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Generation and Characterization of a Neutralizing Human Monoclonal Antibody to Hepatitis B Virus PreS1 from a Phage-Displayed Human Synthetic Fab Library

  • Jo, Gyunghee;Jeong, Mun Sik;Wi, Jimin;Kim, Doo Hyun;Kim, Sangkyu;Kim, Dain;Yoon, Jun-Yeol;Chae, Heesu;Kim, Kyun-Hwan;Hong, Hyo Jeong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제28권8호
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    • pp.1376-1383
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    • 2018
  • The hepatitis B virus (HBV) envelope contains small (S), middle (M), and large (L) proteins. PreS1 of the L protein contains a receptor-binding motif crucial for HBV infection. This motif is highly conserved among 10 HBV genotypes (A-J), making it a potential target for the prevention of HBV infection. In this study, we successfully generated a neutralizing human monoclonal antibody (mAb), 1A8 (IgG1), that recognizes the receptor-binding motif of preS1 using a phage-displayed human synthetic Fab library. Analysis of the antigen-binding activity of 1A8 for different genotypes indicated that it can specifically bind to the preS1 of major HBV genotypes (A-D). Based on Bio-Layer interferometry, the affinity ($K_D$) of 1A8 for the preS1 of genotype C was 3.55 nM. 1A8 immunoprecipitated the hepatitis B virions of genotypes C and D. In an in vitro neutralization assay using HepG2 cells overexpressing the cellular receptor sodium taurocholate cotransporting polypeptide, 1A8 effectively neutralized HBV infection with genotype D. Taken together, the results suggest that 1A8 may neutralize the four HBV genotypes. Considering that genotypes A-D are most prevalent, 1A8 may be a neutralizing human mAb with promising potential in the prevention and treatment of HBV infection.

소독제 농도, pH, 온도, 암모니아 농도, 부유물질이 강우 월류수 염소 소독에 미치는 영향 (Effects of Disinfectant Concentration, pH, Temperature, Ammonia, and Suspended Solids on the Chlorine Disinfection of Combined Sewer Overflow)

  • 김상현
    • 대한환경공학회지
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    • 제36권10호
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    • pp.685-690
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    • 2014
  • 하수처리시설 초과유량에 대한 처리 규제 입법 예고로 인해 강우 월류수 처리에 대한 관심이 증가하고 있다. 본 연구에서는 강우 월류수 염소(차아염소산나트륨) 소독 시 소독제 농도(0.11-4.0 mg $Cl_2/L$), pH (6.5-8.0), 온도($15-25^{\circ}C$), 암모니아 농도(10-41 mg N/L), 부유물질(91-271 mg SS/L)이 대장균군수 감소 속도에 미치는 영향을 고찰하였다. 차아염소산나트륨 농도 효과는 반속도 상수가 1.212mg $Cl_2/L$인 saturation-type model로 잘 모사되었다. 소독 반응 속도는 SS와 pH 증가에 따라 감소되는 반면, 온도에 따라서는 증가하였고, 암모니아 농도에는 영향을 받지 않았다. 월류수 유입 조건을 $1{\times}10^5MPN/mL$, 271 mg SS/L, $15^{\circ}C$, pH 8.0로 가정할 때, 염소 주입 농도 1 mg/L, 수리학적 체류시간 1.25 분인 염소 소독조를 통해 입법예고 된 수질 기준의 1/3 수준인 대장균군수 1,000개/mL를 달성할 수 있을 것으로 계산되어, 염소 소독이 강우 월류수 소독에 유효하게 사용될 수 있을 것으로 판단된다.

