Embryogenic calli of Codonopsis lanceolata were cultured on MS agar medium containing various concentrations of sucrose as a carbon source. Upon transfer to MS basal medium, somatic embryos of cotyledonary stage converted to plantlets. When sucrose was added with greater than 4%, the number of shoots and roots regenerated from somatic embryo increased. However, the growth of shoots and roots was retarded in agar medium with more than 2% sucrose, but promoted in medium with lower concentration of sucrose. Saponin contents of shoots regenerated from somatic embryos, embryogenic calli, non-embryogenic calli, and native roots were determined by HPLC. Saponin contents of native root was variable, depending on regenerant, embryogenic calli, and cotyledonary embryos. The saponin contents of regenerated roots in medium with high sucrose was similar to native roots. Saponins content based on cell differentiation to shoot and root was dramatically decreased. This results could be effectively controlled for the production of useful secondary metabolites.
An, Chan Hoon;Kim, Yong Wook;Moon, Heung Kyu;Yi, Jae Seon
Journal of Plant Biotechnology
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v.43
no.1
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pp.110-118
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2016
We compared germination efficiency for somatic embryos (SE) of Liriodendron tulipifera using semi-solid (SS), temporary immersion bioreactors (TIB), and continuous immersion bioreactors (CIB) to produce vigorous plants. The bioreactors were designed to be immersed in liquid media with plantlets with an adjustable immersion time. TIB and CIB improved germination rates up to 80.86% and 95.21%, respectively, however, CIB produced more hyperhydric plantlets than TIB. The height of plantlets in TIB was significantly higher than for those in CIB. Fresh weights of plantlets grown in CIB of were significantly lower than for those grown in TIB. The lowest chlorophyll concentration was found in in vitro plantlets from CIB. We examined abnormally developed leaves, stems, and apical zones of in vitro plantlets that were produced in CIB. Among the three types, SS showed the highest stomatal density and the shortest stomatal length in in vitro plantlets. After acclimatization, plants from CIB exhibited the lowest values in biomass, such as height, root collar diameter, leaf fresh weight, leaf length, leaf width, petiole length, petiole diameter, and leaf area. Photosynthesis and transpiration rates of ex vitro plants were not significantly different among the three culture types, but stomatal conductance was higher in TIB than in the SS and CIB. Therefore, the results suggest that TIB is the preferable bioreactor to improve in vitro plantlet regeneration of L. tulipifera. TIB-originated plants showed higher growth rate than SS and CIB after transferring to soil.
In vitro high-frequency plant regeneration of Muscari comosum var. plumosum through somatic embryogenesis was obtained via two developmental pathways: direct embryos and multiple shoots regenerated from embryogenic callus. Flower bud with pedicel, receptacle, petal and ovary wall, floral stalk and leaf as explants were cultured in MS medium supplemented with various plant growth regulators. Embryos formed directly from pedicel, receptacle and floral stalk. Depending on explant sources, the optimal medium was MS medium supplemented with 0.2 mg/L IBA and 0.3 mg/L BA, 3.0 mg/L IBA and 3.0 mg/L BA, and MS-free medium for pedicel, receptacle, and floral stalk, respectively. Multiple shoots regenerated from embryogenic cal]i which was initiated from petal, ovary and leaf were observed in MS medium with different concentrations and combinations of hormone. The most suitable medium for each type of explant was 3.0 mg/L IBA and 3.0 mg/L BA(petal and ovary) and 5.0 mg/L IBA and 5.0 mg/L BA (leaf) Furthermore, the combination of 0.1 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L BA was also good for all sources of explants not only for direct embryo formation, but also, for embryogenic callus induction.
