Sanguinarine은 천연 항균성 물질로 의약품, 생활용품 그리고 화장품 등 그 이용은 다양하나 가격이 비싸고 수율이 따르지 못하는 점을 식물세포배양을 통하여 해결할 수 있을 것으로 기대된다. Sanguinarine의 생산을 극대화하기 위하여 전통적인 방법인 환경적 요인을 고려한 cell selection방법과 유전적 접근인 protein의 변화를 동시에 관찰하였다. Yeast extract를 elicitor로 이용하였을 경우에 control에서는 관찰 할 수 없었던 sanguinarine에 해당하는 오렌지색의 형광을 볼 수 있었으며, 실제 metabolite의 분석에서도 sanguinarine의 증가를 확인 할 수 있었다. 세포 내부에서는 sanguinarine이 약 8배의 증가를 보였으며 배지에서는 약 5배의 증가를 보였다. Protein 역시 2-D electrophoresis로 확인한 결과 intensity가 $5\%,\;88\%,\;6.4\%$의 증가, 일정, 감소를 보인 spot들이 elicitor 처리 후 세포에서는 $34\%,\;39.4\%\;26.5\%$로 intensity가 증가된 spot들이 더많이 검출되었다. 본 연구에서는 sanguinarine을 yeast extract를 이용해서 생산량을 증가시키고 sanguinarine의 생산과 관련된 protein의 변화에 대해서 알아보고자 하였다. 본 예와 같은 실험 연구방법이 식물이차대사산물 생산성에 관련된 protein군을 규명하는데 초석이 될 수 있을 것으로 기대된다.
Purpose: Mucopolysaccharidosis type II (MPS II or Hunter syndrome) is a rare lysosomal storage disorder caused by iduronate-2-sulfatase (IDS) deficiency. MPS II causes a wide phenotypic spectrum of symptoms ranging from mild to severe. IDS activity, which is measured in leukocyte pellets or fibroblasts, was reported to be related to clinical phenotype by Sukegawa-Hayasaka et al. Measurement of residual plasma IDS activity using a fluorometric assay is simpler than conventional measurements using skin fibroblasts or peripheral blood mononuclear cells. This is the first study to describe the relationship between plasma IDS activity and clinical phenotype of MPS II. Methods: We hypothesized that residual plasma IDS activity is related to clinical phenotype. We classified 43 Hunter syndrome patients as having attenuated or severe disease types based on clinical characteristics, especially intellectual and cognitive status. There were 27 patients with the severe type and 16 with the attenuated type. Plasma IDS activity was measured by a fluorometric enzyme assay using 4-methylumbelliferyl- ${\alpha}$-iduronate 2-sulphate. Results: Plasma IDS activity in patients with the severe type was significantly lower than that in patients with the attenuated type ($p$=0.006). The optimal cut-off value of plasma IDS activity for distinguishing the severe type from the attenuated type was 0.63 $nmol{\cdot}4hr^{-1}{\cdot}mL^{-1}$. This value had 88.2% sensitivity, 65.4% specificity, and an area under receiver-operator characteristics (ROC) curve of 0.768 (ROC curve analysis; $p$=0.003). Conclusion: These results show that the mild phenotype may be related to residual lysosomal enzyme activity.
대기오염은 더 이상 무시할 수 없는 심각한 건강 위험요소 중 하나로 여겨지고 있다. 미세먼지는 각종 생화학적 오염물질, 유기 화합물, 무기 화합물 및 중금속 등의 유해성분을 포함한 대기오염의 주요 구성 미립자 성분이다. 최근 여러 연구에서 미세먼지가 암, 심혈관질환, 호흡기질환 및 피부질환 등을 이환율과 관련이 있다고 밝혀져 있다. 그러나 눈이 대기 오염에 직접 노출되는 기관 중 하나임에도 불구하고, 미세먼지에 의한 눈의 영향 평가는 소수에 그치고 있다. 본 총설에서는 역학 및 임상 결과, 생체 내 및 생체 외 실험 결과를 바탕으로, 미세먼지 노출과 안구표면질환, 망막질환 및 녹내장 등의 안구질환의 발달 사이의 연관성을 제시하였다. 또한 미세먼지 노출이 산화적 스트레스, 염증반응, 자가포식 등을 통해 안구 표면질환을 야기할 수 있다는 사실을 제시하였다. 그러나 현재까지 미세먼지에 대한 대부분의 안구 영향 평가가 안구 표면질환에 국한되어 이루어지고 있으며, 후안부의 병리학적 발생 기전은 아직 밝혀져 있지 않다. 따라서, 미세먼지 노출에 대한 안구 영향 평가는 안구 표면을 포함하여 후안부에 대한 지속적인 역학, 임상 및 기초 연구가 수반되어야 할 것으로 사료된다.