Calcium Alginate의 킬레이트 결합을 이용한 수중의 질산성 질소 제거에 관한 연구 (A Study on the Nitrate Removal in Water by Chelating Bond of Calcium Alginate)

  • 김태경;송주영;김종화
    • 한국응용과학기술학회지
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    • 제33권4호
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    • pp.795-801
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    • 2016
  • 본 연구는 응집제로 calcium alginate를 이용한 질산성 질소 처리에 관한 연구이다. 질산성 질소를 제거하기 위한 방법으로는 역삼투법, 이온교환수지법, 전기투석법, 생물학적 방법 등이 있지만 본 연구에서는 응집 침전시키는 방법으로서 질산성 질소를 처리하고자 하였다. 응집제로 이용한 calcium alginate가 킬레이트 결합을 형성하여 질산성 질소를 응집 침전시킬 것으로 예상하고, 응집제의 성분, 응집 반응시간, 응집제의 몰비, 응집제의 주입율에 따라 질산성 질소가 제거되는 경향을 보았다. 또한 FE-SEM과 EDS(Energy Dispersive X-Ray Spectrometer)를 통하여 응집반응 후 침전물의 구조 및 구성성분비를 분석함으로써 질산성 질소가 Calcium-nitro-alginate 형태로 제거되는지를 확인하였다. 그 결과 반응시간은 60분, 응집제의 몰비는 1:1일 때, 응집제의 주입율은 합성폐수의 2 %일 때 질산성 질소의 제거율이 최대 56.7 %로 나타났다.

혈합육어의 조직중에 분포하는 단백질분해효소 2. 고등어와 정어리 장기조직에서 추출한 단백질분해효소의 활성비교 (Proteolytic Enzymes Distributed in the Tissues of Dark Fleshed Fish 2. Comparison of the Proteolytic Activity of the Tissue Extract from the Internal Organs of Mackerel and Sardine)

  • 김형낙;변재형;조진건
    • 한국수산과학회지
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    • 제19권6호
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    • pp.521-528
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    • 1986
  • 고등어와 정어리의 각 장기조직에 분포하는 단백질분해효소의 최적활성조건을 분석${\cdot}$비교하고, 열안정성과 저온저장중의 활성의 변화 등을 검토한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 고등어와 정어리의 각 장기에서 단백질분해효소를 추출하여 pH에 따른 단백질분해능을 분석한 결과, 소화관, 췌장, 유문수 및 비장은 알칼리성에서, 위는 산성에서, 그리고 간은 산성, 중성 및 알칼리성의 세 영역에서 각각 단백질분해능이 있음을 알았다. 그리고, 소화기관인 위, 췌장, 및 유문수에서 추출한 조효소는 활성이 높았으나, 간 및 비장에서 추출한 조효소는 활성이 아주 낮았다. 2. 각 장기에서 추출한 단백질분해효소의 열안정성을 분석한 결과, 두 어종의 위와 유문수 및 정어리의 췌장에서 추출한 효소의 내열성이 가장 약했으며, 비장과 간에서 추출한 중성단백질분해효소는 내열성이 강한 것으로 판단되었다. 3. 각 장기에서 추출한 조효소의 저장성을 검토한 결과. $5^{\circ}C$ 저장시 두 어종의 유문수와 고등어의 췌장${\cdot}$위 및 비장에서 추출한 효소는 안정성이 높았으며, 그 이외의 조직에서 추出한 효소는 저장 28일까지 많은 실활이 일어났다. 또한 방부제 sodium azide에 의한 영향은 어종과 조직에 따라 미미한 차이를 보였으며, $-15^{\circ}C$에서 저장한 경우가 $5^{\circ}C$에 저장한 경우보다 효소의 실활이 더욱 컸다.

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낙동강 물금취수장 상수도 원수의 무기보존성분량의 연간변동에 대하여(1979년 1월-1980년 4월) (SEASONAL VARIATIONS OF THE CONTENTS OF INORGANIC CONSERVATIVE CONSTITUENTS OF NAGDONG RIVER WATER AT MULGEUM INTAKE STATION OF BUSAN CITY WATER FROM JANUARY 1979 TO APRIL 1980)

