일련의 회분식 실험 및 실험실 규모의 연속식 실험을 통하여 유기오염물질에 의해 오염된 토양에 in-situ 토양세척기법을 적용하는데 필요한 운전조건을 도출하였다. 실제 토양에 소수성 유기오염물질인 n-dodecane, naphthalene, anthracene을 일정량 오염시킨 후 Tween 80, Triton X-100, Sodium dodecyl sulfate(SDS)가 포함된 용액을 이용하여 세척능력을 비교하였다. 회분식 및 연속식 실험 결과, Tween 80와 Triton X-100가 n-dodecane의 제거에 효과가 우수하였으며, naphthalene과 anthracene의 제거에는 SDS와 Tween 80가 우수하였다. 연속식 실험이 끝난 후, 토양에 잔류하는 세척제의 양은 Tween 80이 제일 적었다. 연속식 실험에서 통과유속을 변화시킨 결과, 7 ml/min에서는 세척에 필요한 접촉시간의 감소로 인하여 세척효과가 3 또는 5ml/min보다 오히려 감소되었다. 본 실험의 적용 범위 내에서는 토양의 초기 pH는 세척이 진행됨에 따라 세척능력에 큰 영향을 미치지 않았다. 세척제의 미생물에 대한 독성실험 결과 Tween 80이 그람 음성균과 양성균의 성장에 가장 영향을 미치지 않는 것으로 판명됐다.
Bacteria have been regarded as a one of major etiologic factors in root canal infections. In endodontic treatment the effective removal of pathogenic microorganisms in the root canal is the key to successful outcome. Bacterial cell wall components may play an important role in the development of pulpal and periapical disease. The purpose of this study was to evaluate the effect of sonic extracts of Streptococcus spp. on cultured L929 cells and to characterize cell wall protein profiles of Streptococcus spp. Streptococcus spp. were isolated from infected root canals and identified with Vitek Systems(Biomeriux, USA). Five streptococci, namely S. sanguis, S. mitis, S uberis, S. mutans (ATCC 10449) and S. faecalis (ATCC 19433) weere enriched in brain heart infusion broth. Cell pellets were sonicated and cell wall extracts were dialyzed and membrane filtered. Prepared cell wall proteins were applied to cultured L929 cell. The cell reaction were evaluated by monitoring DNA synthesis, cell numbers and the change of cell morphology. The total cell wall protein profiles of microorganisms were characterized by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide-gel eledruphoresis(SDS-PAGE). DNA synthesis of L929 cells were reduced by the increasing concentration of sonic extracts. DNA synthesis was significantly suppressed in more than $50{\mu}g$/ml of sonic extract conentration in five streptococci. S. nutans (ATCC 10449) showed stronger suppression on DNA synthesis than remaining four streptococci, which had the similar effect on DNA synthesis. Analysis of DNA synthesis measured by [$^3H$]-thymidine uptake was more sensitvie method than cell counting. Sonic extracts affected the microscopic findings of L929 cells. The protein profiles indicated that all five strains shared two major proteins with molecular masses of 70.8 and 57.5 kD respectively. S. uberis and S. mutans shared common minor proteins of which molecular weights were 147.9 and 112.2 kD respectively. However some minor proteins were unique for S. mitis, S. uberis and S. faecalis.
Louvado, Antonio;Coelho, Francisco J.R.C.;Domingues, Patricia;Santos, Ana L.;Gomes, Newton C.M.;Almeida, Adelaide;Cunha, Angela
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권3호
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pp.283-291
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2012
Bioremediation efforts often rely on the application of surfactants to enhance hydrocarbon bioavailability. However, synthetic surfactants can sometimes be toxic to degrading microorganisms, thus reducing the clearance rate of the pollutant. Therefore, surfactant-resistant bacteria can be an important tool for bioremediation efforts of hydrophobic pollutants, circumventing the toxicity of synthetic surfactants that often delay microbial bioremediation of these contaminants. In this study, we screened a natural surfactant-rich compartment, the estuarine surface microlayer (SML), for cultivable surfactant-resistant bacteria using selective cultures of sodium dodecyl sulfate (SDS) and cetyl trimethylammonium bromide (CTAB). Resistance to surfactants was evaluated by colony counts in solid media amended with critical micelle concentrations (CMC) of either surfactants, in comparison with non-amended controls. Selective cultures for surfactant-resistant bacteria were prepared in mineral medium also containing CMC concentrations of either CTAB or SDS. The surfactantresistant isolates obtained were tested by PCR for the Pseudomonas genus marker gacA gene and for the naphthalene-dioxygenase-encoding gene ndo. Isolates were also screened for biosurfactant production by the atomized oil assay. A high proportion of culturable bacterioneuston was tolerant to CMC concentrations of SDS or CTAB. The gacA-targeted PCR revealed that 64% of the isolates were Pseudomonads. Biosurfactant production in solid medium was detected in 9.4% of tested isolates, all affiliated with genus Pseudomonas. This study shows that the SML is a potential source of surfactant-resistant and biosurfactant-producing bacteria in which Pseudomonads emerge as a relevant group.
