Seo, Jang-Kyun;Lee, Hyeok-Geun;Choi, Hong-Soo;Lee, Su-Heon;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.25
no.1
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pp.54-61
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2009
An infectious full-length clone of Soybean mosaic virus (SMV) strain G5H was constructed under the control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter. The cloned SMV G5H established infections upon simple rub-inoculation of soybean leaves with intact plasmid DNA. We demonstrated that this SMV G5H infectious DNA clone caused typical characteristic symptoms and virulence of SMV strain G5H in twelve tested soybean cultivars. Soybean cultivars Lee74, Somyungkong and Sowonkong developed systemic mosaic symptom while Kwanggyo, Taekwangkong, Hwangkeumkong and Geumjeongkong-l showed systemic necrosis. In contrast, Geumjeongkong-2, Jinpumkong-2, L29, V94-5152 and Ogden showed resistant response against SMV-G5H infection. We also determined full-length sequence of cloned SMV-G5H. The phyogenetic analyses reveal that SMV-G5H is most closely related to SMV-G5, and support that SMV-G5H might be derived from SMV-G5 by recombination rather than mutation.
Two soybean cultivars, Kwanggyo and Hwanggeum (soybean mosaic potyvirus (SMV)-resistant cultivars), that had been inoculated with a virulent strain (G-5H, 4) of soybean mosaic potyvirus produced necrotic lesions on inoculated leaves as well as on upper trifoliate leaves. Cells in the lesion area contained sparse numbers of virus particles and very few characteristic pinwheel inclusions. Although a hypersensitive-like cellular response occurred in the two resistant cultivars, this response did not prevent the virus from spreading systemically in these resistant hosts, indicating a different mechanism from the general hypersensitive reaction in relation to host resistance.
In surveys of weed occurrence undertaken from 2006 to 2007, near to the Daegu experimental fields of the National Institute of Crop Science, plants belonging to 31 families, 74 genera and 96 species were found. For the investigation of the natural or alternative hosts of Soybean yellow mottle mosaic virus (SYMMV), 495 plant samples belonging to 26 families 84 species were subjected to RT-PCR. SYMMV was detected only from legume plants such as Glycine soja, Vigna angularis var. nipponensis, Trifolium repens, and Lespedeza cuneata. Among legume plants tested, more than a third of G. soja (wild soybean) contained SYMMV, indicating that the wild soybean played an important role as a reservoir of SYMMV. Wild soybeans may be infected with SYMMV as early as mid-July. Considering the results of early infection and the high infection rate of seed and seed transmission of SYMMV in G. soja, wild soybeans may have played an important role in the completion of disease cycle of the virus.
Phan, Mi Sa Vo;Seo, Jang-Kyun;Choi, Hong-Soo;Lee, Su-Heon;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.2
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pp.159-167
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2014
Molecular and biological characteristics of an isolate of Cucumber mosaic virus (CMV) from Glycine soja (wild soybean), named as CMV-209, was examined in this study. Comparison of nucleotide sequences and phylogenetic analyses of CMV-209 with the other CMV strains revealed that CMV-209 belonged to CMV subgroup I. However, CMV-209 showed some genetic distance from the CMV strains assigned to subgroup IA or subgroup IB. Infectious full-genome cDNA clones of CMV-209 were generated under the control of the Cauliflower mosaic virus 35S promoter. Infectivity of the CMV-209 clones was evaluated in Nicotiana benthamiana and various legume species. Our assays revealed that CMV-209 could systemically infect Glycine soja (wild soybean) and Pisum sativum (pea) as well as N. benthamiana, but not the other legume species.
Soybean mosaic virus (SMV) is a prevalent pathogen that causes significant yield reduction in soybean production worldwide. SMV belongs to potyvirus and causes typical symptoms such as mild mosaic, mosaic and necrosis. SMV is seed-borne and also transmitted by aphid. Eleven SMV strains, G1 to G7, G5H, G6H, G7H, and G7a were reported in soybean varieties in Korea. A reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) method allowed one-step detection of gene amplification by simple procedure and needed only a simple incubator for isothermal template. This RT-LAMP method allowed direct detection of RNA from virus-infected plants without thermal cycling and gel electrophoresis. In this study, we designed RT-LAMP primers named SML-F3/B3/FIP/BIP from coat protein gene sequence of SMV. After the reaction of RT-LAMP, products were identified by electrophoresis and with the detective fluorescent dye, SYBR Green I under daylight and UV light. Optimal reaction condition was at $58^{\circ}C$ for 60 min and the primers of RT-LAMP showed the specificity for nine SMV strains tested in this study.
