Oh, Myung Jin;Na, Hye Ryun;Choi, Hong-Keun;Liu, Jang Ryol;Kim, Suk Weon
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.1
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pp.87-92
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2008
An improved protocol for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of watershield (Brasenia schreberi) was developed. Zygotic embryos formed pale-yellow globular structures and white friable callus at a frequency of 80% when cultured on halfstrength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. However, the frequency of formation of pale-yellow globular structures and white friable callus decreased slightly with increasing concentrations of 2,4-D up to $3mg\;l^{-1}$, where the frequency reached ~50% of the control. Cell suspension cultures from zygotic embryoderived white friable callus were established using half-strength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. Upon plating of cell aggregates on half-strength MS basal medium, approximately 8.3% gave rise to somatic embryos and developed into plantlets. However, the frequency of plantlet development from cell aggregates was sharply increased (by up to 55%) when activated charcoal and zeatin were applied. Regenerated plantlets were successfully transplanted to potting soil and grown to normal plants in a growth chamber. The distinctive feature of this study is the establishment of a high frequency plant regeneration system via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of water-shield, which has not been previously reported. The protocol for plant regeneration of watershield through somatic embryogenesis could be useful for the mass propagation and transformation of selected elite lines.
Young Hee Kwon;Joung Kwan Lee;Hee Kyu Kim;Kyung Ok Kim;Ju Hyoung Kim
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2020.08a
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pp.19-19
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2020
The Cassava(Manihot esculenta Crantz) is a tropical root crop, originally from Amazonia, that provides the staple food of an estimated 800 million people worldwide. It belongs to the family Euphorbiaceae which also includes rubber (Hevea brasiliensis) and castor bean (Ricinus communis). Among tropical crops, rice, sugarcane, maize and cassava are the most important sources of calories for human consumption. Problems in the propagation of cassava are virus diseases and low rates of seed germination. So we tried to optimize protocols for mass production of somatic embryo amenable to large-scale vegetative propagation of Cassava. After in vitro eight-week culture of leaves of Cassava, the medium which contained the 2,4-D, BAP and IBA showed the highest callus induction rate, embryogenesis callus formation rate and somatic embryo formation in Cassava culture. In the medium with GA3 and myo-inositol, shoots were most vigorously regenerated from somatic embryos of Cassava. Our experiments confirmed that in vitro growth and multiplication of plantlets could depend on its reaction to the different medium composition, and this micropropagation techniques could be a useful system for healthy and vigorous plant production.
This study describes the effect of the growth regulators such as 2,L-D and BA, on the structural abnormalities of somatic embryos derived from leaf explants of Angelica gigas Nakai, Also, the relationship between the cotyledon number of a somatic embryo and its germinability is explored. Embryogenic calli were selected from calli formed on explants cultured on MS solid basal medium supplemented with 0.5mg/L 2,4-D, 1mg/L 2,4-D, 1mg/L plus 0.1mg/L BA, and 1 mg/L 2,4-D plus 0.5mg/L BA. Cotyledonary abnormalities were observed in somatic embryos which were developed from embryogenic calli cultured on MS medium containing 1mg/L 2,4-D for 8 weeks and then subcultured on 2,4-D free MS medium for 3 weeks. The frequency of abnormalities was as follows: 22.8% one cotyledon, 42.5% two cotyledons, 16.8% three cotyledons, 7.8% four cotyledons, 1.8% five cotyledons, and 8.2% jar shaped cotyledon. In addition, ABA treatment indicated an improvement of the somatic embryo with normal cotyledon (65.3%). ABA was important role to the high production of normal somatic embryos. Two cotyledon embryos showed germinability 77.8%. However the germinability of somatic embryos with anomalous cotyledons was prominently low: One cotyledon, 62.5%; three cotyledons, 43.3%; four cotyledons, 60%; five cotyledons, 50% and jar shaped cotyledon, zero%. Thus, germinability was essentially, inversely proportional to cotyledon number.
