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Effects of PEGylated scFv Antibodies against Plasmodium vivax Duffy Binding Protein on the Biological Activity and Stability In Vitro

  • Kim, So-Hee;Lee, Yong-Seok;Hwang, Seung-Young;Bae, Gun-Won;Nho, Kwang;Kang, Se-Won;Kwak, Yee-Gyung;Moon, Chi-Sook;Han, Yeon-Soo;Kim, Tae-Yun;Kho, Weon-Gyu
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제17권10호
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    • pp.1670-1674
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    • 2007
  • Duffy binding protein (DBP) plays a critical role in Plasmodium vivax invasion of human red blood cells. We previously reported a single-chain antibody fragment (scFv) that was specific to P. vivax DBP (PvDBP). However, the stabilization and the half-life of scFvs have not been studied. Here, we investigated the effect of PEGylated scFvs on their biological activity and stability in vitro. SDS-PAGE analysis showed that three clones (SFDBII-12, -58, and -92) were formed as monomers (about 70 kDa) with PEGylation. Clone SFDBII-58 gave the highest yield of PEGylated scFv. Binding analysis using BIAcore between DBP and scFv showed that both SFDBII-12 and -58 were decreased approximately by two folds at the level of binding affinity to DBP after PEGylation. However, the SFDBII-92 clone still showed a relatively high level of binding affinity ($K_D=1.02{\times}10^{-7}\;M$). Binding inhibition assay showed that PEGylated scFv was still able to competitively bind the PvDBP and playa critical role in inhibiting the interactions between PvDBP protein expressed on the surface of Cos-7 cells and Duffy receptor on the surface of erythrocytes. When both scFvs and their PEGylated counterparts were exposed to trypsin, scFv was completely degraded only after 24 h, whereas 35% of PEGylated scFvs remained intact, maintaining their stability against the proteolytic attack of trypsin until 72 h. Taken together, these results suggest that the PEGylated scFvs retain their stability against proteolytic enzymes in vivo, with no significant loss in their binding affinity to target antigen, DBP.

Novel Diagnostic Algorithm Using tuf Gene Amplification and Restriction Fragment Length Polymorphism is Promising Tool for Identification of Nontuberculous Mycobacteria

  • Shin, Ji-Hyun;Cho, Eun-Jin;Lee, Jung-Yeon;Yu, Jae-Yon;Kang, Yeon-Ho
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제19권3호
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    • pp.323-330
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    • 2009
  • Nontuberculous mycobacteria (NTM) are a major cause of opportunistic infections in immunocompromised patients, making the reliable and rapid identification of NTM to the species level very important for the treatment of such patients. Therefore, this study evaluated the usefulness of the novel target genes tuf and tmRNA for the identification of NTM to the species level, using a PCRrestriction fragment length polymorphism analysis (PRA). A total of 44 reference strains and 17 clinical isolates of the genus Mycobacterium were used. The 741 bp or 744 bp tuf genes were amplified, restricted with two restriction enzymes (HaeIII/MboI), and sequenced. The tuf gene-PRA patterns were compared with those for the tmRNA (AvaII), hsp65 (HaeIII/HphI), rpoB (MspI/HaeIII), and 16S rRNA (HaeIII) genes. For the reference strains, the tuf gene-PRA yielded 43 HaeIII patterns, of which 35 (81.4%) showed unique patterns on the species level, whereas the tmRNA, hsp65, rpoB, and 16S rRNA-PRAs only showed 10 (23.3%), 32 (74.4%), 19 (44.2%), and 3 (7%) unique patterns after single digestion, respectively. The tuf gene-PRA produced a clear distinction between closely related NTM species, such as M. abscessus (557-84-58) and M. chelonae (477-84-80-58), and M. kansasii (141-136-80-63-58-54-51) and M. gastri (141-136-117-80-58-51). No difference was observed between the tuf-PRA patterns for the reference strains and clinical isolates. Thus, a diagnostic algorithm using a tuf gene-targeting PRA is a promising tool with more advantages than the previously used hsp65, rpoB, and 16S rRNA genes for the identification of NTM to the species level.

