LIM, YOUNG-YI;EUN-HA PARK;JI-HYE KIM;SEUNG-MOON PARK;HYO-SANG JANG;YOUN-JE PARK;SEWANG YOON;MOON-SIK YANG;DAE-HYUK KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제11권6호
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pp.915-921
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2001
Phytase improves the bioavailability of phytate phosphorus in plant foods to humans and animals, and reduces the phosphorus pollution of animal waste. In order to express a high level of fungal phytase in Saccharomyces cerevisiae, various expression vectors were constructed with different combinations of promoters, translation enhancers, signal peptides, and terminator. Three different promoters fused to the phytase gene (phyA) from Aspergillus niger were tested: a galactokinase (GAL1) promoter, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GPD) promoter, and yeast hybrid ADH2-GPD promoter consisting of alcohol dehydrogenase II (ADH2) and a GPD promoter. The signal peptides of phytase, glucose oxidase (GO), and rice amylase 1A(RAmy1A) were included. Plus, the translation enhancers of the ${\Omega}$ sequence and UTR70 from the tobacco mosaic virus (TMV) and spinach, respectively, were also tested. Among the recombinant vectors, pGphyA06 containing the GPD promoter, the ${\Omega}$ sequence, RAmy1A, and GAL7 terminator expressed the highest phytase activity in a culture filtrate, which was estimated at 20 IU/ml. An intracellular localization of the expressed phytase activity in a culture filtrate, which was estimated at 20 IU/ml. An intracellular localization of the expressed phytase was also performed by inserting an endoplasmic reticulum (ER) retention signal, KDEL sequence, into the C-terminus of the phytase within the vector pHphyA-6. It appeared that the KDEL sequence directed most of the early expression of phytase into the intracellular compartment yet more than $60\%$ of the total phytase activity was still retained within the cell even after the prolonged (>3 days) incubation of the transformant. However, the intracellular enzyme activity of the transformant without a KDEL sequence was as high as that of the extracellular one, thereby strongly suggesting that the secretion of phytase in S. cerevisiae appeared to be the rate-limiting step for the expression of a large amount of extracellular recombinant phytase, when compared with other yeasts.
최근에 터치펜이 내장된 모바일 기기가 증가하고 있다. 터치가 가능한 디바이스는 펜을 터치 보드에 접속하는 순간부터 신호의 정확도와 반응 속도가 매우 중요하다. 따라서 터치 신호에 포함된 잡음을 빠르고 효과적으로 제거할 수 있는 방법에 대한 연구가 필요하다. 본 논문에서는 터치스크린에 펜으로 입력된 터치 포인트 좌표에 섞인 노이즈를 제거하는 방법을 제안한다. 효과적인 필터링을 위해서는 먼저 입력된 신호 중에서 노이즈에 해당하는 좌표를 빠르게 Sampling함으로써 노이즈를 1차적으로 제거 한다. 그 다음으로 터치 좌표의 전체보정을 위해 B-Spline 곡선의 특성을 이용하여 좌표의 포인트를 보정하게 된다. 이는 다른 알고리즘들 보다 실시간성을 보장할 수 있다. 성능 평가 방법은 터치패드에 대각선을 10개의 구간을 나누어 오차 픽셀들을 기준 값들과 비교 평가하였다. 평균 오차는 7.1픽셀이며, 우리가 제안한 방법은 평균 4.1오차를 보였다. 따라서 우리가 제안한 방법을 이용하여 정확한 좌표에 표현 할 수 있는 터치 펜 시스템을 제시하였다.
공항 철도 연계 시설 확충 사업에 따라 수색역구내에서 공항 철도로 연결선(L=2.2km)을 건설하고 신호 시스템 및 정거장을 개량하여 경의선 수색역에서 공항 철도로 경부선 및 호남선 고속열차(KTX)를 직결 운행 할 수 있도록 하였다. KTX/AREX 열차의 혼용 운행에 따른 AREX 전동 열차의 신호 시스템은 기존과 동일한 ATC /ATO 방식으로 운행하고 KTX 고속 열차는 ERTMS/ETCS L1 ATP 방식을 신설하여 운행하기로 하였으나 "고속 열차(KTX)와 공항 철도의 지상 신호 설비" 간 및 "공항 철도 차량(AREX)과 고속 열차용 ATP 시스템 지상 설비간 상호 간섭 등의 문제점으로 인하여 고속 열차 운행이 불가능하게 되었다. 이에 공항 철도 비콘과 KTX 열차용 발리스의 특성을 비교 분석한 결과 상호 간섭에 대한 기술적 보완이 필요함을 확인하게 되었다. 따라서 이러한 복합적인 문제의 해결과 기술적 타당성을 확인하기 위해 3가지 유형의 시험 모듈로 실제의 열차를 이용하여 시험을 함으로서 "고속열차(KTX)와 공항 철도 지상 신호 설비간" 및 "공항 철도 전동차(AREX)와 고속 열차용 ATP시스템 지상 설비" 간 상호 간섭 등의 문제점을 해소하고자 한다.
