxidative effects in the spleen cells of aged rats. Further investigation is needed for the anti-aging effect of JGT.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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