예비타당성조사 적용 CVM의 분석체계와 개선과제 (Issues in Applying CV Methods to the Preliminary Feasibility Test)

  • 엄영숙;권오상;신영철
    • 자원ㆍ환경경제연구
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    • 제20권3호
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    • pp.595-628
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    • 2011
  • 본 연구는 한국개발연구원의 예비타당성조사에서 문화 과학 시설 등의 비정형 사업에 대한 편익 평가의 기법으로 활용도가 커지고 있는 CVM의 분석체계를 고찰하고 개선과제를 제시하였다. CVM의 설계에서 시장영역, 즉 목표모집단의 설정, 소득세라는 지불수단, 5년간 연단위로 한정하는 지불 방법, 저항응답의 사유 등에 대해서는 추가적인 논의가 필요하고, CVM의 설계에서 편의를 줄일 수 있는 전문가 검토, 표적집단조사, 사전조사, 본조사가 운영되도록 하여야 한다. 한편 CVM의 지불의사 유도 방법으로 활용되고 있는 단일 및 이중 양분선택형 질문방식에 의한 지불의사 유도 방법이 일반적이지만, 이 모형들과 관련된 쟁점에 대한 검토와 더불어 이외의 모형에 대해서도 검토하는 작업이 필요하다. WTP 함수 추정에 가정하고 있는 특정 분포 가정을 다양화하여 WTP의 변동성을 검토하고, 모수적 분포 이외에 비모수적 기법을 활용하여 WTP 함수를 추정하는 연구가 필요한 시점이다. 아울러 0의 지불의사 문제와 저항응답을 처리하기 위한 다양한 시도가 필요하며, 지불거부여부를 제시금액 이전에 제시하는 등의 질문 순서의 변화 등을 통한 지불거부자 파악 과정에서 발생하는 편의를 회피하는 노력 등도 검토되어야 한다.

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디지털 방송 서비스를 위한 MPEG-2 비디오 프로그램들의 결합 화질 제어 (Joint Quality Control of MPEG-2 Video Programs for Digital Broadcasting Services)

  • 홍성훈;김성대
    • 방송공학회논문지
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    • 제3권1호
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    • pp.69-84
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    • 1998
  • 현재 디지털 위성 TV, CATV, 디지털 지상 TV와 같은 디지털 방송 서비스에서는 MPEG-2로 압축된 다수의 비디오 프로그램들을 일정 비트율을 갖는 하나의 기존 방송 채널을 통하여 동시에 전송한다. 본 논문에서는 이러한 환경에서 각 프로그램을 VBR (Variable Bit Rate) 압축 부호화하는 부호화기들을 동시에 제어함으로써 프로그램들간의 상대적 화질을 정확하게 제어할 수 있는 결합 화질 제어 방식을 제안한다. 제안된 방식은 결합 화질 제어되는 모든 프로그램의 영상들에 대한 전체 목표 비트 할당과정에서 비디오 버퍼의 넘침과 고갈을 방지하고, 비트율-왜곡 곡선의 변형처리에 의하여 고화질을 요구하는 프로그램들과 나머지 프로그램들의 상대적인 화질을 PSNR 관점에서 정확하게 제어한다. 한편 본 논문에서는 결합 화질 제어의 기반이 되는 MPEG-2 비디오에 대한 비트율-왜곡 추정 방식을 제시하고 시험을 통하여 성능을 평가한다. 제안된 비트율-왜곡 추정의 장점은 추정을 위한 주 연산이 양자화기에 입력되는 DCT 계수의 히스토그램을 구하는 것이므로 계산량이 매우 적고, 추정 결과가 실제의 MPEG-2 비디오 응용에 적용할 수 있을 만큼 정확하다는 것이다. 실험 결과 제안된 화질 제어 방식을 한 채널을 통해 전송되는 비디오 프로그램들간의 상대적인 화질을 매우 정확하게 제어할 뿔만 아니라 각 프로그램을 독립적으로 부호화하는 방식에 비하여 보다 일관된 화질과 향상된 화질을 제공함을 확인하였다.

