Kim, Dong-Myong;Jung, Ju-Yeong;Lee, Hyung-Kon;Kwon, Yong-Sung;Baek, Jin-Hong;Han, In-Suk
Journal of Marine Bioscience and Biotechnology
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v.12
no.2
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pp.81-90
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2020
Sialic acid, which is contained in about 60-160 mg/kg in the edible bird's nest (EBN), is known to facilitate in the proper formation of synapses and improve memory function. The objective of this study is to extract effectively the sialic acid from edible bird's nest using affinity bead technology (ABT). After preparing the non-polar polymeric bead "KJM-278-28A" having a porous network structure, and then desorbed sialic acid was concentrated and dried. The analysis of the physicochemical properties of bead "KJM-278-28A" showed that the particle size was 400-700 ㎛, the moisture holding capacity was 67-70%, the surface area (BET) was 705-900 ㎡/g, and the average pore diameter 70-87 Å. The adsorption capacity of the bead "KJM-278-28A" for sialic acid was shown a strong physical force to bind sialic acid to the bead surface of 400 mg/L. In addition, as a result of analyzing the adsorption and desorption effects of sialic acid on water, ethanol, and 10% ethanol on the bead, it was confirmed that desorption effectively occurs from the beads when only ethanol is used. As a result of HPLC measurement of the separated sialic acid solution, a total of four sialic acid peaks of N-acetyl-neuraminic acid (Neu5Ac), α,β-anomer of Neu5Ac and N-glycoly-neuraminic acid were identified. Through these results, it was confirmed that it is possible to separate sialic acid from EBN extract with efficient and high yield when using ABT.
The milk protein portion contains sialic acid which may be used as an index for k-casein. In comparison with non fat dry milk (NFDM) and calcium caseinate, the solubility of NFDM protein isolates at the various pH was inferior. Another consideration for the low solubility relates to the possibility that k-casein may have been extracted or possibly modified by the action of alcohol. The k-casein is the principal stabilizing fraction for casein micelle and any changes which result in its destruction or removal would be expected to have potent results. During solvent treatment, 16.5% of sialic acid was extracted in the first extraction solvent, whereas the second treatment caused only a 4.0% loss, based on sialic acid analysis. A study was conducted on the effect of concentration of methanol on loss of sialic acid. The loss of sialic acid decreased as the concentration of methanol increased to above 62% in both the first and second extracted solvent. It appears that loss of sialic acid is attributed to the water fraction rather than the methanol fraction. The effect of addition of the dried extracted solids on solubility was investigated. Protein solubility of NFDM protein isolates was sharply increased by 10% addition of the extracted solids and, thereafter, decreased. Efforts to restore solubility by feeding-back the extracted material supported the concept that removal of surface k-casein may have been a possible factor.
Kim, Dong-Myong;Jung, Ju-Yeong;Lee, Hyung-Kon;Kwon, Yong-Seong;Baek, Jin-Hong;Han, In Suk
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.33
no.6
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pp.614-623
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2020
The objective of this study was to produce a nutrient delivery system (NDS) using sialic acid extracted from edible bird's nest (EBN), which improves brain function in patients with Alzheimer's disease and Parkinson's disease, by affinity bead technology (ABT). The inhibitory activity of acetylcholinesterase (AChE) and pyramidal cells in the dentate gyrus of the hippocampus were analyzed to investigate the effect of a sialic acid NDS on Alzheimer's disease. Also, the effect of a sialic acid NDS on Parkinson's disease was evaluated by rota-rod test and pole test in an animal model. Among the groups treated with donepezil, EBN, and sialic acid NDS, the AChE activity was the lowest in the sialic acid NDS-treated group. The results of the hippocampus analysis of the rat model confirmed that the sialic acid NDS inhibited amyloid-beta accumulation depending upon the concentration. Also, the sialic acid NDS group showed more improvement in motor deterioration than the1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)-induced group in both the rota-rod test and pole test. Therefore, the sialic acid NDS had an effect of protecting not only Alzheimer's disease by inhibiting AChE and amyloid-beta accumulation, but Parkinson's disease by preventing neurotoxicity induced by MPTP.