  • 이배정;원종훈
    • 한국수산과학회지
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    • 제13권3호
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    • pp.103-108
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    • 1980
  • 1) 1979년 1월에서 1980년 4월사이 매월 대조때 3일간, 소조때 2일간(1979년 1, 2, 3월 및 1980년 1, 2, 3월은 격일) 낙동강 물금 부산시 상수도 취수장원수의 전기전도도, 염화이온, 황산이온, 칼슘, 마그네슘, 나트륨, 칼륨의 량을 매시간 측정하였다. 2) 각성분량의 1979년 1월에서 1980년 4월까지의 변동범위 및 평균치는 다음과 같다. 전기전도도 $99\~912\mu\mho/cm,\;200\mu\mho/cm$ 염화이온 $6.0\~256ppm$, 17.2ppm, 황산이온 $4.1\~37.9ppm$, 23.5ppm, 칼슘 $4.2\~28ppm$, 18ppm, 마그네슘 $2.2\~23ppm$, 5.6ppm, 나트륨 $5.0\~126ppm$, 14ppm, 칼륨 $1.2\~10.8ppm$, 2.6ppm. 3) 조사기간중 염화이온농도이 상수도 수질기준치인 150ppm을 넘는 경우는 1980년 2월 13일 12, 13, 14시와 2월 28일 13시의 4번이 있었다. 4) 매월 대조일과 대조때가 소조때 보다 높으나 그 차는 별로 크지 않다. 5) 계절별 각성분량의 변동을 대체로 동계가 하계보다 높으나 그 차는 별로 크지 않고 거의 일정하다. 6) 염화이온량의 매월 시간적변동은 뚜렷하지 않다. 대체로 최고만조시각과 최고염화이온농도 시간과의 차는 약 4시간의 시차가 있다. 본 연구는 문교부 학술연구조성비의 보조로 했습니다. 감사드리는 동시에 실험을 도와준 연구실의 여러분에게도 감사드립니다.

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치과치료용 약물이 치수신경의 반응에 미치는 영향 (EFFECTS OF DENTAL THERAPEUTIC AGENTS ON THE RESPONSE OF THE PULP NERVE)

  • 권오양;윤수한;이종흔
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제15권1호
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    • pp.1-15
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    • 1990
  • The aim of this study was to investigate the effect of dental therapeutic agent on conduction velocity and threshold current of intradental A- and C-fibers in the cat. Inferior alveolar nerve of cat anesthetized with sodium pentobarbital was exposed and dissected until response of functional single pulp nerve until could be evoked by monopolar electrical stimulation of the crown of the lower left canine teeth. 10ms rectangular pulse was used to determine the threshold current and 1ms rectangular pulse was used to determine conduction velocity. After application of calcium chloride (1, 2, 6M), calcium hydroxide mixed with saline, potassium chloride (0.2, 0.8, 1.6M), eugenol, zinc oxide eugenol to the cavity on the labial surface, conduction velocity and threshold current of single pulp nerve unit were compared with the control. In 10 cats, 24 $A{\delta}$- and 11 C- pulp nerve units were recorded. The mean conduction velocities of $A{\delta}$- and C-fibers were 7.5m/sec (SD=5.8) and 1.2m/sec (SD=0.4), respectively. The mean threshold current was $12.3{\mu}A$ (SD=5.3) for $A{\delta}$-fibers and $24.9{\mu}A$ (SD=8.1) for C-fibers. 1, 2, 6M calcium chloride caused decrease of conduction velocity and remarkable increase of threshold current in $A{\delta}$- and C-fibers. The effect of calcium hydroxide mixed with saline was similar but smaller than calcium chloride solution. 0.2M potassium chloride had insignificant effect. In 0.8M potassium chloride, the threshold current was increased although conduction velocity was not affected. In 1.6M potassium chloride, the threshold current was increased and the conduction velocity was slowed down. Spontaneous activity was recorded frequently for first 5 min but gradually reduced both in $A{\delta}$- and C-fibers. Eugenol had irreversible effect on pulp nerve in that initially there were not certain changes in the conduction velocity and threshold current of $A{\delta}$- and C-fibers, but the responses to electrical stimulation were abruptly disappeared after sustained application and were not recovered. Contrary to eugenol, zinc oxide eugenol did not caused significant increase of the threhold current and caused time dependent decrease of the conduction velocity, and did not show any irreversible change.

