Hong, Yoon Jee;Kim, Young Jun;Murata, Koichi;Lee, Hang;Min, Mi-Sook
Animal Systematics, Evolution and Diversity
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v.29
no.2
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pp.136-143
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2013
The collared scops owl that occurs in Korea is a protected species but its exact specific status has been questioned. To resolve the species status, a molecular phylogenetic analysis was conducted using two fragments of mitochondrial DNA, cytochrome b (cyt b, 891 bp) and NADH dehydrogenase subunit 2 (ND2, 627 bp) genes. Phylogenetic trees of cyt b revealed that all Korean specimens formed a monophyletic group with Japanese scops owl Otus semitorques with very low sequence divergence (d=0.008). We obtained a similar ND2 tree as well (d=0.003); however, the genetic distance between Korean individuals and O. lempiji from GenBank (AJ004026-7, EU348987, and EU601036) was very high and sufficient enough to separate them as species (cyt b, d=0.118; ND2, d=0.113). We also found that Korean species showed high differentiation from O. bakkamoena (AJ004018-20 and EU601034; cyt b, d=0.106; ND2, d=0.113) and O. lettia (EU601109 and EU601033, cyt b, d=0.110; ND2, d=0.117) as well. Therefore, we suggest that the Korean collared scops owl should be designated as Otus semitorques.
The mitochondrial genome of domesticated silkworm (Bombyx mori) was mapped with five restriction endonucleases (BamHI, EcoRI, HindIII, PstI and XbaI), the entire genome was cloned with HindIII and EcoRI. From the end sequencing results of 5$^1$and 3$^1$region for full genome set of eleven mitochondrial clones, the seven mitochondrial genes (NADH dehydrogenase 6, ATPase 6, ATPase 8, tRN $A^{Lys}$, tRN $A^{Asp}$, tRN $A^{Thr}$ and tRN $A^{Phe}$ of mori were identified on the basis of their nucleotide sequence homology. The nucleotide composition of NADH dehydrogenase 6 was heavily biased towards adenine and thymine, which accounted for 87.76%. On basis of the sequence similarity with published tRNA genes from six insect species, the tRN $A^{Lys}$, tRN $A^{Asp}$ and tRN $A^{Thr}$ were showed stable canonical clover-leaf tRNA structures with acceptible anticodons. However, both the DHU and T$\psi$C arms of tRN $A^{Phe}$ could not form any stable stem-loop structure. The two overlapping gene pairs (tRN $A^{Lys}$ -tRN $A^{ASP}$ and ATPase8-ATPase6) were found from our sequencing results. The genes are encoded on the same strad. ATPase8 and ATPase6 overlaps (ATGATAA) which are a single example of overlapping events between abutted protein-coding genes are common, and there is evidence that the two proteins are transcribed from a single bicistronic message by initiation at 5$^1$terminal start site for ATPase8 and at an internal start site for ATPase6. Ultimately, this result will provide assistance in designing oligo-nucleotides for PCR amplification, and sequencing the specific mitochondrial genes for phylogenetics of geographic races, genetically improved silkworm strains and wild silkworm (mandarina) which is estimated as ancestal of domesticated silkworm.sticated silkworm.
To study the effect of dietary docosahexaenoic acid (DHA) enrichment on the expression of hepatic genes in pigs, weaned, crossbred pigs (30 d old) were fed diets supplemented with either 2% tallow or DHA oil for 18 d. Hepatic mRNA was extracted. Suppression subtractive hybridization was used to explore the hepatic genes that were specifically regulated by dietary DHA enrichment. After subtraction, we observed 288 cDNA fragments differentially expressed in livers from pigs fed either 2% DHA oil or 2% tallow for 18 d. After differential screening, 7 genes were found to be differentially expressed. Serum amyloid A protein 2 (SAA2) was further investigated because of its role in lipid metabolism. Northern analysis indicated that hepatic SAA2 was upregulated by dietary DHA enrichment (p<0.05). In a second experiment, feeding 10% DHA oil for 2d significantly increased the expression of SAA2 (compared to the 10% tallow group; p<0.05). The porcine SAA2 full length cDNA sequence was cloned and the sequence was compared to the human and mouse sequences. The homology of the SAA2 amino acid sequence between pig and human was 73% and between pig and mouse was 62%. There was a considerable difference in SAA2 sequences among these species. Of particular note was a deletion of 8 amino acids, in the pig compared to the human. This fragment is a specific characteristic for the SAA subtype that involved in acute inflammation reaction. Similar to human and mouse, porcine SAA2 was highly expressed in the liver of pigs. It was not detectable in the skeletal muscle, heart muscle, spleen, kidney, lung, and adipose tissue. These data suggest that SAA2 may be involved in mediation of the function of dietary DHA in the liver of the pig, however, the mechanism is not yet clear.