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2005 르노삼성자동차 Corporate Brochure Contents 개발 분석 (Analysis of Developing Contents of 2005 Renault Samsung Motors Corporate Brochure)

  • 서경원
    • 한국콘텐츠학회논문지
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    • 제7권4호
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    • pp.241-249
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    • 2007
  • 본 논문은 편집디자인 실무 현장에서 이루어지는 Corporate Brochure의 제작 시 고려 대상과 컨셉 도출 과정 및 디자인 접근방법을 다루었다. 웰메이드(Well-made) Brochure라함은 업의 개념에 맞는 전략적 핵심키워드의 선점, 소구 타겟에 맞는 적절하고 고급스러운 은유, 직접화법과 간접화법의 적절한 조화, 그것을 담아낼 수 있는 창의적이고 이유 있는 디자인을 Brochure 한 권에 담아 놓는다는 의미이다. 따라서 Brochure를 바라보고 분석하는 시선 또한 변화해야 한다. 1. 해당기업의 시장 환경과 업계의 Positioning 및 Needs에 대한 정확한 진단이 전제 되고 있는가? 2. 과제에 대한 해결방안과 기업이 원하는 문제해결 및 기대효과를 충족시키는가에 대한 검증 및 Topic선점. 3. 1번 2번 항목의 목적을 달성하기 위해 경쟁사 및 선진사의 사례와 글로벌트랜드를 반영하고 있는가? 4. 고유의 Issue와 글로벌 트랜드를 담을 만한 디자인 언어와 차별화를 위한 수사(修辭)적인 시각적 아이디어가 적절한가? 이러한 분석적인 관점에서 편집물을 조망 한다는 것은 편집디자인을 단지 텍스트와 조형의 평면 레이아웃적 조화라는 표피적인 관점에서만 보려하는 구태를 벗어날 수 있으며, 추후 비슷한 당면과제에 합리적인 Solution을 제공할 수 있는 근거로서 의미를 둘 수 있다.

한국인 학습자의 영어 모음 인지: 새로운 L2 모음 범주와 비슷한 L2 모음 범주의 비교 (Perception of English Vowels By Korean Learners: Comparisons between New and Similar L2 Vowel Categories)

  • 이계윤;초미희
    • 한국콘텐츠학회논문지
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    • 제15권8호
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    • pp.579-587
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    • 2015
  • 본 연구의 목적은 한국인 학습자들이 어떻게 영어모음을 인지하는지를 알아보고, 언어학습모델(SLM)의 예측처럼 한국어에 없는 새로운 영어모음이 한국어와 비슷한 영어모음보다 습득에 용이한지 살펴보는 것이다. 20명의 한국인 실험참여자들은 6개의 영어모음 /i, ɪ, u, ʊ, ɛ, æ/을 사료로 한 영어-한국어 대응 테스트와 영어 모음 판별 테스트에 참여하였다. 영어-한국어 대응 테스트의 결과 대부분의 학생들이 음향적으로 구분되어있는 영어모음 /i/-/ɪ/, /u/-/ʊ/를 각각 하나의 한국어모음인 /이/와 /우/로 대응하여 인지하는 것을 보여주었다. 또한 영어모음 /ɛ/를 한국어모음 /에/와 /애/로 대응하여 인지하였고, 영어모음 /æ/도 마찬가지로 한국어모음 /에/와 /애/로 혼용하여 대응하는 패턴을 보여줌으로써 한국인 영어학습자들이 영어 모음쌍 /i-ɪ/, /u-ʊ/, /ɛ-æ/을 인지하기 어려울 것으로 예측되었다. 영어모음 판별테스트에서는 새로운 음소로 분류된 영어모음 /ɪ, ʊ, æ/의 판별 정확도(ɪ: 81.3%, ʊ: 62.5%, æ: 60.0%)가 비슷한 음소로 분류된 영어모음 /i, u, ɛ/의 판별 정확도(i: 28,8%, u: 28.8%, ɛ: 32.4%)보다 유의하게 높아서 SLM의 예측대로 새로운 음소가 습득하기 쉽다는 것을 확인할 수 있었다. 또한 비슷한 음소로 분류된 영어모음들의 판별 정확도가 새로운 음소에서의 판별 정확도보다도 현저히 낮은 수치를 보여준 것을 과일반화로 설명하였는데, L2 학습자가 새로운 모음 범주를 습득하는 과정에서 비슷한 L2 소리를 새로운 L2 소리로 과도하게 대치한 현상이다. 본 연구결과를 바탕으로 교육적인 함의점도 제시되었다.