Immature zygotic embryos of five Korean soybean cultivars cultured on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with various concentrations of 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) produced somatic embryos without forming an intervening callus. The highest frequency (up to 90%) of somatic embryo formation was obtained when zygotic embryos were cultlued on medium containing 1 to 2 mga 2, 0-D in four cultivars. However the frequency was highly variable to the cultivars. Transversely sliced primary somatic embryo halves were also capable of forming secondary embryos at frequencies of up to 70% when cultured on medium containing 0.1 to 1 mg/L 2,4-D. Somatic embryos formed on zygotic embryos cultured on medium containing 0.1 to 0.2 mg/L 2,4-D had two cotyledons more frequently than one horn-type cotyledon and those on medium containing 0.5 to 4mg/L 2,4-LD had a horm-type cotyledon at a prominently higher freequency. However somatic embryos on medium containing 10mg/L or higher concentrations of 2,4-D were usually shunted at the globular stage even after transfer to medium containing lower concentrations of 2,4-D or other growth regulators. non somatic embryos with one or two cotyledons or a hem-type cotyledon were transferred to medium containing $GA_3$, those with two cotyledons converted to plantlets at a higher frequency (25%) than the others.
Woo, Jong Ho;Choi, Myung Suk;Joung, Eun Yi;Chung, Won Il;Jo, Jin Ki;Park, Young Goo
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.84
no.1
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pp.41-47
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1995
A micropropagation system for black Locust(Robinia pseudoacacia) was established by using shoots and pin-punctured leaves of in vitro germinated seedlings. The greatest number of shoots (an average of 10.5 shoots) was obtained when shoot tips were cultured on MS medium supplemented with 1.0 mg/l BAP and 0.01 mg/l NAA. When pin-punctured leaf explants were cultured on the same medium, mean number of 13.5 shoots were produced. Shoot growth was accelerated by adding 50 mg/l of silver nitrate ($AgNO_3$), an anti-ethylene compound to the culture medium. Each shoot was excised from the mass and transferred onto half strength MS medium for rooting. Zygotic embryos at different developmental stages were cultured on LS medium supplemented with various growth regulators to induce somatic embryos. When cultured on LS medium with 1.0 mg/l 2,4-D. 14.3% of the zygotic embryos induced somatic embryos. Upon transfer onto the basal medium, somatic embryos sporadically converted into plantlets.
An, Chan-Hoon;Yi, Jae-Seon;Kim, Yong-Wook;Moon, Heung-Kyu
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.99
no.3
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pp.423-431
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2010
To determine physical and physiological factors for Liriodendron tulipifera L. somatic embryo germination, temporary immersion bioreactor (TIB) system was investigated. It was designed to immerse liquid media with plantlets so that it was able to adjust the immersion time. Immersion of 120 minutes every 4 hours and 60 minutes every 4 hours was found to be effective in germination (91.64%, 85.67%, respectively). However, hyperhydricity of the plantlets was higher in short immersion time (15 minutes every 6 hours) and long immersion time (120 minutes every 4 hours) (51.61%, 34.28%, respectively). Immersion of 60 minutes every 4 hours showed the lowest hyperhydric plantlets, and also it showed the lowest activities of abscisic acid (ABA), superoxide dismutase (SOD), and catalase. The overall results implied that immersion time of media affected germination and growth of somatic embryo, and it was able to make use of germination and growth of L. tulipifera somatic embryos.
In this study, we established a novel somatic embryogenesis and plant regeneration system through cell suspension culture of white dandelion (Taraxacum coreanum NAKAI.). Embryogenic calli could be initiated from leaf and root explants of sterile seedlings on solid Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 1.0 mg/L 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) after 3-week cultures. To proliferate embryogenic calli rapidly, cell suspension culture was performed with transferred to liquid MS medium with various combinations of plant growth regulators (PGRs) including 2,4-D, ${\alpha}$-naphthalene acetic acid (NAA), indole-3-acetic acid (IAA), $N^6$-benzylamino purine (BAP), thidiazuron (TDZ), and kinetin. During suspension cultures, embryogenic calli not only greatly proliferated, but shoot organogenesis also simultaneously occurred from the surface of somatic embryos. Among them, TDZ at lower concentration, 0.1 mg/L produced the highest efficiency of somatic embryo formation and shoot organogenesis. Rooting of embryogenic calli with adventitious shoots was done on solid MS medium containing 0.1 mg/L NAA and 0.3% activated carbon. Nearly 80% of embryogenic calli with shoot organogenesis could be rooted normal. Well-rooted plantlets were transferred into pots under a greenhouse condition, and plants derived from this system appeared phenotypically normal.