Soybean mosaic virus (SMV) infection in seeds wits investigated by an immunochemical method Seven soybean cultivars or lines Bughae No.1, KAS 662-7, Chungbugbaeg, Gwanggyo Clark, Bongeui, and Gangrim were tested using hypocotyls of germinated seeds and presence of SMV was detected in six soybean cultivars but Gangrim. The level of SMV infection in the assayed cultivars varied from 2.1 to $12.5\%$. It seemed that seed coat mottling had no correlation with seeds. SMV infection of the seeds since virus has not always been detected from the mot tled seeds SMV has not been detected in the seeds of variety Gwanggyo which showed necrotic symptoms.
Jo, Yeonhwa;Choi, Hoseong;Bae, Miah;Kim, Sang-Min;Kim, Sun-Lim;Lee, Bong Choon;Cho, Won Kyong;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.5
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pp.478-487
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2017
Soybean is the most important legume crop in the world. Several diseases in soybean lead to serious yield losses in major soybean-producing countries. Moreover, soybean can be infected by diverse viruses. Recently, we carried out a large-scale screening to identify viruses infecting soybean using available soybean transcriptome data. Of the screened transcriptomes, a soybean transcriptome for soybean seed development analysis contains several virus-associated sequences. In this study, we identified five viruses, including soybean mosaic virus (SMV), infecting soybean by de novo transcriptome assembly followed by blast search. We assembled a nearly complete consensus genome sequence of SMV China using transcriptome data. Based on phylogenetic analysis, the consensus genome sequence of SMV China was closely related to SMV isolates from South Korea. We examined single nucleotide variations (SNVs) for SMVs in the soybean seed transcriptome revealing 780 SNVs, which were evenly distributed on the SMV genome. Four SNVs, C-U, U-C, A-G, and G-A, were frequently identified. This result demonstrated the quasispecies variation of the SMV genome. Taken together, this study carried out bioinformatics analyses to identify viruses using soybean transcriptome data. In addition, we demonstrated the application of soybean transcriptome data for virus genome assembly and SNV analysis.
Soybean plants infected with Bean pod mottle virus (BPMV) develop acute symptoms that usually decrease in severity over time. In other plant-virus interactions, this type of symptom recovery has been associated with degradation of viral RNAs by RNA silencing, which is accompanied by the accumulation of virus-derived small interfering RNAs (siRNAs). In this study, changes in the accumulation of BPMV siRNAs were investigated in soybean plants infected with BPMV alone, or infected with both BPMV and Soybean mosaic virus (SMV) and in transgenic soybean plants expressing SMV helper component-protease (HC-Pro). In many potyviruses, HC-Pro is a potent suppressor of RNA silencing. In plants infected with BPMV alone, accumulation of siRNAs was positively correlated with symptom severity and accumulation of BPMV genomic RNAs. Plants infected with both BPMV and SMV and BPMV-infected transgenic soybean plants expressing SMV HC-Pro exhibited severe symptoms characteristic of BPMVSMV synergism, and showed enhanced accumulation of BPMV RNAs and siRNAs compared to plants infected with BPMV alone and nontransgenic plants. Likewise, SMV HC-Pro enhanced the accumulation of siRNAs produced from a silenced green fluorescent protein gene in transient expression assays, while the P19 silencing suppressor of Tomato bushy stunt virus did not. Consistent with the modes of action of HC-Pro in other systems, which have shown that HC-Pro suppresses RNA silencing by preventing the unwinding of duplex siRNAs and inhibiting siRNA methylation, these studies showed that SMV HC-Pro interfered with the activities of RNA-induced silencing complexes, but not the activities of Dicer-like enzymes in antiviral defenses.
Soybean mosaic virus (SMV) is the predominant viral pathogen that affects the yield and quality of soybean. The natural host range for SMV is very narrow, and generally limited to Leguminosae. However, we found that SMV can naturally infect Pinellia ternata and Atractylodes macrocephala. In order to clarify the molecular mechanisms underlying the cross-family infection of SMV, we used double-stranded RNA extraction, rapid amplification of cDNA ends polymerase chain reaction and Gibson assembly techniques to carry out SMV full-length genome amplification from susceptible soybeans and constructed an infectious cDNA clone for SMV. The genome of the SMV Shanxi isolate (SMV-SX) consists of 9,587 nt and encodes a polyprotein consisting of 3,067 aa. SMV-SX and SMV-XFQ008 had the highest nucleotide and amino acid sequence identities of 97.03% and 98.50%, respectively. A phylogenetic tree indicated that SMV-SX and SMV-XFQ018 were clustered together, sharing the closest relationship. We then constructed a pSMV-SX infectious cDNA clone by Gibson assembly technology and used this clone to inoculate soybean and Ailanthus altissima; the symptoms of these hosts were similar to those caused by the virus isolated from natural infected plant tissue. This method of construction not only makes up for the time-consuming and laborious defect of traditional methods used to construct infectious cDNA clones, but also avoids the toxicity of the Potyvirus special sequence to Escherichia coli, thus providing a useful cloning strategy for the construction of infectious cDNA clones for other viruses and laying down a foundation for the further investigation of SMV cross-family infection mechanisms.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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