The well-conserved NBS domain of resistance (R) genes cloned from many plants allows the use of a PCR-based approach to isolate resistance gene analogs (RGAs). In this study, we isolated an RGA (CapRGC) from Capsicum annuum "CM334" using a PCR-based approach. This sequence encodes a protein with very high similarity to Rx genes, the Potato Virus X (PVX) R genes from potato. An evolutionary analysis of the CapRGC gene and its homologs retrieved by an extensive search of a Solanaceae database provided evidence that Rx-like genes (eight ESTs or genes that show very high similarity to Rx) appear to have diverged from R1 [an NBS-LRR R gene against late blight (Phytophthora infestans) from potato]-like genes. Structural comparison of the NBS domains of all the homologs in Solanaceae revealed that one novel motif, 14, is specific to the Rx-like genes, and also indicated that several other novel motifs are characteristic of the R1-like genes. Our results suggest that Rx-like genes are ancient but conserved. Furthermore, the novel conserved motifs can provide a basis for biochemical structural. function analysis and be used for degenerate primer design for the isolation of Rx-like sequences in other plant species. Comparative mapping study revealed that the position of CapRGC is syntenic to the locations of Rx and its homolog genes in the potato and tomato, but cosegregation analysis showed that CapRGC may not be the R gene against PVX in pepper. Our results confirm previous observations that the specificity of R genes is not conserved, while the structure and function of R genes are conserved. It appears that CapRGC may function as a resistance gene to another pathogen, such as the nematode to which the structure of CapRGC is most similar.
Studies on hypoxia-signaling pathways have revealed novel Fe(II) and $\alpha$-ketoglutarate-dependent dioxygenases that hydroxylate prolyl or asparaginyl residues of a transactivator, Hypoxia-Inducible $Factor-\alpha(HIF-\alpha)$ protein. The recognition of these unprecedented dioxygenases has led to open a new paradigm that the hydroxylation mediates an instant post-translational modification of a protein in response to the changes in cellular concentrations of oxygen, reducing agents, or $\alpha$-ketoglutarate. Activity of $HIF-\alpha$ is repressed by two hydroxylases. One is $HIF-\alpha$ specific prolyl-hydroxylases, referred as prolyl-hydroxylase domain(PHD). The other is $HIF-\alpha$ specific asparaginyl-hydroxylase, referred as factor-inhibiting HIF-1(FIH-1). The facts (i) that many dioxygenases commonly use molecular oxygen and reducing agents during detoxification of xenobiotics, (ii) that detoxification reaction produces radicals and reactive oxygen species, and (iii) that activities of both PHD and FIH-1 are regulated by the changes in the balance between oxygen species and reducing agents, imply the possibility that the activity of $HIF-\alpha$ can be increased during detoxification process. The importance of $HIF-\alpha$ in cancer and ischemic diseases has been emphasized since its target genes mediate various hypoxic responses including angiogenesis, erythropoiesis, glycolysis, pH balance, metastasis, invasion and cell survival. Therefore, activators of PHDs and FIH-1 can be potential anticancer drugs which could reduce the activity of HIF, whereas inhibitors, for preventing ischemic diseases. This review highlights these novel dioxygenases, PHDs and FIH-1 as specific target against not only cancers but also ischemic diseases.
Precise, rapid and simple methods for species identification in animals are among the most important techniques in the livestock industry and research fields including meat classification. In this study, polymerase chain reaction (PCR) based molecular identification using inter species polymorphisms were examined by PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis for mitochondrial DNA (mtDNA) cytochrome b (CYTB) gene sequences among four mammalian livestock animals (cattle, horse, goat and pig). The results from PCR-RFLP analysis using the AluI restriction enzyme were also provided for the species-specific band patterns among CYTB gene sequences in these four species. The AluI-digestion for CYTB genes provided interesting migration patterns differentially displayed according to each species. Cattle and horse had one AluI-recognition site at different nucleotide positions and their AluI-digested fragments showed different band patterns on the gels. Pig had two AluI-recognition sites within the amplified CYTB sequences and produced three bands on the gels. Goat had no AluI-recognition site and was located at the same position as the uncut PCR product. The results showed the species-specific band patterns on a single gel among the four livestock animal species by AluI-RFLP. In addition, the results from blind tests for the meat samples collected from providers without any records showed the identical information on the species recorded by observing their phenotypes before slaughter. The application of this PCR-RFLP method can be useful and provide rapid, simple, and clear information regarding species identification for various tissue samples originating from tested livestock species.
