• Parasites, Hosts and Diseases
• /
• 제30권2호
• /
• pp.133-140
• /
• 1992

T. sergenti merozoite 수용성 항원을 T. sergenti 감염적혈구로부터 분리하고자 저삼투압액으로 용혈, 조직 분쇄기로 분쇄한 후에 고속 원심분리하여 수용성 항원을 얻었으며, SDS-PAGE와 Western blot의 방법으로 29, 34, 35 그리고 105 kD가 함유된 항원을 본 예방접종실험의 항원성 polypeptide로 정하였다. 본 수용성 항원(0.5 mg/ml)을 준비, Freund's adjunant를 이용하여 한우(5개월령)에 경피 접종하였으며, 다시 4주 후에 추가접종하였다. 추가접종 9주 후에 예방 접종군과 대조군에 동종의 냉동충주(5.6$\times$106RBC/dose, 40% 기생률)을 접종시킨 후에 적혈구용적비, 총적혈구수, 기생률, western biot에 의한 특이항체 그리고 간접형광항체(IFA) 등을 관찰하였던 바, 예방접종 후 18주(충 접종 6주 후)에 있어서 예방접종군의 IFA는 10,240이었으나, 대조군은 1,280이었다. 예방접종군에 있어서의 충접종 전후에 있어서의 총적혈구소와 적혈구웅적비는 유의적 차이 (p<0.05)를 나타내지 않았지만, 대조군에 있어서는 적혈구용적비와 총적혈구수에서 있어서 빈혈 소견을 관찰하였다 (p<0.05). 예방접종군의 충전종 후에 있어서의 western blot 반응에서는 29, 34, 35 그리고 105 kD polypeptide의 물질이 면역반응을 잘 나타내고 있어, 이들 polypeptide는 앞으로 vaccine 제조에 활용 가능성이 충분함을 예견할 수 있었다.

• 한국잡초학회지
• /
• 제12권4호
• /
• pp.368-373
• /
• 1992

귀리에 alachlor를 처리(處理)할 때 변화(變化)되는 단백질(蛋白質)을 분석(分析)한 결과요약(結果要約)하면 다음과 같다. Alachlor 처리시(處理時) 단백질(蛋白質) 합성(合成)은 $1{\times}10^{-4}$M에서 5.8%, $1{\times}10^{-3}$M에서는 86.5% 억제(抑制)되는 현상(現象)을 보였지만 $1{\times}10^{-5}$M 이하(以下)의 농도(濃度)에서는 증가(增加)되는 현상(現象)을 보였다. 귀리의 근단분열조직(根端分裂組織)에서 추출(抽出)된 단백질(蛋白質)은 100 kd 이하(以下)의 polypeptide로 구성(構成)되어 있으며, alachlor 처리시(處理時) 47kd 이상(以上)의 고분자(高分子) 단백질(蛋白質)들은 억제(抑制)되었지만 23kd 이하(以下)의 저분자(低分子) 단백질(蛋白質)들은 오히려 증가(增加)되는 현상(現象)을 보였다. 이차원적(二次元的) 전기영동(電氣泳動) 결과(結果) alachlor 처리시(處理時) 83kd의 1, 2 spot, 70kd의 3, 4 spot, 47.5kd의 5, 6 spot의 polypeptide가 억제(抑制)된 반면(反面), 20kd의 7 spot, 16kd 의 8, 9, 10 spot는 증가(增加)되는 현상(現象)을 보였다. 또한 귀리 근단(根端) 분열조직(分裂組織)은 산성(酸性) 단백질(蛋白質)로서, 주(主)로 중성(中性) 부위(部位)에 큰 polypeptide spots들이 존재(存在)하고 있으며, 작은 spots을은 산성(酸性)쪽에 분리(分離)되어 나타났다.

• 한국식품영양학회지
• /
• 제3권2호
• /
• pp.123-132
• /
• 1990

Sweet potato $\beta$-amylase is a tetrameric enzyme consisting of four identical polypeptide chains with a molecular weight of 5.6$\times$104, though most of the other $\beta$-amylases are monomeric enzymes. But, the relationship between subunit structure and catalytic function of the enzyme is not known. This study was done to know what the function of the subunit structure of the enzyme is. We obtained the monomer from the enzyme by the treatment of SDS, alkali pH buffer and urea. But the monomer had not activity. We tried to prepare the active monomer from the enzyme by the modification with periodate-oxidized soluble starch , In the result, we succeeded in isolating an active monomer as an oxidized soluble starch-conjugated form The active monomer had 57% of the original activity, 13.2% of the sugar and the molecular weight was estimated to be 5.4$\times$104. This results suggest that the tetrameric form of the enzyme is a most stable one and exists in nature, and the subunit structure of the enzyme Plays an important role in stabilization but not catalytic function.