We employed human SK-MEL-28 cells as a model system to identify cellular proteins that accompany N-(4-methyl)phenyl-O-(4-methoxy)phenyl-thionocarbamate (MMTC)-induced apoptosis based on a proteomic approach. Cell viability tests revealed that SK-MEL-28 skin cancer cells underwent more cell death than normal HaCaT cells in a dose-dependent manner after treatment with MMTC. Two-dimensional electrophoresis in conjunction with matrixassisted laser desorption/ionization-time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry analysis or computer matching with a protein database further revealed that the MMTC-induced apoptosis is accompanied by increased levels of caspase-1, checkpoint suppressor-1, caspase-4, NF-kB inhibitor, AP-2, c-Jun-N-terminal kinase, melanoma inhibitor, granzyme K, G1/S specific cyclin D3, cystein rich protein, Ras-related protein Rab-37 or Ras-related protein Rab-13, and reduced levels of EMS (oncogene), ATP synthase, tyrosine-phosphatase, Cdc25c, 14-3-3 protein or specific structure of nuclear receptor. The migration suppressing effect of MMTC on SK-MEL-28 cell was tested. MMTC suppressed the metastasis of SK-MEL-8 cells. It was also identified that MMTC had little angiogenic effect because it did not suppress the proliferation of HUVEC cell line. These results suggest that MMTC is a novel chemotherapeutic and metastatic agents against the SK-MEL-28 human melanoma cell line.
공정오일 내 다핵성 방향족 화합물(PCA)은 무게함량 대비 3%이상 함유한 경우 피부암을 일으키는 것으로 알려졌다. 저함량과 고함량 PCA 오일의 구분 기준은 PCA 함량 3%에 근거한다. 기준 함량 이상이면 발암성 물질인 고함량 PCA 오일로 DAE가 있으며, 기준 함량 이하이면 인체에 안전한 저함량 PCA 오일로 TDAE, MES, 파라핀 오일이 이에 속한다. 상기 4종류의 공정오일을 적용한 SBR 가황물에 용매 추출 및 분리로 오일을 정제한 후, FT-IR분광 기술을 이용하여 PCA 오일 종류을 결정하였다. 그리고 파라핀 오일이 적용된 SBR 가황물에서 고무 약품인 HPPD, TMDQ, 왁스, 공정조제(Structol-40MS)의 오일에 대한 영향을 연구하였다. 분리 정제된 오일로부터 저함량과 고함량 PCA 오일 구분은 방향족 치환체 흡수영역인 파수 864, 810, 754 및 파라핀 또는 나프텐 흡수영역인 파수 721의 상대적인 흡수세기로 확인할 수 있었다.
