Bifidobacteria are probiotic organisms that provide both flavor and health benefits when incorporated as live cultures into commercial dairy products. Because bifidobacteria are very sensitive to environmental conditions (acids, temperature, oxygen, bile salts, the presence of other cultures, etc.), their viability in human gastrointestinal tract is limited. The microencapsulation of bifidobacteria is a process to protect them against harsh environmental conditions, thereby increasing their viability while passing through human gastrointestinal tract. To confirm the survival rate of microencapsulated Bifidobacterium breve CBG-C2 in milk, their survival rate was compared with several kinds of free bifidobacteria and lactic acid bacteria in commercial yogurt products under simulated gastric and small intestinal conditions. Double-microencapsulation of the bacteria was employed to increase the survival rate during digestion. The outer layer was covered with starch and gelatin to endure gastric conditions, and the inner layer was composed of a hard oil for the upper small intestinal regions. Almost all microencapsulted bifidobacteria in the milk survived longer than the free bifidobacteria and lactic acid bacteria in the commericial yogurt products under the simulated gastric conditions. Numbers of surviving free bifidobacteria and lactic acid bacteria in the commercial products were significantly reduced, however, the viability of the microencapsulated bificobacteria in the milk remained quite stable under gastric and small intestine conditions over 3$\sim$6 hrs. Thus double-microencapsualtion of bifidobacteria in milk is a promising method for improving the survival of bifidobacteria during the digestive process.
국내 시판 19종의 드링크 및 18종의 액상 요구르트 제품에 함유된 2종의 유산균인 Lactobacilli 및 Bifidobacteria의 내산성을 인공위액(pH 1.5) 조건에서 비교 고찰되었다. 드링크 및 액상 요구르트 제품중 초기 Lactobacilli의 생존율은 각각 $10^8~10^{10}$ cfu/ml 및 $10^6~10^{10}$cfu/ml 범위 내에 있었다. 한편 드링크 요구르트 중 초기 Bifidobacteria의 생존율 $10^8~10^{10}$cfu/ml 이었다. 요구르트 제품중 Lactobacilli 및 Bifidobacteria의 생존율은 인공위액에 노출 시간이 증가함에 따라 점차 감소하는 경향을 나타내었으며 120분 노출시에 제품들간에 큰 차이를 나타내었다. (<$10^3~10^6$cfu/ml),캡슐을 함유한 요구르트 제품의 경우, 캡슐을 제외한 Mix는 인공위액에 30분에서 120분 노출시에 약$10^5$cfu/ml이상의 생존율을 나타내었으며 타사 제품과 유사한 거동을 보였다. 그러나 Bifidobacteria를 함유한 캡슐요구르트 제품의 경우 인공위액에 약 120문 노출시켰으때 타사 제품보다 생존율이 약10~737배 이상 증가하였다. 즉 Bifidobacteria의 내산성은 코팅물질을 사용한 캡슐로 봉입하였을 때 증가됨을 알 수 있었다.
우리나라 고유의 염건품인 굴비를 섭취하였을 때 체내에서 생성되는 NA를 예측하기 위해서 인공타액과 위액을 혼합하여 37。C에서 2시간동안 배양한 굴비의 인공소화물로부터 NA를 분석하였고, 동시에 nitrite, thiocyanate 및 ascorbic acid가 공존할 경우 NA생성에 미치는 영향을 실험하였다. 굴비시료에 인공타액과 위액을 가하여 소화시킨 인공소화물에서는 N-nitrosodimethylamine(NDMA)이 전혀 검출되지 않았으나, nitrite농도를 증가시킬수록 이에 비례하여 NDMA의 생성은 증가하였다. 굴비시료에 thiocyanate를 농도별(0∼6.4 mM)로 첨가하여 인공소화 시킨 결과 nitrite첨가량에 비례하여 NDMA 생성이 증가되었으나, 고농도의 nitrite(100 mM)를 함유한 시료에 thiocyanate를 8mM이상 첨가한 경우에는 뚜렷한 촉매효과를 나타내지 않았다. 반면에 10g의 굴비시료에 ascorbic acid를 농도별로 첨가한 인공 소화물에서 NDMA생성억제를 실험한 결과 nitrite농도가 0.5 및 1 mM인 경우에는 NDMA의 생성을 억제시키지 못하였으나 nitrite와 ascorbic acid의 농도가 높아짐에 따라 비례적으로 NDMA 생성억제도 뛰어났다.