Park, Jong-In;Lee, In-Ho;Watanabe, Masao;Nou, Ill-Sup
Journal of Plant Biotechnology
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v.37
no.2
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pp.186-195
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2010
In most self-incompatible plant species, recognition of self-pollen is controlled by a single locus, termed the S-locus. The self-incompatibility (SI) system in Brassica is controlled sporophytically by multiple alleles at a single locus, designated as S, and involves cell-cell communication between male and female. Two highly polymorphic S locus genes, SLG (S locus glycoprotein) and SRK (S receptor kinase), have been identified, both of which are expressed predominantly in the stigmatic papillar cell. Gain-of-function experiments have demonstrated that SRK solely determines S haplotype-specificity of the stigma, while SLG enhances the recognition reaction of SI. The sequence analysis of the S locus genomic region of B. campestris (syn. rapa) has led to the identification of an anther-specific gene, designated as SP11/SCR, which is the male S determinant. Molecular analysis has demonstrated that the dominance relationships between S alleles in the stigma were determined by SRK itself, but not by the relative expression level. In contrast, the expression of SP11/SCR from the recessive S allele was specifically suppressed in the S heterozygote, suggesting that the dominance relationships in pollen were determined by the expression level of SP11/SCR. Furthermore, recent studies on recessive allele-specific DNA methylation of Brassica self-incompatibility alleles demonstrate that DNA methylation patterns in plants can vary temporally and spatially in each generation. In this review, we firstly present overview of self incompatibility system in Brassica and then describe dominance relationships in Brassica self- incompatibility regulated by allele-specific DNA methylation.
Kim, Il-Chul;Chi, Seung-Wook;Kim, Dae-Won;Choi, Sang-Haeng;Chae, Sung-Hwa;Park, Hong-Seog
Genomics & Informatics
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v.3
no.4
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pp.142-148
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2005
The immune response-related genes have been suggested to be the most favorable genes for positive selection during evolution. Comparing the entire DNA sequence of chimpanzee chromosome 22 (PTR22) with human chromosome 21 (HSA21), we have identified 15 orthologs having indel in their coding sequences. Among them, interferon-${\alpha}$ receptor-1 gene (IFNAR1), an immuneresponse-related gene, is subjected to comparative genomic analysis. Chimpanzee IFNAR1 showed the same genomic structure as human IFNAR1 (11 exons and 10 introns) except the 3 bp insertion in exon 4. The sequence alignment of IFNAR1 coding sequence indicated that 'ISPP' amino acid sequence motif is highly conserved in chimpanzee and other animals including mouse and chicken. However, the human IFNAR1 shows that one proline residue is missing in the sequence motif. The homology modeling of the IFNAR1 structures suggests that the proline deletion in human IFNAR1 leads to the formation of the following ${\alpha}$-helix, whereas two sequential prolines in chimpanzee IFNAR1 inhibit it. As a result, human IFNAR1 may adopt a characteristic structure distinct from chimpanzee IFNAR1. This human specific trait could contribute to specific immune response in the most optimized manner for humans. Further molecular biological studies on the IFNAR1 will help us to gain insights into the molecular implication of species-specific host-pathogen interaction in primate evolution.
Bacillus cereus causes two different types of food poisoning syndromes: diarrhea and emesis. The diarrheal syndrome is attributed to various enterotoxins, including nonhemolytic enterotoxin, hemolytic enterotoxin, and enterotoxin-T, whereas the emetic syndrome is caused by the dodecadepsipeptide toxin cereulide. A multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay was developed to rapidly detect and identify B. cereus strains. Three primer pairs specific to regions within genes encoding nonhemolytic enterotoxin (nheA), molecular chaperonin (groEL), and cereulide synthetase (ces) were used to identify and differentiate between the enterotoxin-producing and emetic toxin-producing B. cereus strains. The cereulide-producing emetic B. cereus showed 3 PCR products of 325, 405, and 685 bp for the groEL, ces, and nheA genes, respectively, whereas the enterotoxin-producing B. cereus showed 2 PCR products without a ces gene specific DNA fragment. Specific amplifications and differentiations by multiplex PCR assay were obtained using 62 B. cereus strains and 13 strains' of other bacterial species. The detection limit of this assay for enterotoxin-producing strain and emetic toxin-producing strain from pure cultures were $2.4{\times}10^1$ and $6.0{\times}10^2\;CFU/tube$, respectively. These results suggest that our multiplex PCR method may be useful for the rapid detection and differentiation of B. cereus strains in foods.
Zoysiagrass has been used in Korea as a native grass. Informations on distributions, classifications, breeding efforts and outputs, current production and uses of zoysiagrasses in Korea are summarized. During past a few decades, collection of naturally growing zoysiagrass ecotypes has been continued, followed by evaluation, selection and cross-pollination. Classification efforts using important morphological, biochemical traits and DNA polymorphisms resulted in the several suggestions of grouping zoysiagrass species and varieties. Zoysia japonica consistently form separate group, while Zoysia sinica and Zoysia macrostackya have been separately or inter-mixed. Z. matrella with some variations frequently grouped separately but with some similarity with Z. tenuifolia, which was recently renamed as Z. pacifica. Hybrid types of zoysiagrasses were frequently found in Korea. New varieties such as 'Kunhee' and 'Green Ever' etc. were bred by ecotype selections, while 'Senock', 'Semil', 'Millock' were bred through pollination. Molecular approaches were also used to introduce beneficial genes into zoysiagrasses with no practical outputs by legal regulations. Currently popular varieties are inter-specific hybrid types such as 'Anyang' and other local zoysiagrasses as well as common zoysiagrass (Zoysia japonica) Production area in Korea was estimated as 2,947 ha with increasing problems of mixed or contaminated species and varieties.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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