Kim, Hee-Kyong;Noh, Hye-Ji;Cho, Hyang-Hyun;Koh, Hong Bum
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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v.34
no.2
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pp.137-144
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2016
The ultimate research goal of the current study was a development of hydrolyzed whey protein powder (7%-GNANA) manufactured with normal content of sialic acid, a marker compound, that is naturally occurring at 7% concentration in GMP obtained from the milk protein. GMP is a safe food, used worldwide in infant and baby foods, etc. The test substance was prepared using (7% sialic acid containing) GMP as a raw material, and then using alcalase, an enzyme approved as a food additive, after separation of sialic acid with 100% efficiency and 7%-GNANA (containing 7% sialic acid and protein; product name: HELICOBACTROL-7) provided by MEDINUTROL Inc. (Korea). Bacterial reverse mutation (Ames) test was conducted in accordance with GLP Guideline using the test substance specified above. To identify its mutagenic potential against microorganisms, histidine auxotrophic strains of Salmonella Typhimurium, TA98, TA100, TA1535, and TA1537, and tryptophan auxotrophic strain of Escherichia coli, WP2uvrA, were used. The bacterial reverse mutation (Ames) test was performed by dividing the test substances into five different concentration groups (0, 61.7, 185, 556, 1,670, $5,000{\mu}g/plate$). Results of this experiment did not reveal repetitive increase of colony generating values or positive criteria for reverse mutagenicity for any concentration of test substances in any of the five strains, regardless of the presence of a metabolic activation system, and no dose-dependency was identified. In conclusion, the safety of 7%-GNANA test substance was verified by bacterial reverse mutation test conducted before registration of 7%-GNANA as a food additive.
The infection of pandemic influenza viruses such as swine flu (H1N1) and avian flu viruses to the host cells is related to the following two factors: First, the surface protein such as HA (hemagglutinin) and NA (neuraminidase) of the influenza virus. Second, the specific structure of the oligosaccharide [sialic acid(${\alpha}2$-6) galactose(${\beta}1$-4)glucose or sialic acid(${\alpha}2$-3)galactose(${\beta}1$-4)glucose] on the host cell. After recognizing the specific structure of the oligosaccharide on the surface of host cells by the surface protein of the influenza virus, the influenza virus can secrete sialidase and cleave the sialic acid attached on the final position of the specific structure of the oligosaccharide on the surface of host cells. Tamiflu (oseltamivir), known as a remedy of swine flu, has a saccharide analog structure, especially the sialic acid analog. Tamiflu can inhibit the invasion of influenza viruses (swine flu and avian flu viruses) into the host cells by competition with sialic acid on the terminal position of the specific oligosaccharide on the surface of the host cell. Because of the emergence of Tamiflu resistance, the development of new potent anti-influenza inhibitors is needed. The inhibitors with positive-charge groups have potential as antiviral therapeutics, and the strain specificity must also be resolved.
Batch enzymatic hydrolysis of egg yolk protein by protease was carried out at laboratory scale coupled to an ultrafiltration module. Effect of ethanol concentrations on the performance of enzymatic hydrolysis was studied to determine the optimum condition of recovery of hydrolysate. The enzymatic hydrolysis was conducted stepwise with following conditions, $50^{\circ}C$, pH 10.0 and pH 6.5. Ethanol concentration was changed from 10 to $40\%$ (w/w). As ethanol concentration was increased, the recovery yield of total solid and protein in enzymatic hydrolysate was also increased. The content of sialic acid and protein in hydrolysate was independent of ethanol concentration. We also investigated the effect of ethanol concentration on the performance of ultrafiltration. As the concentration of ethanol in yolk protein was increased, the recovery yield of product was increased. Ultrafiltration of egg yolk protein hydrolysate was conducted to increase the content of sialic acid. Four ultrafiltation modules were used in this study, and we evaluated the performance of the UF modules. When Amicon module was used, the recovery percentage of total solid in retentate was $6.0\%$, which is the highest among the modules used. In spite of the difference in the recovery yield of total solid, the purity of sialic acid in retentate was about $2.0\%$, which was 5 times higher than that in feed. It was concluded that the recovery yield and the purity of sialic acid did not correlate with the types of modules and the size of MWCO.