귀금속-티아크라운에테르 착물들의 역상 이온쌍 고성능 액체크로마토그래피(RPIP-HPLC)용리 거동에서 이온쌍 시약의 농도와 리간드 종류 효과를 연구하였다. 귀금속 이온 분석의 선택성은 사용한 티아크라운에테르의 고리를 구성하는 원자들의 수가 작을수록 좋았고, 귀금속-티아크라운에테르 착물의 용리 메카니즘은 이동상 중 이온쌍 시약인 도데실술폰산나트륨염(SDS)의 농도가 10 mM 이하일 경우 이온쌍 형성 메카니즘으로, 10 mM 이상일 경우 미쎌 형성 메카니즘으로 설명되었다. 결론적으로 몇 가지 귀금속-티아크라운에테르 착물들을 최적 조건에서 성공적으로 분리하였고, 흑백사진 정착액 중 Ag(Ⅰ) 이온 분리와 정량에 유용함을 증명하였다.
This study was conducted to identify the effects of caffeine or combinations of caffeine and iron or vitamin E on the lipid and protein components in the MDBK(Mardin-Darby Bovine Kidney) cells. For the In vitro test, MDBK cells in ${\alpha}$-MEM(Minimum Essential Medium) were divided into 4 treatment groups according to drug types and dosages as follows; the control(group A), group B was treated with 0.3mM caffeine, group C was treated with 0.3mM caffeine and 0.3mM ferric chloride, group D was treated with 0.3mM caffeine and 0.3mM vitamin E. Those groups were further divided into 5 subgroups according to the time lapsed(control, 4hrs, 8hrs, 24hrs and 48hrs lapsed group). The concentrations of the carbonyl group and malondialdehyde(MDA) and the patterns of the SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis) and fatty acid compositions were analyzed to determine the oxidative damages and metabolic changes on the lipid and protein components in the MDBK cells. The results obtained from this study were summarized as follows; 1. The concentrations of carbonyl group and malondialdehyde in MDBK cells of group C were significantly higher(p<0.01) in comparison to the control, and increased according to the time lapsed. But the results of groups B and D were little different in comparison to the group C. 2. As the analytical results of fatty acid compositions in MDBK cells, the proportions of palmitoleic acid and linoleic acid in groups B, C and D were lower in comparison to the control, while the proportion of arachidonic acid in groups B, C and D were significantly higher(p<0.01) in comparison to the control. 3. In order to determine the oxidative damages to the protein in MDBK cells, the patterns of the SDS-PAGE were examined and the patterns of SDS-PAGE in groups C and D were significantly different between 43kd and 200kd of molecular weight.
본 연구에서는 공업용수 중에 미량 함유될 수 있는 철 이온을 제거하기 위해 음이온 계면활성제 SDS를 주입하여 미셀을 형성한 후, 미셀과 철 이온이 결합된 응집체를 관형 세라믹 정밀여과막으로 배제하였다. 철 모사용액을 대상으로 SDS 농도가 철과 SDS 제거율에 미치는 영향을 알아본 결과, 철의 제거율은 SDS의 임계미셀농도(CMC)인 8.00 mM에서 가장 높은 92.26%를 나타내었고, SDS 제거율은 칼슘 이온 제거 결과보다 다소 높은 61.10%를 보였다. SDS의 농도가 증가함에 따라 최종 막오염에 의한 저항 $R_f$가 증가하여 4 mM일 때 가장 높은 값을 보이다가 10 mM에서 가장 낮은 값을 나타내었다. SDS 10 mM인 조건에서 최종 투과선속 $J_{180}$가 가장 큰 값을 나타냈었고, 결국 가장 높은 총여과부피를 얻을 수 있었다. CMC 8 mM의 경우 운전시간 80분까지는 10 mM과 동일하게 낮은 $R_f$ 값을 보이다가, 120분까지 급격하게 증가하다가 다시 180분까지 서서히 증가하는 경향을 보였다.