Kim, Jae-Whune;Lee, Won-Seok;Kwon, Ki-Won;In, Jun-Gyo;Choi, Yong-Eui
Journal of Plant Biotechnology
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v.30
no.3
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pp.275-279
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2003
Excised cotyledons and embryo axises of zygotic embryos of Rhus vemicifera were cultured on Murashige and Skoog(MS) medium with various concentrations of 2,4-D. About 3-5% of explants produced callus. Embryogenic callus was preferentially induced from basal parts of embryo axis of zygotic embryos seeds when they were cultured without removal of seed coats. Somatic embryos were developed from embryogenic callus in growth regulator-free medium after 2-3 subcultures on medium with 1.0mg/L 2,4-D and these embryos were matured to cotyledonary stage. Plantlets with well-developed shoots and roots from embryos were obtained on $\frac{1}{4}$MS medium with GA$_{3}$. After acclimatization of plantlets on artificial soil, they were exposed to soil pots.
In this paper, we would like to show unexpected morphogenic potential of cell suspensions derived from seedling explants of Gentiana kurroo (Royle). Suspension cultures were established with the use of embryogenic callus derived from seedling explants (root, hypocotyl and cotyledons). Proembryogenic mass proliferated in liquid MS medium supplemented with $0.5mg\;l^{-1}$ 2,4-D and $1.0mg\;l^{-1}$ Kin. The highest growth coefficient was achieved for root derived cell suspensions. The microscopic analysis showed differences in aggregate structure depending on their size. To assess the embryogenic capability of the particular culture, 100 mg of cell aggregates was implanted on MS agar medium supplemented with Kin ($0.0-2.0mg\;l^{-1}$), $GA_3$ ($0.0-2.0mg\;l^{-1}$) and AS ($80.0mg\;l^{-1}$). The highest number of somatic embryos was obtained for cotyledon-derived cell suspension on $GA_3$-free medium, but the best morphological quality of embryos was observed in the presence of $0.5-1.0mg\;l^{-1}$ Kin, $0.5mg\;l^{-1}$$GA_3$ and $80.0mg\;l^{-1}$ AS. The morphogenic competence of cultures also depended on the size of the aggregate fraction and was lower when size of aggregates decreased. Flow cytometry analysis reveled luck of uniformity of regenerants derived from hypocotyl suspension and 100% of uniformity for cotyledon suspension.
The mechanistic target of rapamycin (mTOR) pathway coordinates the metabolic activity of eukaryotic cells through environmental signals, including nutrients, energy, growth factors, and oxygen. In the nervous system, the mTOR pathway regulates fundamental biological processes associated with neural development and neurodegeneration. Intriguingly, genes that constitute the mTOR pathway have been found to be germline and somatic mutation from patients with various epileptic disorders. Hyperactivation of the mTOR pathway due to said mutations has garnered increasing attention as culprits of these conditions : somatic mutations, in particular, in epileptic foci have recently been identified as a major genetic cause of intractable focal epilepsy, such as focal cortical dysplasia. Meanwhile, epilepsy models with aberrant activation of the mTOR pathway have helped elucidate the role of the mTOR pathway in epileptogenesis, and evidence from epilepsy models of human mutations recapitulating the features of epileptic patients has indicated that mTOR inhibitors may be of use in treating epilepsy associated with mutations in mTOR pathway genes. Here, we review recent advances in the molecular and genetic understanding of mTOR signaling in epileptic disorders. In particular, we focus on the development of and limitations to therapies targeting the mTOR pathway to treat epileptic seizures. We also discuss future perspectives on mTOR inhibition therapies and special diagnostic methods for intractable epilepsies caused by brain somatic mutations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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