• 한국작물학회지
• /
• 제41권5호
• /
• pp.563-568
• /
• 1996

담배 생육단계별 RNA, protease 활성도와 단백질 패턴의 변화를 파악하여 노화가 진행되는 과정에서 생리 ㆍ생화학적인 변화의 기초자료를 얻고자 본 실험을 수행하였으며 결과는 다음과 같다. 가용성 단백질 함량은 출엽 후 15일까지 증가하여 출엽 후 35일까지 일정하게 유지하였다. 총 RNA 함량은 출엽 후 15일에 가장 높았으며 출엽후 30일까지 급격한 감소를 보였다. Protease 활성 변화는 중성 protease (pH 7.8)가 활성이 높았으며 노화말기인 출엽 후 50일부터 갑자기 증가하였다. 전기영동 패턴은 큰 변화가 없었으나 61.0kd의 polypeptide은 출엽 후 35일부터 생성되어 노화말기까지 증가하였다.

• 한국작물학회지
• /
• 제39권6호
• /
• pp.564-570
• /
• 1994

땅콩 품종에 있어서 종자발아 동안에 단백질의 함량 및 pattern(subunits)의 변화를 조사하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 땅콩의 저장단백질 패턴이 다른 남대와 대광의 자엽부에 대한 함수율의 변화는 거의 비슷하였으나 배축부에서는 치상 2일과 3일에 남대가 75.0％, 89.1%였고, 대광이 66.0%, 83.5%로서 남대가 다소 높은 함량을 나타내었다. 가용성 단백질의 함량 변화는 남대와 대광 두 품종 공히 자엽부에서는 2∼3일, 배축부에서는 치상 1∼2일 사이에 현저히 감소되었으며, 치상 5일에 자엽부에서는 28∼29%, 배축부에서는 10%의 함량을 나타내었다. 남대와 대광 두 품종의 arachin의 함량은 자엽부, 배축부에서 모두 남대 품종이 높은 값을 나타내었고, 발아 동안에 생성된 new protein은 자엽부에서 3일, 배축부에서 2일에 최고량을 보였다. arachin type이 상이한 남대와 대광 품종에서 발아동안에 대광의 자엽부에서만 치상 2일경부터 16kD의 band를 나타내었다. 발아가 진행됨에 따라 남대와 대광 품종의 자엽부에서는 66, 43, 40, (35.5)kD의 subunit들이 현저히 감소되어 치상 4일경에 소실되었고, 21.5∼23.0kD의 subunits는 완만한 감소로 유지되었으며, 14∼16kD의 low polypeptides는 점차 승가를 나타내었다. 또한, 배축부에서도 치상 2일 동안에 자엽부와 같은 경향을 나타내었다.

• Animal cells and systems
• /
• 제15권1호
• /
• pp.29-36
• /
• 2011

Insect lysozymes are basic, cationic proteins synthesized in fat body and hemocytes in response to bacterial infections and depolymerize the bacterial cell wall. The c-type lysozyme of the insect Spodoptera litura (SLLyz) is a single polypeptide chain of 121 residues with four disulfide bridges and 17 rare codons and is approximately 15 kDa. The full-length SLLyz cDNA is 1039 bp long with a poly(A) tail, and contains an open reading frame of 426 bp long (including the termination codon), flanked by a 54 bp long 5' UTR and a 559 bp long 3' UTR. As a host for the production of high-level recombinant proteins, E. coli is used most commonly because of its low cost and short generation time. However, the soluble expression of heterologous proteins in E. coli is not trivial, especially for disulfide-bonded proteins. In order to prevent inclusion body formation, GST was selected as a fusion partner to enhance the solubility of recombinant protein, and fused to the amplified products encoding mature SLLyz. The expression vector pGEX-4T-1/rSLLyz was then transformed into E. coli BL21(DE3)pLysS for soluble expression of rSLLyz, and the soluble fusion protein was purified successfully. Inhibition zone assay demonstrated that rSLLyz showed antibacterial activity against B. megaterium. These results demonstrate that the GST fusion expression system in E. coli described in this study is efficient and inexpensive in producing a disulfide-bonded rSLLyz in soluble, active form, and suggest that the insect lysozyme is an interesting system for future structural and functional studies.