The objects of the present study were to establish the method of purification, subunit dissociation of verotoxin-2 (VT2) produced by Escherichia coli O157:H7, and to investigate the characteristics of purified verotoxin-2 such as molecular weight and composition of amino acid. The results were summerized as follows; Verotoxin-2 was extracted by addition of polymyxin B sulfate into bacterial cell lysate prepared from Escherichia coli O157:H7(KSC109). As an initial step, the bacterial cell lysate was precipitated with 30% saturated ammonium sulfate. The precipitated crude toxin was then subjected to anion-exchange, chromatofocusing and cation-exchange chromatography. Using this scheme, we obtained highly purified toxin with a specific activity of $1.1{\times}10^9$$CD_{50}/mg$. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis(SDS-PAGE) for purified VT2 showed two protein bands. The upper band, approximately 32 Kd, was supposed as A subunit and the lower band, approximately 7.7 Kd, was supposed as B subunit. When the toxin was separated in the subunit-dissociating solution, two peaks emerged with retention times of 15 and 28 min by HPLC. These peaks represented A subunit and B subunit, respectively. The amino acid composition of purified VT2 were made up in order of glutamic acid, histamine, asparaginic acid, histidine, lysine, alanine and leucine etc. The largest amount among the amino acid composing VT2 was methionine.
Type II제한효소 Stu I을 순수정제하고 그 효소적 특성을 연구하였다. 100g(we weight)의 Streptomyces tubercidicus(ATCC 25502)로부터 얻은 crude extranct를 ammonium sulfate fractionation한 후, DEAE-Sephadex(A-50), QAE-Sephadex(A-50) 그리고 Heparin-agarose의 순서로 column chromatography를 수행하여 1,2mg의 비특이성 nuclease가 없는 Stu I 제한효소를 얻었다. 이 시료에 포함되어 있는 다른 오염 단백질은 Sephadex G-100 column으로 gel filtration 하여 제거함으로써, 순수한 Stu I 단백질을 얻을 수 있었다. 정제된 Stu I 제한효소는 10% SDS-polyacrylamide gel electrophoresis 결과 한 개의 band로 나타났으며, 그 분자량은 34,000 $\pm$ 1,000 dalton이었다. 이 효소는 $Mg^{2+}$이온 존재하에 중성의 pH(7.0-8.0)에서 최대의 활성을 나타내었다. NaCl은 이 효소의 활성에는 필요하지 않았다.
SWCNT는 매우 뛰어난 역학적 성능을 가지고 있고. 이로 인해 각종 첨단 소재의 보강재료로서 각광받고 있다. 그러나 완전한 형태의 SWCNT는 소수성을 가지고 있고. 서로간에 Van der Waals 인력으로 결합되어 물에 분산이 어렵다. 본 연구에서는 SWCNT를 시멘트 복합체에 활용하기 위하여, 분산된 용액 형태로 제조하여 시멘트 복합체에 활용하고자 하였고, 이를 위한 계면활성제로 DOC 및 SDS를 선정하였다. 초음파 처리 및 초원심분리를 통해 제조된 SWCNT 수용액을 이용하여 시멘트 페이스트를 제조하여 이의 전단응력 vs. 전단변형률 관계를 확인하고, 이를 통해 소성점도 및 항복응력을 도출하였다. 본 연구의 결과에 따르면 SWCNT를 혼입하지 않은 DOC 및 SDS는 공기연행제와 유사한 유변학적 효과를 발휘하는 것으로 나타났다. DOC 2wt%를 이용해서 제조된 SWCNT 수용액으로 배합된 시멘트 페이스트는 플레인 시멘트 페이스트와 거의 유사한 유변학적 거동을 하는 것으로 나타났으나, SDS 1%를 이용해서 제조된 SWCNT 수용액으로 배합된 시멘트 페이스트는 플레인 시멘트 페이스트와 상이한 유변학적 거동을 하는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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