3차원에서의 순간적인 속도변화에 의한 ECO의 최적궤도변경 (OPTIMAL DEELECTION OF EARTH-CROSSING OBJECT USING A THREE-DIMENSIONAL SINGLE IMPULSE)

  • 민병희;박상영;노경민;최규홍;문홍규
    • Journal of Astronomy and Space Sciences
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    • 제22권3호
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    • pp.249-262
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    • 2005
  • 순간적인 속도변화에 의한 ECO(Earth-Crossing Object)의 케도변경을 최적화하는 알고리즘을 개발하였다. 이를 통해, ECO의 궤도변경을 위한 속도변위를 계산할 때, 기존연구에서 간과되었던 궤도평면에 수직인 방향의 속도 변화를 살펴보았다. 이러한 3차원의 최적화 문제를 풀기위해서 순간적인 속도변화를 계산하기 위한 순간추력 근사법이 적용되었으며, ECO의 지구 접근 시에는 지구중력 효과를 고려한 부분적 궤도근사법을 사용하였다. 지구와 충돌천체의 상대적인 위치와 속도에 따라 ECO의 궤도변경을 위한 최적해가 달라지며, 그러한 최적해는 순간추력시간에 대한 최적속도변화나 최적비행각으로 표현될 수 있다. 순간추력시간이 작을 때, 궤도평면에 수직인 방향의 속도 변화를 무시할 수 없는 경우도 발견되었다. ECO의 궤도가 지구의 궤도와 비슷할수록 더 많은 최적속도변화가 필요로 하였으며, 순간추력시간이 충돌 순간에 가까워질수록 궤도변경에 필요한 최적속도변화의 크기가 지수함수적으로 증가하였다. 이러한 연구결과는 실제 ECO의 우주임무를 설계하는데 중요한 지침이 될 것이다.

수 연산과정에서 ERP로 확인된 숫자어휘와 부호변환 과정 (Words for Numbers and Transcoding Processes Reflected by ERPs during Mental Arithmetic)

  • 김충명;김동휘
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제11권2호
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    • pp.689-695
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    • 2010
  • 한글 숫자어휘의 부호변환 과정을 알아 봄에 있어, 수연산이 시행되는 동안 주어진 목표자극들 간의 연산결과가 일치하는지에 대한 과제를 ERP 실험방법에 의거 시행하였다. 평균진폭에 대한 실험 결과는 과제-의존적인 처리가 아닌 자극유형-의존적인 처리과정을 보여주었는데, 덧셈 및 곱셈과제에서의 한글 숫자어휘의 시간적인 뇌파개형은 아라비아 숫자에 대한 그것과 유사하게 나타났다. 이 처리과정에서의 유의미한 차이점은 300ms 부근에서 나타난 지연된 양성파형의 성분으로서, 이는 한글 숫자어휘의 아라비아 숫자로의 부호변환 과정으로 해석가능하다. 이 과정에 수반된 뇌영상을 분석한 결과, 두 조건에서 서로 다른 파형을 야기한 영역은 한글문자 처리에 관여하는 좌측 측두-두정영역으로 확인되었다. 이와 같은 결과는 수연산 과정의 개개 자극인 한글 숫자어휘의 내재적 수표상 방식이, 수개념으로의 직접적 접근이 아니라 일정한 부호변환 과정을 통한 도식화된 통로를 거치고 있음을 시사한다 할 수 있다.