Kim, M.S.;Lee, Y.Y.;Park, J.J.;H.Y. Kang;Y.M. Chang;Yoon, J.T.;K.S. Min
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.82-82
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2003
Offspring have been produced from somatic cells in a number of species. This biotechnology introduced a new phenomenon in reprogramming and differentiation of somatic cell, namely totipotency. However, birth of oversized calves and perinatal abnormalities such as increased gestation length, lack of spontaneous parturition, higher incidence of dystocia, and reduced perinatal viability of offspring are frequently observed in pregnancies of cloned bovine fetuses. Disturbance of feto-placenta has been proposed as likely causes for abnomal growth. However. Little is known the mechanism responsible for the perinatal problems. Therefore, we focused on gestation length in somatic cell nuclear recipient cows. To solve this issues, placental tissues of control and cloned bovine were obtained by a cesarean section (C-section) before 5 days of paturition. Total RNA from control and cloned bovine placenta was extractd by TRIzol reagent. GeneFishing DEG kits (Seegene) were used to identify differentially expression genes. Total RNA (3 ug) were synthesized by M-MLV reverse transcriptase (200 u/ul) with 10 uM dT-annealing control primer (ACP1) at 42C for 90 min. Then, first-strand cDNA (50 ng) was amplified using the 5 uM arbitary ACP (1-20) and 10 uM dT-ACP2 primers. Some specific expression genes were amplified, Now, we are cloning and sequencing. These finding strongly can be support to solve the problems for parturition delay in nuclear transfer cows, suggest that placenta specific proteins are key indicators for the aberration of gestation and placental function in cows.
The effects of growth regulators, sucrose and gelling agents were investigated to increase the efficiency of the callus growth and plant regenerarion in tissue culture of Angelica koreana Max. The fresh weight and dry weight of subcultured callus was highest in MS medium supplemented with 1 mg/l 2,4-D. Callus growth was excellent in 2% sucrose, but it was inhibited in propotion to sucrose content. Effect of gelling agents on callus growth was highest on 1.2% agar and 0.4% Gelrite medium, respectively. The browning of callus was protected on the media supplemented with 10 mg/l ABA and 5 or 10 mg/l $AgNO_3$. In the callus induction and growth from the peduncle of immature inflorescence, 2,4-D was more effective than NAA, and the frequency of callus induction was highest as 81.7% in 2 mg/l 2,4-D. Plant was not regenerated from the callus derived from young leaf. Somatic embryos were developed from the surface of callus drived from the peduncle of immature inflorescence in the medium containing 0.5 mg/l 2,4-D, 1 mg/l kinetin, 5 mg/l ABA and 5 mg/l $AgNO_3$. Plants were developed from the matured somatic embryos in the medium supplemented with 0.2 mg/l 2,4-D and 1 mg/l kinetin.
Over the past decades, in vitro culture media have been developed to successfully support IVF embryo growth in a variety of species. Advanced reproductive technologies, such as somatic cell nuclear transfer (SCNT), challenge us with a new type of embryo, with special nutritional requirements and altered physiology under in vitro conditions. Numerous studies have successfully reconstructed cloned embryos of domestic animals for biomedical research and livestock production. However, studies evaluating suitable culture conditions for SCNT embryos in wildlife species are scarce (for both intra- and interspecies SCNT). Most of the existing studies derive from previous IVF work done in conventional domestic species. Extrapolation to non-domestic species presents significant challenges since we lack information on reproductive processes and embryo development in most wildlife species. Given the challenges in adapting culture media and conditions from IVF to SCNT embryos, developmental competence of SCNT embryos remains low. This review summarizes research efforts to tailor culture media to SCNT embryos and explore the different outcomes in diverse species. It will also consider how these culture media protocols have been extrapolated to wildlife species, most particularly using SCNT as a cutting-edge technical resource to assist in the preservation of endangered species.
Partial desiccation of embryogenic calli cultures or somatic embryos leads to different physiological changes and maturation of somatic embryos, leading to improved plant regeneration. Embryogenic calli was induced from immature inflorescence segments and young leaf rolls of sugarcane (Saccharum officinarum hybrids CoC-671) on Murashige and Skoog's basal medium enriched with different concentrations of 2,4-D ($1-4\;\cal{mg/l}$), L-glutamine ($100\cal{mg/l}$), malt extract ($100\cal{mg/l}$), casein hydrolysate ($1000\;\cal{mg/l}$) and coconut milk ($5\%$) and solidified with $0.2\%$ gel rite. The embryogenic calli were subjected to desiccation for 1-8 h. Desiccation of the calli for 6-7 h resulted in enhancement of plant regeneration frequency ($83-96\%$) as compared to control ($12\%$). Plantlets exhibited vigorous growth to maturity in the greenhouse. Partial desiccation of embryogenic calli offers as a simple method for improving plant regeneration frequency in sugarcane.