This study was conducted to investigate inhibitory effects of K-casein, GMP and sialic acid addition on the infection of MA-104 cells by 597(Korean native cattle rotavirus) and JBR(Jeju island bovine rotavirus). MA-104 cells on incomplete Ml99 were infected with domestically separated 597 and ma activated by incubating at 37$\^{C}$ for 6 days, and analyzed for the titer of rotavirus. K-casein, GMP and sialic acid added MA-104 culture infected by activated S97 and nan were incubated for Is hours and stained by the AEC stainning method. The number of infected cells were counted on microscope. The titer of S97 and JBR was 2.5$\times$107 and 2.0$\times$106 PFU/ml, respectively. The inhibition level against cell infection by 597 was 97.4% far 2000UH of K-casein and 97.44% for 2000UM of GMP. The inhibition level against cell infection by JBR was 99.52% for 2000$\mu$M of $\kappa$-casein and 99.78% for 2000$\mu$M of GMP. The inhibition level against cell infection by 597 and JBR was 3.85 and 3.63% for 2000$\mu$M of sialic acid, respectively. The high inhibitory effects (over 97%) of K-casein and CMP against infection of U-1(14 cells with 597 and mR indicated great potentials for the use of K-casein and GMP in the treatment of calf or infant caused by rotavirus.
The very low density apolipoproteins were separated by a newly developed method of isoelectric focusing in a narrow pH gradient. Four polypeptides were isolated that differed from the major proteins of the high density or low density lipoproteins. Three of these proteins had indistinguishable amino acid compositions, but different isoelectric points, COOH-terminal alanine, no isoleucine, cysteine or cystine. Two of these polypeptides had $NH_2-terminal$ serine. The polymorphism of apolipoprotein-Ala, so designated from the COOH-terminal residue, was related to sialic acid content; one form contained 2 moles of sialic acid per mole of protein, the second, 1 mole of protein, and the third, no sialic acid. The fourth polypeptide had an amino acid composition different from the first three polypeptides and from other polypetides obtained from very low density lipoprotein. This polypeptide had $NH_2-terminal$ threonine, COOH-terminal resistant to carboxypeptidase A, no histidine, cysteine, cystine or sialic acid. These four polypeptides constituted approx. 40% of the total protein in very low density lipoprotein.
The goal of this study was to develop hydrolyzed whey protein powder (23%-GNANA) manufactured with high content of sialic acid, a marker compound that is usually present at 7% concentration in GMP obtained from the milk protein. It is a safe food, used worldwide in infant and baby foods, etc. The test substance was prepared using (7% sialic acid containing) GMP as a raw material. Alcalase, an enzyme approved as a food additive, was used after separating sialic acid, with 100% efficiency, and 23%-GNANA (composed of 23% sialic acid and protein; product name: HELICOBACTROL-23), provided by MEDINUTROL Inc. (Korea), manufactured to have high (23%) content through ethanol soaking and enrichment. Bacterial reverse mutation (Ames) test was conducted in accordance with the GLP Guideline using the test substance specified above. To detect its mutagenicity potential in microorganisms, histidine auxotrophic strains of Salmonella typhimurium, TA98, TA100, TA1535, and TA1537, and tryptophan auxotrophic Escherichia coli strain, WP2uvrA, were used. The bacterial reverse mutation (Ames) test was performed using five concentrations of the test substances (0, 61.7, 185, 556, 1,670, $5,000{\mu}g/plate$). The evaluation did not reveal repetitive increase of colony generating values and positive criteria for reverse mutagenicity for any tested concentration in the five strains regardless of the presence of metabolic activation system, and no dose-dependency. In conclusion, the safety of 23%-GNANA test substance was verified by the bacterial reverse mutation test conducted before registration of 23%-GNANA as a food additive.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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