Effect of different levels of protein concentrates supplementation on the growth performance, plasma amino acids profile and mTOR cascade genes expression in early-weaned yak calves

  • Peng, Q.H.;Khan, N.A.;Xue, B.;Yan, T.H.;Wang, Z.S.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제31권2호
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    • pp.218-224
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    • 2018
  • Objective: This study evaluated the effects of different levels of protein concentrate supplementation on the growth performance of yak calves, and correlated the growth rate to changes occurring in the plasma- amino acids, -insulin profile, and signaling activity of mammalian target of rapamycin (mTOR) cascade to characterize the mechanism through which the protein synthesis can be improved in early weaned yaks. Methods: For this study, 48 early (3 months old) weaned yak calves were selected, and assigned into four dietary treatments according to randomized complete block design. The four blocks were balanced for body weight and sex. The yaks were either grazed on natural pasture (control diet) in a single herd or the grazing yaks was supplemented with one of the three protein rich supplements containing low (17%; LP), medium (19%; MP), or high (21%; HP) levels of crude proteins for a period of 30 days. Results: Results showed that the average daily gain of calves increased (0.14 vs 0.23-0.26 kg; p<0.05) with protein concentrates supplementation. The concentration of plasma methionine increased (p<0.05; 8.6 vs $10.1-12.4{\mu}mol/L$), while those of serine and tyrosine did not change (p>0.05) when the grazing calves were supplemented with protein concentrates. Compared to control diet, the insulin level of calves increased (p<0.05; 1.86 vs $2.16-2.54{\mu}IU/mL$) with supplementation of protein concentrates. Addition of protein concentrates up-regulated (p<0.05) expression of mTOR-raptor, mammalian vacuolar protein sorting 34 homolog, the translational regulators eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein 1, and S6 kinase 1 genes in both Longissimus dorsi and semitendinosus. In contrast, the expression of sequestosome 1 was down-regulated in the concentrate supplemented calves. Conclusion: Our results show that protein supplementation improves the growth performance of early weaned yak calves, and that plasma methionine and insulin concentrations were the key mediator for gene expression and protein deposition in the muscles.

No Association of Hypoxia Inducible Factor-1α Gene Polymorphisms with Breast Cancer in North-West Indians

  • Sharma, Sarika;Kapahi, Ruhi;Sambyal, Vasudha;Guleria, Kamlesh;Manjari, Mridu;Sudan, Meena;Uppal, Manjit Singh;Singh, Neeti Rajan
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제15권22호
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    • pp.9973-9978
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    • 2014
  • Background: Hypoxia inducible factor-1 alpha (HIF-$1{\alpha}$) is the key regulator of cellular responses to hypoxia and plays a central role in tumour growth. Presence of Single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the critical regulatory domains of HIF-$1{\alpha}$ may result in the overexpression of the protein and subsequent changes in the expression of the downstream target genes. The aim of study was to investigate the association of three SNPs (g.C111A, g.C1772T and g.G1790A) of HIF-$1{\alpha}$ with the risk of breast cancer in North Indian sporadic breast cancer patients. Materials and Methods: A total of 400 subjects, including 200 healthy controls and 200 patients with breast cancer were recruited in this study. Genotypes were determined using polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method. Results: The CC and CA genotype frequency of HIF-$1{\alpha}$ g.C111A polymorphism was 100 vs 99% and 0 vs 1% in breast cancer patients and healthy controls respectively. The frequencies of CC, CT and TT genotype of g.C1772T polymorphism were 76 vs 74.5%, 19 vs 21% and 5 vs 4.5% in breast cancer patients and control individuals respectively. There was no significant difference in genotype and allele frequencies of HIF-$1{\alpha}$ g.C1772T polymorphism between cases and control individuals (p>0.05). For g.G1790A genotypes, all patients and controls had only GG genotype. Conclusions: The three HIF-$1{\alpha}$ polymorphisms (g.C111A, g.C1772T and g.G1790A) are not associated with breast cancer risk in North-West Indian patients.