To establish the optimum conditions of in vitro plant regeneration, the leaf, rhizome, and root explants of Belamcanda chinensis were cultured on the MS medium supplemented with different concentration of 2,4-D and BA. The callus induction was more effective in the root explants than the leaf and rhizome explants, and was the best on MS medium containing 3.0 mg/L 2,4-D or 1.0 mg/L 2,4-D and 3.0 mg/L BA. The highest numbers of shoots were regenerated when callus were cultured on MS medium containing 3.0 mg/L 2,4-D for 4 weeks. However, the multiple shoots were induced on MS medium supplemented with the combination of 2,4-D and BA. The normal root formation from shoot was effective on the MS medium lacking any plant growth regulators. For acclimatization, the regenerated plantlets were cultured on MS medium without sucrose and plant growth regulators for 2 weeks, and then transferred to the pot.
Kim, Ok-Tae;Kim, Min-Young;Kim, Kwang-Soo;Ahn, Jun-Cheul;Hwang, Baik
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.11
no.5
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pp.336-339
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2003
Hydrocotyle maritima Honda used as medicinal plants for a hemostatic agent was investigated for in vitro regeneration. The petiole explants of H. maritima were cultured on callus induction medium containing growth regulators ($0{\sim}5\;mg/l$, NAA and $0{\sim}5\;mg/l$ 2,4-D) either in single or in combination with $0.1{\sim}2\;mg/l$ BA for 6 weeks. Although single treatments of 2,4-D or NAA resulted in callus formation, the best results were combination of $0.5\;mg/l$, 2,4-D and $0.5\;mg/l$, BA. $5\;mg/l$, NAA and $0.5\;mg/l$, BA, respectively. The highest number of shoot (12 shoots per callus) was achieved with $3\;mg/l$, Kinetin. Also, when pieces of embryogenic callus induced on the medium supplemented with $0.5\;mg/l$, 2,4-D and $0.5\;mg/l$, BA were subcultured on hormone-free medium, somatic embryos were differentiated and developed further into welldeveloped plants.
Lee, Young Bok;Seong, Bong Jae;Lee, Eun Gyoung;Lee, Ki Won;Choi, Kwan Sam
Korean Journal of Agricultural Science
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v.20
no.2
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pp.133-144
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1993
Calli were induced on microtuber disks of potato(S.tuberosum) infected with three binary vectors transconjugated with C58, A281 and LBA 4404 of Agrobacterium tumefaciens and pBI121. The frequency inducing callus was the highest by infection of C121 carrying pC58 and pBI121, and shoots were differentiated on the calli without any hormonal application. Transformed calli were selected by their resistance to kanamycin and identified by GUS activity. The frequency of callus formation by infection of binary vector strain was affected according to the hormonal application.
Effects of irrigation control by time and integrated solar radiation on musknelon quality in perlite culture were investigated. Sugar content of melon flesh was high in the irrigation treatment at the following times 6:00, 8:00, 10:00, 11:00, 12:00, 12:30, 13:00, 13:30, 14:00, 14:30, 15:00, 16:00, and 17:00(T-2), compared to the irrigation treatment at every hour from 6:00 to 18:00(T-1) within the irrigation experiment controlled by time. Within the irrigation experiment controlled by integrated solar radiation, sugar content was as high as 15.7(Brix$^{\circ}$) in the 240Wh.m$^{-2}$ , compared to the 180, the 200, and the 220Wh.m$^{-2}$ . Fruit firmness was low in T-2 within the Irrigation experiment by time and in the 220Wh.m$^{-2}$ within the irrigation experiment by integrated solar radiation. Fruit size was smaller in the treatment controlled by integrated solar radiation than by the time treatment. Fruit weight was the heaviest in T-1. The weight of the shoot except for the fruit was lower in treatment of irrigation by integrated solar radiation than by time. In conclusion it is suggested that the appropriate integrated solar radiation pet each irrigation cycle should be 180~20Wh.m$^{-2}$ in the early growing stage, and then gradually increased to 240Wh.m$^{-2}$ from net formation to harvest time.