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치근단육아종(齒根端肉芽腫)과 치근단양종(齒根端襄腫)의 전자현미경적(電子顯微鏡的) 연구(硏究) (AN ELECTRON MICROSCOPIC STUDY OF THE PERIAPICAL GRANULOMA AND THE PERIAPICAL CYST)

  • 여인호;임성삼
    • Restorative Dentistry and Endodontics
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    • 제13권2호
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    • pp.283-294
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    • 1988
  • The purpose of this study was to investigate the characteristic features of the cells and tissues of the chronic periapical lesions using light microscope and electron microscope. Fifteen dental periapical lesions were obtained from the patients undergoing periapical surgery. Each specimen was divided into two parts along the tooth axis. One part was routinely processed for histopathologic examinations. 12 periapical lesions were diagnosed as granuloma and 3 periapical specimens as periapical cyst. The other part was fixed in 2.5% glutaraldehyde in 0.1M sodium cacodylate buffer at pH 7.4 and 1% osmic acid in same buffer. They were embedded in Epon 812. The semithin sections were used for the orientation of the lesions and the ultrathin sections were stained conventionally and examined with AEI Corynth 500 electron microscope. The results were as follows. 1. PMN and macrophages, which were dominant cell type, were scattered in small or large numbers throughout the central destructive area of granuloma. In the granulomatous area, plasma cells and lymphoytes were found in significant number and a lot of new capillary formation were revealed. Clefts caused by cholesterol were often seen in the connective tissue. Occasionally foam cells became collected in groups and epithelial proliferation were present. 2. In both granuloma and cyst, some plasma cells contained narrow cisternae of granular endoplasmic reticulum of which was tightly packed with electron dense materials, and other cells exhibited dilated profiles of granular endoplasmic reticulum. 3. In the area where plasma cells and lymphocytes were collected in groups, lymphocytes with well developed nucleolus and profuse cytoplasm were found and differentiating plasma cells were also present. 4. In the epithelial strands of the granulomatous area, epithelial cells contained enlarged endoplasmic reticulum, tonofilaments and ribosoms. Toward the intercellular space epithelial cells protruded a few microvilli. In the intercellular space, exudate-like electron dense materials, most of which was attached to the plasma membrane, appeared. 5. Some foam cells filled with numerous lipid droplets and others had lipid droplets and crystal-like structures. 6. Cyst epithelium consisted of bright cells and dark cells. The former had bright cytoplasm and small amounts of ribosoms, and the latter dark cytoplasm, many ribosoms, mitochondria and elongated microvilli. 7. Epithelial cells near the cyst lumen protruded a lot of long microvilli toward intercellular space and cyst lumen.

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니켈도금액중의 붕산 신속정량법 (Rapid Analysis of Boric Acid in Nickel Plating Solutions)

  • 염희택
    • 한국표면공학회지
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    • 제3권1호
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    • pp.7-12
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    • 1970
  • Only mannitol or glycerine is generally used for the determination of boric acid in a nickel plating solution in order to make its acidic property so strong that it can be titrated with NaOH. However, these solutions give very amgiguous color change of indicator due to the precipitation of nickel salts . Therefore, only experienced dchemistsorwell trained workimen can accurately confirm the actual end point of the titratiion. For eliminating such interference of nickel salts and easily confirming the end point by any persons , the author attempted to find out a solution which produces no precipitates during the titration in these experiments, and also he tried to funish the reason for ambiguousness in titration. The following results were obtained after many experiments. (1) In any titrations which produce nickel salts such nI(oh)$_2$, the salt is formed umption very approximate to the end point, which shows some error by the consumption of titrant(NaOH) . Then, the pink color of phenolphthalein is absorbed by Ni(OH)$_2$ and the pH jumping at the end pint is also diminished to as little as less than 15% of the total phenophthalein ph range. (2) Known methods by complex salts of citrate,w hich do not produce precipitates of Ni(OH)$_2$, are also not very satisfactory, because, the pH jumping at the end point is only about 35% and the color change of phenolphthalein is form blue-green to purple-blue. (3) New method by complex salts of oxalate were attempted in these experiments. They also did not produce precipitates of Ni(OH)$_2$ and were very satisfactory in color change at the end of point was about 65% and the color change was from blue-green to purpled. In this methods, analytica cost was minimized by the use of less amounts of cheaper chemicals than the conventional citrates complex methods. The mixture of chemicals used was composed methods. The mixture of chemical used was composed of 37g/ι of sodium oxalate(Na$_2$C$_2$O$_4$$.$5H$_2$O), 2g/ι of phenolphthalein, and 400ml /ι of glycerin. The accuracy of analysis was within the error of 0.5%. (4) The procedure of analysis was as follows. One ml of nickel plating solution was taken out and to it were added 20ml of water and 20 ml of the above mixture for the indicator. The solution was titrated with 0.1N NaOH. The quantity of boric acid was calculated by the following equation. Boric acid (g/ι) = 6.184${\times}$F${\times}$ml .