대조구, 질산염급원, 아민급원 및 질산염-아민급원 함유식이에 인공타액과 위액을 첨가하여 인공소화시켰을 때 각 식이의 NDMA 함량은 각각 2.5$\pm$0.8$\mu\textrm{g}$/kg, 8.5$\pm$1.2$\mu\textrm{g}$/kg, 6.0$\pm$0.6$\mu\textrm{g}$/kg 및 8.0$\pm$1.5$\mu\textrm{g}$/kg 이었다. 이들 식이에 금귤쥬스 10m1를 첨가하여 인공소화시켰을 때 NDMA생성억제 효과는 아민급원 함유식이에서 69.4$\pm$2.4%로 가장 높은 억제효과를 나타내었다. 금귤쥬스로부터 HPLC를 이용하여 분취한 페놀 화합물의 모든 분획에서 NDMA 생성억제 효과가 나타났으며, 특히 fraction no. 4에서 66.5$\pm$2.0%로 가장 높았다.
녹차 및 매실추출물이 아질산염 소거, 전자 공여능 및 NDMA 생성 억제에 미치는 영향을 분석하고, 질산염과 아민이 풍부한 식단(CW)에 인공타액과 위액을 이용한"simulated digestion"에서 확인하였다. 녹차와 매실 추출물의 아질산염 소거작용을 pH 1.2,4.2 및 6.0에서 실험한 결과, pH가 낮을수록, 시료 첨가량이 많을수록 효과적이었으며 pH 1.2에서 녹차 추출물 0.5ml 첨가시킬 경우 99.6%의 높은 소거작용을 나타내었고, 매실 추출물 3ml 첨가시 77.2%의 소거작용을 나타내었다. 녹차 및 매실 추출물의 전자공여 시용은 각각 70.6%, 75.1%로 높게 나타났다. 녹차와 배 신 추출물의 NDMA 생성억제 효과는 pH 1.2에시 가장 뛰어났을, 시료량이 증가할수록 억제효과가 높아 3ml 첨가시에 82.1%와 73.2%의 억제효과를 나타내었다. 실험식이에 녹차 및 매실 추출물의 텀가량을 달리하여 인공소화시킬 때 NDMA생성억제 효과는 시료 첨가량에 비례하여 각각 20m1첨가시 녹차 추출물은 57.9%, 매실 추출물은 48.4%의 NDMA 생성 억제 효과를 나타내었다.
Lactobacillus rhamnosus GG (LGG) has low resistance to low pH and bile salt in the gastrointestinal juice. In this study, the gel made from whey protein concentrate (WPC) and pullulan (PUL) was used as the wall material to prepare the microencapsulation for LGG protection. The gelation process was optimized and the properties of gel were also determined. The results showed the optimal gel was made from 10% WPC and 8.0% PUL at pH 7.5, which could get the best protective effect; the viable counts of LGG were 6.61 Log CFU/g after exposure to simulated gastric juice (SGJ) and 9.40 Log CFU/g to simulated intestinal juice (SIJ) for 4 h. Sodium dodecyl sulphite polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) confirmed that the WPC-PUL gel had low solubility in SGJ, but dissolved well in SIJ, which suggested that the gel can protect LGG under SGJ condition and release probiotics in the SIJ. Moreover, when the gel has highest hardness and water-holding capacity, the viable counts of LGG were not the best, suggesting the relationship between the protection and the properties of the gel was non-linear.
Tannins in plant foods and beverages may produce antinutritional or toxic effects although some proteins with high affinity for tannins seem to function as defense mechanism to tannin toxicity. Our objectives were to investigate of tea tannins, iron and protein and to evaluate the role of proteins in tannin effects on iron solubility. Iron solubility in vitro was measured using tea with and without proteins. Mixtures of tea, protein in varying concentrations(either gelatin or bovine serum albumin), and iron(eithe 10 or 50ug/mL) were prepared. Controls contained water in place of tea. Iron bioavailability was assessed by measuring iron solubility in the simulated gastric condition with pepsin digestion. Bound iron was removed by centrifugation and soluble in tea alone. When iron concentratin was 10ug/mL, addition of small amounts of protein to tea dramatically reduced iron solubility, but solubility of iron increased in the tea mixturea as the concentration of protein was increased. The percnetage of iron that precipitated was much greater at 10ug Fe/mL than the values at 50ug Fe/mL suggesting that the iron binding sites on the tea-protein complex was saturated. These results suggest that interactions of iron with tea tannins are influenced by the concentratins of protein and iron.