This study was conducted to identify the effect of planting date and cultivation method on soybean growth and yield in paddy field. The plant height of soybeans in single cropping(SC) was higher than those in cultivating after barley culture (CB). Considering planting date and cultivation method, plant height tend to be higher in SC with level row cultivation(LR) and in CB with high ridge cultivation(HR). In this SC method, nodule formation in LR was better than in HR, but number of nodules of cv. Hwangkeumkong was highest, regardless of planting date and cultivation method. In the progress of growth stage, leaf areas of all cultivars were distinctively increased in CB than in SC. However, dry weight of top plants and roots in SC was comparably higher than that in CB due to growing periods of the soybeans. In cultivation methods, general type of dry weight of top plants was higher in LR than in HR, however, root dry weight was via verses. Growth responses varied depending on cultivars, cultivation methods, and planting date and these factors affected to shoot root (T/R) ratio. The T/R ratios in LR and SC were higher than those in HR and CB. In R8 stage, number of pods and ripened seed varied depending on cultivars. cv. Hwaeomputkong, which showed early maturing trait, was lowest. However, both yield factors tended to be higher in HR and CB than in LR and SC. The ratios of ripened seeds percentage of cv. Hwangkeumkong and cv. Eunhakong were higher in CB than in SC. However, yields of cv. Daewonkon and cv. Taekwangkong were higher in CB than in SC.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2010.05a
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pp.17-17
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2010
Ethylene, known as a stress hormone regulate wide developmental processes including germination, root hair initiation, root and shoot primordial formation and elongation, leaf and flower senescence and abscission, fruit ripening. The acceleration of ethylene biosynthesis in plant associated with environmental and biological stresses. 1-Aminocycloprophane-1-carboxlyate deaminase(ACCD) is an enzyme that cleaves ACC into and ammonia, a precursor of the plant hormone ethylene. Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) having ACCD can decrease endogenous ACC level of tissue, resulting in reduced production of ethylene in plants. ACC deaminse was a key enzyme for protect stressed plants from injurious effects of ethylene. ACCD gene was encoded from Pseudomonas flourescens, PGPR and was cloned in Escherichia coli. We expressed the recombinant ACCD(rACCD) containing 357 amino acids with molecular weight 39 kDa that revealed by SDS-PAGE and western blot. The rACCD was purified by Ni-NTA purification system. The active form of rACCD having enzyme activity converted ACC to a-ketobutyrate. The optimal pH for ACC deaminase activity was pH 8.5, but no activity below pH 7.0 and a less severe tapering activity at base condition resulting in loss of activity at over pH 11. The optimal temperature of the enzyme was $30^{\circ}$ and a slightly less severe tapering activity at 15 - 30$^{\circ}$, but no activity over $35^{\circ}$. P. flourescens ACC deaminase has a highly conserved residue that plays in allowing substrate accessibility to the active sites. The enzymatic properties of this rACCD will provide an important reference for analysis of newly isolated ACCD and identification of newly isolated PGPR containing ACCD.
Hypocotyl explants of Chinese cabbage (cvs. "Jeong Sang") produced transgenic calli on callus induction medium (MS salt, B5 vitamin, 5 mg/L acetosyringone, 1 mg/L 2,4-D, 3% sucrose, 400 mg/L cefotaxime, 100 mg/L paromomycin, pH 5.8) after cocultivation with strains of Agrobacterium tumefaciens (EHA101, LBA4404, GV3101) harboring the pPTN290 containing paromomycin-resistance gene as a selectable marker, and then they transferred to root induction medium (1/2MS salt, MS vitamins, 2% sucrose, 100 mg/L paromomycin, 100 mg/L cefotaxime, pH 5.8) and shoot induction medium (MS salt, B5 vitamin, 4 mg/L $AgNO_3$, 4 mg/L 6-benzyladenine, 3 mg/L alpha-naphthaleneacetic acid, 100 mg/L paromomycin, 100 mg/L cefotaxime, 3% sucrose, pH 5.8) in order. There was a significant difference in the frequency of transgenic calli depending on Agrobacterium strains. In particular, the highest frequency (6.1%) of transgenic calli was obtained from the hypocotyls cocultivated with EHA101 strains. Also, the frequency (%) of transgenic root and plants from each transgenic callus clone were obtained with 60.7% and 38.2% in EHA101, with 8.3% and 0% in LBA4404, with 20.5% and 85.7% in GV3101 strains, respectively. They were grown to maturity in a greenhouse and normally produced $T_2$ seeds. GUS histochemical assay for progeny ($T_2$) revealed that the transgenes was expressed in the plant genome, and progeny analysis from 7 independent transgenic events demonstrated that the transformants transmitted the transgene as a single or multiple functional locus.