Objectives: Parabens are widely used as antimicrobial agents in pharmaceuticals and cosmetics as well as by the food industry. Parabens have been reported to show weak estrogenic activity and be related to health effects such as allergic reactions and skin and breast cancer. We evaluated an online solid phase extraction (SPE) method coupled with LC-MS/MS technique using free and conjugated parent parabens in human urine for assessing human exposure to parabens. Methods: We employed LC/MS/MS through online solid phase extraction and column-switching techniques and analyzed free and conjugated parabens as biomarkers of human exposure. Four major parabens, methyl-paraben (MP), ethyl-paraben (EP), propyl-paraben (PP) and butyl-paraben (BP), were analyzed. Method validation was performed by sensitivity, accuracy, precision and comparison of the results of online SPE with offline SPE. Results: The limits of detection (LOD) were in the range of 0.2-2 ng/mL, and actual limits of quantification (LOQ) were in the range of 0.7-6 ng/mL urine, depending upon the compound. Accuracy was in the range of 98.3-106.4%, and precision was in the range of 1.3-8.7% (CV) depending upon the compound. We found a good correlation between the results of analysis by online SPE method and that by off-line SPE method. Conclusions: The online SPE method showed proper LOD and validated accuracy, precision and good correlation with the offline method for analyzing parabens in urine.
This study was performed to investigate the effects of dry powders, ethanol extracts and juices of radish and onion on lipid metabolism, lipid peroxidation and antioxidative enzyme activity in rats. Forty-nine male Sprague-Dawley rats weighing 157$\pm$6g were blocked into seven groups according to body weight and raised for four weeks with diets containing 5%(w/w) dry powders of two different vegetables consumed frequently by Korean-radish(Raphanus sativus L.) and onion(Allium cepa L.), ethanol extracts and juices from equal amount of each dry powder. All the powders, ethanol extracts and juices of radish and onion decreased total lipids, triglycerides and total cholesterol concentrations in plasma and liver. Above all, onion ethanol extract decreased them most remarkably. It was thought that organosulfur compounds and flavonoids extracted from onion by ethanol inhibited biosynthesis and absorption of lipid and promoted degradation of lipid. Radish powder also decreased them by increasing fecal excretions of total lipids, triglycerides and total cholesterol most effectively. Catalase and glutathine peroxidase(GSH-px) activities in red blood cell(RBC) were most remarkably increased by radish powder and onion powder respectively. Superoxide dismutase(SOD), catalase and GSH-px activities in liver were most remarkably increased by onion ethanol extract, radish powder and onion ethanol extract respectively. Xanthine oxidase(XOD) activities in liver were most effectively decreased by ethanol extracts of radish and onion. Thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) levels in plasma and liver of experimental groups were significantly lower than those of controls. Above all, onion powder decreased them most effectively. It was thought that vitamin E and high flavonoids in onion powder inhibited lipid peroxidation, promoting liver and RBC SOD, catalase and GSH-px activities and inhibiting XOD activities effectively. Flavonoids in onion ethanol extract inhibited lipid peroxidation, promoting three antioxident enzyme activities and inhibiting XOD activities most remarkably. Also flavonoids and high vitamin C in radish powder inhibited lipid peroxidation, promoting liver and RBC catalase most remarkably and inhibiting XOD activities. In conclusion, radish and onion were effective in lowering lipid levels and inhibiting of lipid peroxidation in animal tissue. From these data, radish and onion can be recommended in the treatment and prevention of diseases such as cardiovascular disease and cancer and in delaying aging. As ethanol from onion were most effective in lowering lipid level and promoting three antioxident enzymes, and inhibited lipid peroxidation as did we should try to utilize onion skin which is discarded though reported to have abundant flavonoids. (Korean J Nutrition 34(5) : 513~524, 2001)
Purpose: Malignant melanoma is recognized as the most serious skin cancer. We examined anatomical distribution and 5 - year survival rate of each stage of malignant melanoma on lower leg. Methods: We retrospectively analyzed the medical records of 91 patients(46 males and 45 females) with malignant melanoma on lower leg from 1985 to 2008. Age, sex, anatomical distribution and 5 - year survival rates of each stage of malignant melanoma on lower leg were investigated. Also, 5 - year survival rates of each stage and invasion depth of malignant melanoma on heel pad were investigated. Results: On lower leg, most frequently 32 cases(35.1%) occurred on heel pad, 27 cases(29.7%) occurred on dorsum of foot, 18 cases(19.8%) in toe and 14 cases(15.4%) on others in lower leg. We used the excision margin as 3 ~ 5 cm. After wide excision, in stage III, IV, the patients underwent the immunologic / chemo - therapy. The incidences of each stage were 22 cases(24.2%) in stage I, 47(51.6%) in II, 17(18.7%) in III and 5(5.5%) in IV. The 5 - year survival rates of each stage were 85%, 53.2%, 47.1% and 40%. On heel pad, the incidences of each stage were 5 cases(15.6%) in stage I, 19 cases(59.4%) in II, 7 cases(21.9%) in III and 1 case(3.1%) in IV. The 5 - year survival rates of each stage were 80%, 63.2%, 42.9% and 100%. On heel pad, incidence of local recurrence was 2 and 5 - year survival rate of this case was 100%. And systemic recurrence was 9 and 5 - year survival rate of this case was 55.6%. Conclusion: The 5 - year survival rate of malignant melanoma on heel pad was higher than previous study. To maintain the weight - bearing function of foot, we recommend the active reconstructive surgery for heel pad reconstruction after wide excision of heel pad malignant melanoma.