• 미생물학회지
• /
• 제24권2호
• /
• pp.119-126
• /
• 1986

A periplasmic endoprotease, named protease Pi, was purified to homogeneity from Escherkchia coli by conventional procedure with insulin as substrate. This enzyme degrades insulin and glucagon to trichloroacetic acid-soluble meterials, but shows little or no hydrolysis of bovine serum albumin, casein or globin. Its molecular weight was 110, 000 when determined by gel filtration on Sephacryl S-300 and was 105, 000 when estimated by polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulfate. Thus, it appears to be single polypeptide. This snzyme is metalloprotease, since it is completely inhibited by o-phenanthroline and can be activated by addition of divalent metal cations, such as $Mg^{2+}\;and\;Co^{2+}$. It is destinct from protease Ci, a cytoplasmic insulin degrading enzyme, since protease Pi is localized to the periplasm. Since protease Pi selectively degrades GTP cyclohydrolase I, it appears to play a role in the regulation of pteridine biosynthesis.

• 자연과학논문집
• /
• 제4권
• /
• pp.1-10
• /
• 1991

발현 Vector인 pKK223-3를 이용하여 효모 Thiol-Specific Antioxidant단백질 유전자를 대장균에 도입시켜 이 단백질을 발현시켰다. 이 단백질은 대장균 단백질의 약 1% 정도로 발현되었으며, 물리 및 화학적 특성은 효모의 것과 동일한 특성을 보였다.

• Applied Biological Chemistry
• /
• 제18권4호
• /
• pp.194-202
• /
• 1975

이 연구(硏究)는 도시유기폐물(都市有機廢物)을 이용(利用)한 유기질비료(有機質肥料)로서 활성오니(活性汚泥) 및 진개퇴비(塵芥堆肥)를 킬레이트화 물질로서 利用(利用)하기 위(爲)해서 이들 물질(物質)의 특성(特性)을 조사(調査)하였다. 철(鐵)킬레이트화에 관여(關與)하는 수용성물질(水溶性物質)을 분자체 분획법(分劃法)으로 분리(分離)하여 자외선(紫外線)및 적외선분광(赤外線分光) 스펙트럼에 의해서 그 구조(構造)를 조사(調査)하였고 이들 킬레이트의 안정도상수(安定度常數)를 이온교환평형법(交換平衡法)으로 측정(測定)하여 이들을 킬레이트 물질로 사용(使用)하했을때 그 안정성(安定性)을 검사(檢討)하였다. 진개퇴비(塵芥堆肥)에서 추출(抽出)된 유기물질(有機物質)은 Sephadex G-25에 의(依)해 4개분획(個分劃)으로 분리(分離)되었고 이중 철(鐵)과 킬레이트를 이루고 있던 분획(分劃)은 분자량(分子量)이 $5000{\sim}10,000$ 사이에 있었고 Polyphenol구조(構造)의 산소군(酸素群)이 킬레이트화(化)에 관여(關與)하고 있었다. 활성오니중(活性汚泥中) 가용성(可溶性) 물질(物質)은 Sephadex G-25에 의(依)해 6개(個)의 분획(分劃)으로 분리(分離)되었고 이중 킬레이트를 이루고 있던 분획(分劃)은 $5000{\sim}10,000$ 또는 5000에 약간 미달(未達)하는 분자량(分子量)을 가지고 있고 Polypeptide의 amide기(基)가 킬레이트화에 관여(關與)하였다. 이들의 안정도상수(安定度常數)도 합성(合成)킬레이트 물질의 안정도상수(安定度常數)와 큰 차이(差異)가 없을 정도(程度)로 안정(安定)하였다.

• 한국환경농학회지
• /
• 제17권4호
• /
• pp.296-300
• /
• 1998

본 실험은 담배에서 염스트레스에 따른 생리적 반응의 연구결과(제1보)를 기초로, NaCl를 농도별로 처리하여 생체내에서 일어나는 생화학적인 변화의 구명을 통해 염해기작의 기초자료로 얻고자 수행한 결과를 요약하면 다음과 같다. 총단백질과 가용성단백질은 염농도가 높아질수록 감소하였으며 처리간에는 120mM까지는 완만히 감소하였고, 150mM에서는 급격한 감소를 나타냈다. 전기영동 패턴은 염농도의 증가에 따라 새로운 polypeptide band의 생성과 소멸은 없었으며 약 74Kd의 polypeptide band에서 30mM과 60mM까지는 뚜렷한 양이 증가하였고 90mM부터는 감소하였다. 엽록소함량은 염농도의 증가에 따라 감소하였으며 특히 염해에 의한 반응은 엽록소b보다는 엽록소a가 민감하였다. ATPase활성과 peroxidase의 활성은 염농도가 높아질수록 120mM까지는 일정하게 증가하였으나 150mM에서 급격히 증가하여 담배의 염해의 생화학적인 제한범위는 120mM로 나타났다.