본 논문에서는 기존에 Russell의 감정차원 모델(A Circumplex model)상에서 데이터의 분산 값을 줄이고, 복합적감정(mixed feelings)을 표현하는 새로운 방법을 제안한다. Russell의 감정차원 모델은 감정을 뜻하는 단어(기쁨, 슬픔, 행복, 신남 등)를 제시한 뒤, 자가진단방식(SAM)을 이용하여 단어들의 평균과 분산을 구하고, 각 단어들을 PAD차원(Pleasure, Arousal, Dominance)에 하나의 점으로 표시한다. 하지만 다른 연구자에 의하여 Russell모델의 문제점으로 각 단어들의 분산 값이 커서 데이터의 신뢰도나 정확성이 떨어지며, Russell의 모델의 구조에선 복합적 감정(mixed feelings)을 표현할 수 없는 등의 문제점들이 지속적으로 제기되었다. 본 논문에서는 이와 같은 문제점을 보완하기 위해 설문 방식의 변화를 통해서 실험을 진행하여, 데이터의 분산 값을 줄일 수 있었다. 또한 복합적 감정을 유발 할 수 있는 실험을 통해 감정 상태의 긍정적/부정적인 부분의 관계를 확인해보고, Russell모델에서도 복합적 감정을 표현할 수 있음을 입증하였다. 본 논문에서 제안하는 방법을 이용하여 기존의 연구에서 보다 신뢰도와 정확도가 높은 데이터를 얻을 수 있으며, Russell모델을 적용시키기 어려웠던 생체신호, 복합적 감정, 실감 방송 등의 여러 분야에 적용 시킬 수 있다.
푸리에 급수는 사인 곡선처럼 일정한 진폭으로 진동하는 정규파(wave)를 사용한다. 그래서 푸리에 급수에서 사용하는 함수는 진동수의 크기가 시간에 따라 변하지 않기 때문에 국부적인 영역에서 급작스런 진동이나 불연속성을 갖는 신호를 표현하기에는 한계가 있다. 그러나 이러한 푸리에 해석의 단점을 여러개의 적절한 웨이블렛의 선형조합에 의해 보완할 수 있는 것이 웨이블렛 급수해석이다. 시간에 집중되어진 궤적의 작은 잔파(wavelet)를 사용함으로써 시간과 주기의 폭을 변화시킬 수 있기 때문에 유동적이고, 특이(singular)형상을 지닌 신호들을 보다 효율적으로 표현할 수 있다. 이 연구의 주요 목적은 웨이블렛 급수해석이라고 불리는 방법을 2계 편미분방정식으로 표현되는 1차원 축방향 부재에 웨이블렛 이론을 적용함과 동시에 유한요소법과 같은 수치해석법과의 비교를 통해 성능평가를 위해 제안되었다. 여러 형태의 웨이블렛 함수의 검토 후에 HAT 함수가 웨이블렛 및 스케일링 함수로 채택되었다. 등분포하중을 받는 경우의 축방향 부재해석에서 제안된 방법은 유한요소법과 같이 효율적임을 보이며, 특히 응력특이점에서는 더 정확한 값을 보였으며, 계산시간도 절약되는 장점을 얻을 수 있었다.
재조합 효모를 이용한 포도당산화효소의 대량생산 에 관한 기초연구를 실시하였다. 분비신호를 포함한 포도당산화효소 유전자는 Aspergillus niger로부터 polymerase chain reaction을 이용하여 클로닝한후 G GALl과 GALlO promoter를 이용하여 s. cerevi siae strain 2805에서 말현시킨 결과 GALl promoter를 사용한 형질전환체(yGOD1-l)에서 높은 효율 의 효소생성을 나타냈다. 플라스크 배양 결과 1% galactose를 포함한 YEP 배 지 에셔 최고 6 IU/mL 의 포도당산화효소를 생산하였으며 재조합 포도당산 화효소의 세포내 위치를 비교한 결과 A. niger와는 달리 발현된 효소가 80% 이상 배지로 분비됨을 확인하였다. 재조합 포도당산화효소의 열 안정성을 측정한 결과 표준품과 비교하여 $50^{\circ}C$까지 큰 차이를 보이지 않고 높은 활성을 유지하는 것으로 확인되었다.
본 연구에서는 개인용 정보단말기에 사용되는 아이콘을 기능, 상징화 유형, 운영체제, 컬러사용유무에 따라 분류한 후, 분류된 아이콘 사이에 직관적 의미전달능력에 차이가 있을 것으로 보고 이를 실증적으로 검증해보고자 실험연구를 실시하였다. 연구결과, 개인용 정보단말기에 사용되는 아이콘은 기능, 상징화 유형, 운영체제, 컬러사용유무에 따라 직관적 의미전달능력에 차이가 있는 것으로 나타났다. \circled1 기능에 따라 분류 된 아이콘 중, 데스크톱 컴퓨터 등에서 사용하는 것과 동일한 지시대상을 사용하는 아이콘과, 지시대상에 대한 표현이 정확하면서 단순한 아이콘의 직관적 의미전달능력이 높은 것으로 나타났다. \circled2 상징화 유형 별로 분류된 아이콘 중, 기능과 관련된 동작을 표현하고 있는 아이콘은 인식정확도가 가장 높게 나타났고, 인식지체시간은 다소 길게 나타났다. \circled3 운영체제에 따라 분류된 아이콘 중, 지시대상에 대한 표현이 구체적이고 표현요소가 많은 아이콘은 인식정확도는 높고 인식지체시간은 긴 것으로 나타났다. \circled4 컬러사용유무에 따라 분류된 아이콘 중, 컬러를 사용하고 있는 아이콘은 색상 수가 제한된 개인용 정보단말기에서도 컬러가 주는 자극이 영향을 미쳐 직관적 의미전달능력이 뛰어난 것으로 나타났다.