Changes of peroxidase activity, polyamine content and ethylene production during somatic embryogenesis in suspension-cultured carrot (Daucus carota L.) cells were investigated. As compared with nonembyrogenic cells and their medium, embryogenic cells and their medium were characterized by higher levels of peroxidase at all times of culture period. Peroxidase in embryogenic cells showed higher oxidation activity of IAA than in nonembryogenic cells at the torpedo stage, but the IAA oxidation activity of peroxidase released into embryogenic medium was lower than that of peroxidase released into nonembryogenic medium. Peroxidase patterns of embryogenic and nonembryogenic cells showed three cathodic bands, and one anodic band, while peroxidase patterns released into embryogenic and nonembryogenic media did not show any anodic bands and the isoelectric points of cathodic peroxidase were pH 7.7, 7.5 and 6.6. Compared with nonembryogenic cells, polyamine content in embryogenic cells was increased by 15% at the torpedo stage, but polyamine ratio was constant, and ethylene production was extremely low at all times of culture period. Therefore, it is suggested that the peroxidase in embryogenic cells is correlated with embryogenesis by regulating hormone ratios through IAA oxidation, while the peroxidase isozyme patterns may be used as a biochemical marker of embryogenesis. The increase of polyamine content and the decrease of ethylene production suggest an interaction between polyamine and ethlyene during embryogenesis.
The halophyte Leymus chinensis (Trin.) is a perennial rhizome grass (tribe Gramineae) that is widely distributed throughout China, Mongolia and Siberia. This study was conducted to investigate an optimal condition for plant regeneration from mature seeds, leaf base segments, and root segments in L. chinensis. Plant growth regulators affecting embryogenic callus induction and plant regeneration were investigated by four-factor-three-level [L9 (34)] orthogonal test in this study. The effects of explants types (mature seeds, leaf base segments and root segments), callus types, medium types were examined in this study. Wild type (WT) and Jisheng No. 1 plants (JS) were used for primary callus induction. A clear explants difference was seen during callus induction; mature seeds were considered as the preferred explants; and the highest frequency of callus induction was obtained in Medium 6 using mature seeds as explants in WT. Plant regeneration ability was evaluated by frequencies of green callus forming, shooting, rooting, and shooting with roots. Effect of α-naphthalene acetic acid (NAA) on shoot regeneration was remarkable with the highest frequency of 70.8% in WT after 2-month culture. The medium with 0.2- 0.5 mg/L NAA was found to have the highest shoot induction. All regenerated shoots were successfully rooted when transferred on half-strength Murashige and Skoog (MS) basal medium. The acclimatized plantlets were grown to mature with flowering and seeds setting in green house conditions.
Journal of the Korean Society of Clothing and Textiles
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v.27
no.1
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pp.143-153
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2003
This study was conducted in order to provide basic study material for children's garment design. The subjects of this study are fifth and sixth grade elementary school girls, who demonstrate rapid growth and the differences among individual somatic types are apparent. Their bodies are studied, categorized into patterns and the characteristics are examined. 1 The increase of height and length measurements according to age increase are much larger than that of breadth, depth and girth menasurments. 2. Eight factors are drawn upon factor analysis and the rate of factors comprisedare 78.68%. 3. The shapes of lower body of higher grades girls in elementary school are classified into three categories. The first type is slender in lower body and the second type is more contoured around waist area with longer length and higher height than the average elementary school girls. The third type is heavy in the lower body. 4. Eighteen items important for somatic categorization are selected through stepwise discriminant analysis and the exactitude rate of these items is 93.3%.
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