The mechanisms and metabolic products involved in the degradation of an organophosphate insecticide, diazinon, were studied in submerged paddy soil under the laboratory condition at $30^{\circ}C$. Diazinon abatement in non-sterilized soil was more rapid than indicating microbial participation in diazinon in soil. One-half of the original applications was lost in 2 days and less than 5% remained after 7 days. During the same period, dizinon applications increased tha microbial populations in accordance with the monooxygenase and esterase activities in soil. These results suggest that the microbiological factors develop in soil following diazinon application. The esterase and monooxygenase-catalyzing degradation products of diazinon were isolated and tentatively identified by mass spectrometryas 2-isopropyle-6-methyl-4-hydroxy pyrimidine, diazoxon, hydroxydiazinon, and sulfotep.
E. coli TG1 pBS TOM Green was cultured to produce toluene-o-monooxygenase (TOM). A biosensor system was successfully constructed using purified TOM to effectively detect trichloroethene (TCE) and tetrachloroethene (PCE), which represent some of the major contaminants in groundwater and soil. In order to utilize TOM as a sensor, NADH, a biological oxidizer, was replaced with hydrogen peroxide which is a chemical oxidizing agent. A three-layered sandwich-type sensing tip was fabricated on the outside of the hydrophilic polyvinylidene fluoride membrane. TCE and PCE were applied to the sensor and the hydrogen ions were measured by a fiber optic fluorometer using fluoresceinamine. Calibration curves were obtained for TCE and PCE in the concentration range of 0.2-100 mg/l, and the detection limit of the system was $10{\mu}g/l$ for TCE and PCE.
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2003.09a
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pp.475-478
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2003
A sol-gel fiber-optic biosensor with encapsulated pH-sensitive fluorophore and immobilized genetically modified toluene-o-xylene monooxygenase was developed to detect TCE, which is carcinogenic chlorinate organic compounds prevailing in ground water. The sensitivity was characterized for the composition of sol-gel, and manufacturing procedure.
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2004.09a
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pp.277-280
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2004
TCE and PCE, suspected carcinogens, are the most common groundwater pollutant from extensive use as a solvent and degreaser. Escherichia coli TGI pBSKAN TOM Green and E. coli TGI pBSKAN ToMO, which were used DNA shuffling technique, produce Toluene-o-monooxygenase(TOM) and toluene-o-xylene- monooxygenase(ToMO). These cells and enzymes are degrading TCE and PCE, TOM and ToMO are needed to cofactor, such as NADH, NADPH and other cofactors. Used TCE and PCE degrading microorganisms experiment the contaminated material removal efficiency. A shunting test used NAD and Hydrogen peroxide.
In this study, potential degradation of MTBE and other gasoline oxygenates by pure culture ENV425 and mixed culture isolated from gasoline contaminated soil using butane as the sources of carbon and energy was examined and compared. Butane monooxygenases(BMO) of butane-grown ENV425 and mixed culture generated 1-butanol as a major metabolite of butane oxidation and addition of acetylene, specific inhibitor of monooxygenase, inhibited both butane oxidation and 1-butanol production. The results described in this study suggest that alkanes including propane, pentane, and butane are effectively utilized as a growth substrate to oxidize MTBE cometabolically. And also BTEX compounds could be the potential substrate of the MTBE cometabolism. Cell density also affected on the MTBE degradation and transformation capacity(Tc). Increasing cell density caused increasing MTBE degradation but decreased transformation capacity. Other result demonstrated that MTBE and other gasoline oxygenates, ETBE and TAME, were degraded by butane-grown microorganism.
In order to determine the major biochemical degradation factors of the two organophosphorus insecticides, diazinon and dursban, the activities of monooxygenase(m. o.) and ${\alpha}$, ${\beta}-esterase$ were studied in submerged soil under laboratory conditions at $30{\pm}1^{\circ}C$ The degradation rate of diazinon by microorganism showed 1.5 times higher than dursban. The m. o. activity increased from 12hrs and 3days after application of diazinon and dursban, respectively. But the ${\beta}-esterase$ activity showed maximum at one day after application of dursban and $5{\sim}8$ days after diazinon application. Also, the ${\beta}-esterase$ activity was about 10 times higher than ${\alpha}-esterase$. Hence, it was concluded that the biological degradation of diazinon was mainly attributed to m. o. activity and the degradation of dursban to ${\beta}-esterase$ activity.