${\delta}$-Aminolevulinic acid (ALA)는 생물권내에 폭넓게 존재하는 화합물이고, 포유류에서 헴(heme)과 식물에서 엽록소 생성을 하게하는 경로에서 만들어진 테트라피롤의 중간물질로써 생체내 중요한 역할을 한다. ALA는 생분해성 매개자, 성장 조절자, 헴단백질의 전구체 그리고 암 치료에서 사용되는 효과적인 물질로써 관심이 있다. 최근에는 ALA가 피부 치료의 좋은 효과를 가지고 있어 피부과학에서 빈번히 사용된다고 보고되어 있는데, 하지만 지난 몇 십 년 동안, 많은 연구가 ALA 메커니즘의 설명과 치료적 활성 개선에 초점을 맞춰왔지만, 세포 기능과 세포생장에 대한 ALA의 효과는 아직 불분명하다. 본 연구에서는 ALA의 약물학적 효과가 HEK293T 뿐만 아니라, HaCaT와 HeLa 세포에서 세포분열을 억제하는 것으로 확인을 하였다. 또한, ALA가 처리된 세포에서는 세포예정사가 유도되는 것을 확인하였다. 이러한 결과들은 특정 세포에 ALA가 처리되면 세포증식을 억제하며, 특히 인간의 암세포의 죽임을 유발하는 효과적인 약물 중 하나로써 ALA를 개선된 치료 전략으로 가능성을 제시한다.
전기성문전도는 발성시에 성문의 진동이 전기적 임피던스를 이용하여 검출되는 신호이다. 본 연구는 이러한 전기성문전도를 기록하기 위한 장비를 구현하고 음성분석 및 후두질환 진단에 대한 적용생을 평가하고자 하였다. 전기성문전도의 하드웨어는 2 쌍의 링전극, 동조증폭기, 검파기, 저역통과필터, 자동이득조절부 등으로 구성되며, 2.7MHz의 반송파 신호를 이용하고 진폭 변조 방식의 검파를 통해 임피던스 신호를 추출하도록 하였다. 추출된 신호는 PC 사운드 카드의 라인 입력을 통해 샘플링되고 양자화되었다. 검출 신호를 분석하기 위한 파라미터는 패래 시간을(CQ), 개폐 속도율(SQ), 개폐속도지수(SI), 성대진동 주파수(F0), 성대진동 주파수변동지수(Jitter), 성대진동 진폭변동지수(Shimmer) 등을 추출하였다. 전기성문전도를 분석한 결과, F0가 증가할수록 CQ는 커지고, SQ와 SI는 작아지는 경향을 보였으며, 전기성문전도와 음성 선호의 기본주파수가 일치함을 알 수 있었다. CQ, SQ, SI는 정상인과 후두암 환자를 비교한 결과 유의한 차이를 보였다. 이러한 결과는 성대의 운동을 관찰할 수 있는 휴대용 전기성문전도 계측기의 구현이 가능하게 하였고, 성대 기능 이상 검사가 가능함을 시사하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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