The albino plants of tobacco (Nicotiana tobacum L. cv. BY-4) were isolated from seed populations that were induced by heavy-ion ($^{14}N$) beam irradiation to proembryo and the in vitro growth and differentiation have been characterized. The in vitro cultured albino plants showed significant reduction of chlorophyll content and possessed larger number of stomata on both upper and lower epidermis than that of wild-type plants. Stem growth of the mutants remained dwarfed, however, the internode recovered its normal length after GA$_3$ treatment (10.0mg/L) on the MS medium containing sucrose under continuous light. When explants of leaf blades of albino plants were cultured, multiple shoots formed directly on MS medium containing 1.0mg/L of BAP or kinetin and a large number of calli were induced on the MS medium containing 1.0mg/L NAA or 1.0 mg/L 2,4-D. The albino calli regenerated multiple albino plantlets in the MS medium containing 0.1mg/L NAA + 1.0 mg/L BAP. No significant differences between the wild-type and albino plants were detected in the multiple shoot induction, callus formation from the explants and the plantlets regeneration from calli. In addition, albino plants have a similar organogenesis Pattern to that of the wild-type in the media with different combinations of NAA (0 to 5.0mg/L) and BAP (0 to 5.0mg/L) treatment. These results indicate that the albino mutant has the same normal regeneration ability as that of wild-type, although the mutant has lost functions in photosynthesis, such as pigmentation.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.33
no.2
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pp.100-104
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2013
Zoysiagrass (Zoysia japonica Steud.) is an important forage and turfgrass that spreads by stolons and rhizomes. Zoysiagrass stolon can be used directly for Agrobacterium-mediated genetic transformation by exploiting the potential of direct shoot formation. However, surface sterilization of field-grown stolons is difficult and remains to be explored. We developed an effective surface sterilization and culture method using the stolon explant for infection with Agrobacterium tumefaciens. Among various treatments, sequential disinfection in 30% bleach for 15 min followed by 0.1% mercuric chloride for 25 min resulted in the highest number of clean stolons. The efficacy of mercuric chloride was increased under vacuum conditions by incubating at 800 mbar for 5 min. The inclusion of 2.5 mg/l amphotericin B further prevents fungal growth in in vitro cultures. This protocol would speed up the development of transgenic plants by utilizing field-grown stolon nodes.
To identify the differences on plant growth and yield of two rice cultivars among direct water-seeding methods broadcasting on flooded paddy surface(BF), drilling on flooded paddy surface(DF), and puddled-soil drill seeding(PD) under markedly different weather condition between 1995 and 1996. The mean air temperature for duration from May to June, early growth stage of rice in 1995 was lower $1{\sim}3^{\circ}C$ than that in normal or 1996. In 1995 the respiratory consumption index during panicle formation stage and early ripening stage was higher than those of in 1996 or normal year. Number of seedling stand among the methods of direct seeding rice appeared slightly higher in order of BF>DF>PD. Properly in Nonganbyeo, the number of seedling stand was much low in 1995 compared with in 1996. The leaf area index and shoot dry weight at early growth stage of rice plant and culm length at mature in 1995 were larger in direct water seeding rice than those of machanical transplanting rice, but in 1996. Faster ripening speed and shorter ripening period of rice crop appeared in 1996 compared to in 1995. It was due to higher growing degree-days, sunshine hours and solar radiation during rice growing season in 1996. Dongjinbyeo rice showed higher yield than Nonganbyeo which had lower ripened grains especially in 1995.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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