FC(free choresterol) plays an important role in normal and pathophysiological cells including that of messenger molecule or dilator of blood vessels in such illnesses as artheriosclerosis, hypertension and myocardial infarction. Smooth muscle and endothelial cell functions in the arteria wall are unified by complex intercellular signalling processes. In arteria comprised of one layer of smooth muscle cells surrounding the endothelium, the close apposition of the two cell types enables a signal derived from one cell to rapidly diffuse to neighboring cells. Experimentation was conducted to investigate the potential contribution of Sohaphyangwon(SHHW) on levels of FC generated by goaded microphages, and mechanisms of protection against ACAT inhibitor. It was found that J774 macrophages, which normally do not express FC were expressed by oxLDL and ACAT inhibitor. SHHW protected cells were found to be resistant to oxLDL and delayed death following the FC. Inhibition of FC formation abolished the protective effect against ACAT inhibitor exposure. Cadiovascular diseases include abnormalities of blood vessels dysfunction of the renin-angiotension system. What relation herbal medicine may have with vessel endothelium necrosis was here studied. In Oriental Medicine, SHHW water extract used for diseases in relation to cardiovascular systems. The resistence to cardiovascular disease of ACAT inhibitor induced J774 macrophage cells were studied through analysis of cell morphological patterns and immunochemistry of SHHW. The results of this study suggest that SHHW has protective effects on the cardiovascular system, and that it is effective in both prevention and treatment of diseases of the cardiovascular system, particularity against necrosis of blood.
Objective : This experiment was performed in order to study the effect of an aqueous extract of Salviae radix root(SRRAE) on NO production and NOS gene induction from macrophages Methods : To investigate dose-dependent effects of SRRAE for NO release on the $rIFN-{\gamma}-treated$ macrophages, the cells were incubated for 6 hrs in a medium containing $rIFN-{\gamma}$ (5 U/ml), stimulated with SRRAE and incubated in a CO2 incubator. The cells were treated with 5 U/ml $rIFN-{\gamma}$ plus 100 g/ml of SRRAE, Then, the cells were incubated with various concentrations of NGMMA at $37^{\circ}C$ for 48 hrs, Results : SRRAE had no effect on NO production by itself, whereas recombinant $interferon-{\gamma}(rIFN-{\gamma})$ alone showed modest activity, When SRRAE was used in combination with $rIFN-{\gamma}$, there was a marked cooperative induction of NO production in a dose-dependent manner. The optimal effect of SRRAE on NO production was shown at 6hrs after treatment with $rIFN-{\gamma}$. The SRRAE-induced production of NO was inhibited by NG-monomethyl- L-arginine(NGMMA) and arginase. $rIFN-{\gamma}$ in combination with SRRAE showed a marked increase of the expression of the inducible NOS(iNOS) gene. In addition, the effect of SRRAE was mainly dependent on the SRRAE-induced tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$ secretion. Conclusions : SRRAE induces NO production from macrophages as a result of SRRAE-induced $TNF-{\alpha}$ secretion. SRRAE may provide a second signal for synergistic induction of NO production in macrophages already induced to express iNOS gene by $rIFN-{\gamma}$.
A native strain of Pasteurella multocida was isolated from pigs suffering from severe atrophic rhinitis at domestic farms in Gyeonggi Province, Korea, and was identified as capsular serogroup 'D' and somatic serotype '4' by disc diffusion decapsulation and gel diffusion precipitation tests, respectively. The P. multocida (D:4) induced atrophic rhinitis in healthy pigs by the secondary infection. The gene for outer membrane protein H (ompH) of P. multocida (D:4) was cloned in Escherichia coli DH5$\alpha$ by PCR. The open reading frame of the ompH was composed of 1,023 bp, possibly encoding a protein with 341 amino acid residues containing a signal peptide of 20 amino acids at N-terminus, and the gene product with molecular mass of ca. 38 kDa was identified by SDS-PAGE. Hydropathy profiles indicated that there are two variable domains in the OmpH. To express the ompH in E. coli, the gene was manipulated in various ways. Expression of the truncated as well as full-length forms of the recombinant OmpH was fatal to the host E. coli BL21 (DE3). However, the truncated OmpH fused with GST was consecutively expressed in E. coli DH5$\alpha$. A large quantity of the fused polypeptide was purified through GST-affinity chromatography.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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