Solid dispersions and inclusion complex were prepared for the enhancement of solubility and dissolution rate of poorly water-soluble ibuprofen(IPF) as a model drug. Polyethylene glycol 4000(PEG4000) and polyvinylpyrrolidone(PVP) were used for the preparation of solid dispersion. $2-Hydroxypropyl-{\beta}-cyclodextrin(2-HP{\beta}CD)$ was also used for the preparation of inclusion complex. The solubility of IPF increased as the concentration of PEG4000, PVP and $2-HP{\beta}CD$ increased. Solubilization capacity of $2-HP{\beta}CD$ was increased about 10 times when compared to PEG 4000 and PVP. The dissolution rate of drug from solid dispersions and inclusion complex in the simulated gastric fluid was enhanced when compared to pure IPF and commercial $BR4^{\circledR}$ tablet as a result of improvement of solubility. In case of solid dispersions, dissolution rate of drug was proportional to polymer concentration in the formulation. The marked enhancement of dissolution rate of drug by inclusion complexation with $2-HP{\beta}CD$ was noted. However, dissolution rate of drug from solid dispersions and inclusion complex in the simulated intestinal fluid was not significant because IPF was readily soluble in that condition. From these findings, water-soluble polymers and cyclodextrin were useful to improve solubility and dissolution rate of poorly water-soluble drugs. However, easiness and reliability of preparation method, scale-up and cost of raw materials must be considered for the practical application of solid dispersion and inclusion complex in pharmaceutical industry.
Arellano, Karina;Park, Haryung;Kim, Bobae;Yeo, Subin;Jo, Hyunjoo;Kim, Jin-Hak;Ji, Yosep;Holzapfel, Wilhelm H.
한국미생물·생명공학회지
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제49권2호
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pp.157-166
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2021
The probiotic market is constantly continuing to grow, concomitantly with a widening in the range and diversity of probiotic products. Probiotics are defined as live microorganisms that provide a benefit to the host when consumed at a proper dose; the viability of a probiotic is therefore of crucial importance for its efficacy. Many products undergo lyophilization for maintaining their shelf-life. Unfortunately, this procedure may damage the integrity of the cells due to stress conditions during both the freezing and (vacuum-) drying process, thereby impacting their functionality. We propose a lysine-based mixture for rehydration of freeze-dried probiotics for improving their viability during in vitro simulated gastric and duodenum stress conditions. Measurement of the zeta potential served as an indicator of cell integrity and efficacy of this mixture, while functionality was estimated by adhesion to a human enterocyte-like Caco-2 cell-line. The freeze-dried bacteria exhibited a significantly different zeta potential compared to fresh cultures; however, this condition could be restored by rehydration with the lysine mixture. Recovery of the surface charge was found to influence adhesion ability to the Caco-2 cell-line. The optimum lysine concentration of the formulation, designated "Zeta-bio", was found to be 0.03 M for improving the viability of Lactiplantibacillus plantarum Lp-115 by up to 13.86% and a 7-strain mixture (400B) to 41.99% compared to the control rehydrated with distilled water. In addition, the lysine Zeta-bio formulation notably increased the adherence ability of lyophilized Lp-115 to the Caco-2 cell-line after subjected to the in vitro stress conditions of the simulated gastrointestinal tract passage.
본 연구는 게르마늄 강화 효모의 제조 공정을 위한 최적의 조건을 잡고 제조된 게르마늄 강화 효모 내의 게르마늄의 결합 상태 확인을 목적으로 하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 균체와 게르마늄 용액 혼합 비율 1 : 0.5(50%)로 하여 균체와 게르마늄 배양시 최적 조건인 pH 6.5, 온도 $35^{\circ}C$ 그리고 배양 시간은 20시간 배양하는 것이 높은 함량의 게르마늄을 효모 균체 내로 유입시켜 게르마늄 강화 효모를 생산하였으며, 이의 배양 과정을 통해 생산된 게르마늄 강화 효모는 배양 과정 동안의 구조적 변화에 의해 효모 내에 유입된 무기 형태인 $GeO_2$ 게르마늄과는 다른 구조를 형성하고 있었다. 또한 NMR 및 FTIR 실험을 실시한 결과 게르마늄 강화 효모의 발효 과정에 첨가한 무기 형태의 $GeO_2$가 배양 과정 동안 균체 내에서 게르마늄이 유입되는 과정에서 게르마늄이 단백질(혹은 펩타이드)과 결합하여 구조에 변화를 형성하였으며, 인공위액 안에서 투석막을 이용한 투석 전후에 따른 게르마늄 총량에서 투석 전후에 따른 차이가 나타나지 않았다. 따라서 게르마늄 강화 효모는 생합성 기법을 이용하여 게르마늄을 강화한 유기 게르마늄 생산방법으로 배양 과정을 통해 구조적으로 안전한 유기 게르마늄을 형성하여 인공위액 조건에서도 해리되지 않는 것으로 보여지며, 각종 암, 성인병의 예방과 치료, 인체 면역력의 증진 등 건강 증진을 위한 새로운 기능성 원료로의 활용이 기대되며, 이에 대한 지속적인 연구가 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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