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도토리 가루의 성분분석과 항산화능 평가 (Studies for Component Analysis and Antioxidative Evaluation in Acorn Powders)

  • 심태흠;김영선;사재훈;신인철;허성일;왕명현
    • 한국식품과학회지
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    • 제36권5호
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    • pp.800-803
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    • 2004
  • 도토리 가루를 이용하여 기능성 식품개발을 목적으로 도토리 가루의 화학성분, 항산화 활성을 조사하였다. 일반성분은 탄수화물이 87.29%, 수분 10.57%, 조지방 1.18%, 조단백 0.84%, 회분 0.12% 순으로 나타났다. 도토리 가루에 가장 많은 무기성분으로는 K이 40.68mg/100g으로 나타났으며, 그 외 P(8.95mg/100g), Ca(8.64mg/100g), Mg(4.67mg/100g), Na(3.94mg/100g), Fe(1.41mg/100g) 순으로 나타났다. 구성당은 총 7종이 분리 동정되었으며, 그 중 glucose가 대부분으로 나타났고 rhamnose, galactose, arabinose, mannose, fucose, xylose 순으로 함유되어 있었다. 주요 지방산 조성은 oleic acid(C18:1)가 31.87%로 가장 높았고, linoleic acid(C18:2)는 18.72%, linolenic acid(C18:3)는 16.67% 그리고 palmitic acid(C16:0)가 11.32% 순으로 나타났다. 항산화 효과는 물 추출물에서 $IC_{50}$$19.0{\mu}g/mL$로 가장 높게 측정되었고 75% 에탄올 추출물$(IC_{50}:\;21.4{\mu}g/mL)$ 및 메탄올 추출물$(IC_{50}:\;45.2{\mu}g/mL)$순으로 항산화 효과가 측정되었다.

시금장 발효기간에 따른 품질 변화 (Changes in Quality Attributes of Sigumjang with Fermentation)

  • 최응규;권오준;손동화;차원섭;조영제;이석일;양성호;정영건
    • 한국식품과학회지
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    • 제33권1호
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    • pp.107-112
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    • 2001
  • 시금장의 발효기간별 각종 성분 변화를 조사하였다. 세균은 발효시간이 지남에 따라 조금씩 증가하였으며 효모와 곰팡이는 발효 3일째까지는 그 수가 점점 증가하다가 4일째 부터는 큰 변화가 없었다. 젖산균은 발효가 진행됨에 따라 급격히 증가하였다. 유리당은 5종류가 검출되었다. 휘발성 유기산은 acetic acid, propionic acid 및 butyric acid 등 3종이 검출되었다. 비휘발성 유기산은 oxalic acid와 citric acid가 가장 많았다. 총 유리아미노산의 함량은 $1,407.9{\sim}3,053.9\;mg%$였으며, glutamic acid>phenylalanine)arginine>valine순으로 많았다. 총 필수아미노산의 함량은 총 아미노산에 대해 $34.4{\sim}37.0\;mg%$였다. 총 무기질 함량은 $12,966.7{\sim}13,864.5\;mg%$였으며, 첨가된 Na를 제외하면 K>P>Mg>Ca>Fe>Zn>Mn>Cu의 순으로 많았다. Ca과 P의 비는 0.1이었다. 시금장의 주요 구성 지방산은 18:2, 16:0, 18:1이 전체의 약 92.2%를 차지하고 있었으며, 총 불포화 지방산은 $76.3{\pm}1.1%$였다. 관능검사결과 $20^{\circ}C$에서 3일째부터 5일째 사이에 가장 높았다.

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