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2004.04a
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pp.147-152
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2004
Aerobic cometabolism of cis-1,2-dichloroethylene (c-DCE) and c-DCE epoxide by a butane-grown mixed culture was evaluated. Transformation of c-DCE resulted in the concomitant generation of c-DCE epoxide. Chloride release studies showed nearly complete oxidative dechlorination of c-DCE (approximately 75%). Mass spectrometry confirmed tile presence of a compound with mass-to-charge-fragment ratios of 112, 83, 48, and 35. The values are in agreement with the spectra of a chemically synthesized c-DCE epoxide. Some evidences indicating the involvement of the monooxygenase in the transformation of c-DCE epoxide are: 1) $O_2$ requirement for c-DCE transformation and butane degradation; 2) butane inhibition on c-DCE transformation and vice versa; 3) the inactivation of c-DCE and c-DCE epoxide transformations by acetylene (a known monooxygenase inactivator); and 4) tire inhibition of c-DCE epoxide transformation by c-DCE.
Spatial and temporal changes in nitrification activities and distribution of microbial population of ammonia oxidizing bacteria (AOB) and ammonia oxidizing archaea (AOA) in paddy soils were investigated. Soil samples were collected in March and October 2015 from rice paddy with and without the presence of confined animal feeding operations. Incubation experiments and quantitative polymerase chain reaction showed that AOA's contribution to nitrification kinetics was much higher in locations where organic nitrogen in animal waste is expected to significantly contribute to overall nitrogen budget, and temporal variations in nitrification kinetics were much smaller for AOA than AOB. These differences were interpreted to indicate that different microbial responses of two microbial populations to the types and concentrations of nitrogen substrates were the main determining factors of nitrification processes in the paddy soils. The copy numbers of ammonium monooxygenase gene showed that AOA colonized the paddy soils in higher numbers than AOB with stable distribution while AOB showed variation especially in March. Although small in numbers, AOB population turned out to exert more influence on nitrification potential than AOA, which was attributed to higher fluctuation in AOB cell numbers and nitrification reaction rate per cells.
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2004.04a
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pp.388-391
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2004
A sol-gel fiber-optic biosensor with encapsulated pH-sensitive fluorophore and immobilized genetically modified toluene-o-xylene monooxygenase was developed to detect TCE and PCE, which are carcinogenic chlorinate organic compounds prevailing in ground water. The sensitivity was characterized for the composition of sol-gel, and manufacturing procedure. The intensity curve reveals a linear range of intensity for pollutant concentration range of 0.01ppm and 1ppm. The change in intensity was appeared to be larger at each of L for same condition, and, therefore, the wavelength of λ was chosen for the analytical measurement.
Kim Jin-Uk;Ha Cheol-Yun;Kim Nam-Hui;Hong Gwang-Pyo;Gwon Su-Yeol;An Yeong-Ho;Ha Jun-Su;Park Hu-Won;Kim Yeong
Proceedings of the Korean Society of Soil and Groundwater Environment Conference
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2005.04a
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pp.127-130
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2005
The feasibility of stimulating in situ aerobic cometabolic activity of indigenous microorganisms was investigated in a trichloroethene(TCE)-contaminated aquifer, A series of single-well natural drift tests (SWNDT) was conducted by injecting site groundwater amended with a bromide tracer and combinations of toluene, oxygen, nitrate, ethylene and TCE into an existing monitoring well and by sampling the same well over time. Transformation of ethylene, a surrogate of overall TCE transformation activity, was also observed, and its transformation results in the production of ethylene oxide, suggesting that some tolune-oxidizing microorganisms stimulated may express a monooxygenase enzymes. Also in situ transformation of TCE was confirmed by dilution-adjusted data analysis developed in this study. These results indicate that, in this environment, toluene and oxygen additions stimulated the growth and aerobic cometabolic activity of indigenous microorganisms expressing monooxygenase enzymes and that these are responsible for observed toluene utilization and cometabolism of ethylene and TCE. The simple, low-cost field test method provides an effective method for conducting rapid field assessments and pilot testing of aerobic cometabolism of TCE, which has previously hindered application of this technology to groundwater remediation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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